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1、干旱脅迫對(duì)小麥幼苗生理生化指標(biāo)的影響干旱脅迫對(duì)小麥幼苗生理生化指標(biāo)的影響楊萬坤11412023811應(yīng)用生物教育A班摘要:摘要:用小麥幼苗為實(shí)驗(yàn)材料,研究干旱脅迫對(duì)小麥幼苗生理生化指標(biāo)的影響。試驗(yàn)結(jié)果表明:在干旱脅迫(5天)下小麥幼苗中脯氨酸(Pro)、丙二醛(MDA)、過氧化氫(H2O2)、抗氧化酶(PPO、POD)、谷胱甘肽(GSH)、ASA的含量都較正常情況下小麥幼苗的含量高。關(guān)鍵字:關(guān)鍵字:干旱脅迫、小麥幼苗、Pro、MDA、H
2、2O2、PPO、POD、GSH、ASA引言:引言:小麥?zhǔn)俏覈狈降貐^(qū)的主要糧食作物,但是近幾年北方地區(qū)旱情日益嚴(yán)重,小麥產(chǎn)量安全問題日益突出。干旱也屬于逆境,水分在植物的生命活動(dòng)中占主導(dǎo)地位,大多數(shù)植物遭受干旱逆境后各個(gè)生理過程都會(huì)受到不同程度的影響。干旱是我國農(nóng)業(yè)可持續(xù)發(fā)展面臨的主要問題之一干旱脅迫對(duì)植物的影響是一個(gè)復(fù)雜的生理生化過程涉及到許多生物大分子和小分子【1】。干旱脅迫對(duì)植物的影響主要體現(xiàn)在酶活性、膜系統(tǒng)、細(xì)胞失水等,導(dǎo)致細(xì)胞
3、代謝紊亂,甚至是細(xì)胞死亡。本次試驗(yàn)測(cè)定正常生長的小麥幼苗和干旱脅迫處理小麥幼苗中脯氨酸(Pro)、丙二醛(MDA)、過氧化氫、抗氧化酶(PPO、POD)、谷胱甘肽(GSH)、ASA的含量變化來研究干旱脅迫對(duì)小麥的影響,從而找到合適的方法來解決干旱脅迫問題,解決小麥生產(chǎn)安全問題提供理論依據(jù)。1材料與方法材料與方法1.11.1材料及處理材料及處理將小麥種子用0.1%HgCl2消毒10min后,用蒸餾水漂洗干凈,用蒸餾水于26℃下吸漲12h,
4、然后播于墊有6層濕潤濾紙的帶蓋白磁盤(24cm16cm)中→于26℃下暗萌發(fā)60h,計(jì)算發(fā)芽率(注意與前面結(jié)果比較),選取長勢(shì)一致的小麥幼苗做干旱5天干旱處理。5天后用相同的方法分別對(duì)實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組的小麥進(jìn)行脯氨酸、MDA、過氧化氫、抗氧化酶(PPO、POD)、GSH、ASA的含量的測(cè)定。1.21.2測(cè)定方法測(cè)定方法1.211.21玉米種子發(fā)芽率的測(cè)定玉米種子發(fā)芽率的測(cè)定各取50粒吸脹的玉米種子→沿胚的中心線切成兩半(嚴(yán)格區(qū)分兩個(gè)半粒)
5、,進(jìn)行下列實(shí)驗(yàn):其中50個(gè)半粒進(jìn)行TTC染色(30℃水浴20min),另50個(gè)半粒進(jìn)行曙紅染色(室溫染色10min)洗凈后觀察。根據(jù)兩種方法的染色情況,分別計(jì)算發(fā)芽率。1.221.22小麥幼苗脯氨酸含量的測(cè)定小麥幼苗脯氨酸含量的測(cè)定分別取0.1g實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組的胚芽鞘→加入3ml3%磺基水楊酸(SSA)和少許石英砂→充分研磨→用2ml3%SSA洗研缽→5000rpm離心10min→量上清液體積。測(cè)定:上清液各2ml→分別加入2ml冰乙酸
6、和2ml茚三酮試劑→煮沸15min→冷卻后→5000rpm離心10min(若沒沉淀可省略次步驟)→分別測(cè)定A520PPOactivies=用總VVtWA???01.0410(U.g1FW)計(jì)算出PPO和POD的值1.261.26小麥幼苗小麥幼苗GSHGSH的測(cè)定的測(cè)定分別取0.1g實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組的胚芽鞘→加入3ml5%三氯乙酸(TCA)和少許石英砂→充分研磨→用2ml5%TCA洗研缽→5000rpm離心10min→量上清液體積。測(cè)定:上
7、清液各1ml(空白用5%TCA代替)→分別加入2ml0.1MPBS(pH=7.7)→1ml2mMDTNB→25℃5min→測(cè)定A412將測(cè)得的A412值帶入公式GSHcontent=用總顯VVVWLA?????412(umol.g1FW)將GSH的值計(jì)算出來1.271.27小麥幼苗小麥幼苗ASAASA的測(cè)定的測(cè)定?ASA的提取:分別取0.2g實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組的胚芽鞘→加入3ml5%三氯乙酸(TCA)和少許石英砂→充分研磨→用2ml5%TC
8、A洗研缽→5000rpm離心10min→量上清液體積。?測(cè)定:上清液各0.8ml(空白用5%TCA代替)→分別加入0.8ml0.15MNaH2PO4(pH=7.4)和蒸餾水→搖勻→分別加入0.8ml5%TCA、44%磷酸和4%聯(lián)吡啶→搖勻→加入3%FeCl30.8ml→37℃15min→測(cè)定A525?ASAcontent=用總顯VVVWLA?????525(umol.g1FW)2、結(jié)果與分析、結(jié)果與分析發(fā)芽率的測(cè)定:發(fā)芽率的測(cè)定:TTC
9、染色法:44個(gè)具有活力。曙紅染色法:44個(gè)具有活力。分別計(jì)算兩種方法的發(fā)芽率:TTC法4450100%=88%;曙紅染色法4450100%=88%。用兩種方法測(cè)得的種子發(fā)芽率是一樣的,都為88%說明這一批種子的生命活力較高。脯氨酸含量測(cè)定:脯氨酸含量測(cè)定:組別A520V總V顯V用Procontent干旱組1.8424.8ml6ml2ml0.08187mol.g1FW?對(duì)照組0.0185.3ml6ml2ml0.00088mol.g1FW?
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