生物學實驗 lb培養(yǎng)基的配置

1、1實驗實驗6LB培養(yǎng)基的配置培養(yǎng)基的配置一、實驗目的明確培養(yǎng)基配置原理通過對LB培養(yǎng)基的配置，掌握配置培養(yǎng)的一般方法二、實驗原理LB培養(yǎng)基是一種應用最廣泛和最普通的細菌基礎培養(yǎng)基。它含有酵母提取物、蛋白胨和NaCl。其中酵母提取物為微生物提供碳源和能源，磷酸鹽、蛋白胨主要提供氮源，而NaCl提供無機鹽。在配制固體培養(yǎng)基時還要加入一定量瓊脂作凝固劑。瓊脂在常用濃度下96℃時溶化，一般實際應用時在沸水浴中或下面墊以石棉網(wǎng)煮沸溶化，以免瓊脂燒

2、焦。瓊脂在40℃時凝固，通常不被微生物分解利用。固體培養(yǎng)基中瓊脂的含量根據(jù)瓊脂的質(zhì)量和氣溫的不同而有所不同。由于這種培養(yǎng)基多用于培養(yǎng)細菌，因此，要用稀酸或稀堿將其pH調(diào)至中性或微堿性，以利于細菌的生長繁殖。LB培養(yǎng)基的配方如下：酵母提取物5g蛋白胨10gNaCl5g瓊脂15～20g水1000mLpH7.4～7.6三、實驗設備試管，三角燒瓶，燒杯，量筒，玻棒，培養(yǎng)基分裝器，天平，牛角匙，高壓蒸汽滅菌鍋，pH試紙（pH5.5～9.0），棉花

3、，牛皮紙，記號筆，麻繩，紗布等。四、實驗試劑酵母提取物，蛋白胨，NaCl，瓊脂；1molLNaOH，1molLHCl；五、操作步驟1稱量按培養(yǎng)基配方比例依次準確地稱取酵母提取物、蛋白胨、NaCl放入燒杯中。蛋白胨很易吸潮，在稱取時動作要迅速。另外，稱藥品時嚴防藥品混雜，一把牛角匙用于一種藥品，或稱取一種藥品后，洗凈、擦干，再稱取另一藥品，瓶蓋也不要蓋錯。38擱置斜面將滅菌的試管培養(yǎng)基冷至50℃左右，將試管棉塞端擱在玻棒上，擱置的斜面長度