兔子白細(xì)胞介素1βil-1β酶聯(lián)免疫分析

1、兔子白細(xì)胞介素1β（IL1β）酶聯(lián)免疫分析試劑盒使用說(shuō)明書(shū)本試劑盒僅供研究使用。檢測(cè)范圍：96T2ngL80ngL使用目的：本試劑盒用于測(cè)定兔子血清、唾液及相關(guān)液體樣本中白細(xì)胞介素1β（IL1β）含量。實(shí)驗(yàn)原理本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測(cè)定標(biāo)本中兔子白細(xì)胞介素1β（IL1β）水平。用純化的兔子白細(xì)胞介素1β（IL1β）抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入白細(xì)胞介素1β（IL1β），再與HRP標(biāo)記的白細(xì)胞介素1β（IL1

2、β）抗體結(jié)合，形成抗體抗原酶標(biāo)抗體復(fù)合物，經(jīng)過(guò)徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的白細(xì)胞介素1β（IL1β）呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度（OD值），通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中兔子白細(xì)胞介素1β（IL1β）濃度。試劑盒組成130倍濃縮洗滌液20ml1瓶6ml1瓶12孔8條6ml1瓶6ml1瓶6ml1瓶789終止液6ml1瓶0.5ml1瓶1.5ml

3、1瓶1份2酶標(biāo)試劑標(biāo)準(zhǔn)品（160ngL）標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液3酶標(biāo)包被板4樣品稀釋液5顯色劑A液6顯色劑B液10說(shuō)明書(shū)11封板膜12密封袋2張1個(gè)標(biāo)本要求1標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取，提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行，提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn)，可將標(biāo)本放于20℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融2不能檢測(cè)含NaN3的樣品，因NaN3抑制辣根過(guò)氧化物酶的（HRP）活性。操作步驟1.標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋：本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支，用戶可按照下列圖表在小試管中進(jìn)行稀釋。

4、80ngL40ngL20ngL10ngL5ngL5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品4號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品3號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品2號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品1號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品150l的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入150l標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液150l的5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150l標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液150l的4號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150l標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液150l的3號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150l標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液150l的2號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150l標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液2.加樣：分別設(shè)空白孔（空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑，其余各步操作相同）、標(biāo)準(zhǔn)孔、準(zhǔn)曲線的直線回歸方程式，將樣品的OD值代

5、入方程式，計(jì)算出樣品濃度，再乘以稀釋倍數(shù)，即為樣品的實(shí)際濃度。注意事項(xiàng)1試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡1530分鐘后方可使用，酶標(biāo)包被板開(kāi)封后如未用完，板條應(yīng)裝入密封袋中保存。2濃洗滌液可能會(huì)有結(jié)晶析出，稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶，洗滌時(shí)不影響結(jié)果。3各步加樣均應(yīng)使用加樣器，并經(jīng)常校對(duì)其準(zhǔn)確性，以避免試驗(yàn)誤差。一次加樣時(shí)間最好控制在5分鐘內(nèi)，如標(biāo)本數(shù)量多，推薦使用排槍加樣。4請(qǐng)每次測(cè)定的同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線，最好做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測(cè)物質(zhì)含量