電導(dǎo)率測(cè)定

1、逆境脅迫對(duì)植物膜透性的影響逆境脅迫對(duì)植物膜透性的影響——電導(dǎo)法電導(dǎo)法【實(shí)驗(yàn)?zāi)康膶?shí)驗(yàn)?zāi)康摹?.了解逆境脅迫對(duì)植物體膜透性的影響2.掌握電導(dǎo)率的測(cè)定方法【實(shí)驗(yàn)原理實(shí)驗(yàn)原理】植物細(xì)胞膜對(duì)維持細(xì)胞的微環(huán)境和正常的代謝起著重要的作用。在正常情況下，細(xì)胞膜對(duì)物質(zhì)具有選擇透性能力。當(dāng)植物受到逆境影響時(shí)，如高溫或低溫，干旱、鹽漬、病原菌侵染后，細(xì)胞膜遭到破壞，膜透性增大，從而使細(xì)胞內(nèi)的電解質(zhì)外滲，電導(dǎo)率增大。膜透性增大的程度與逆境脅迫強(qiáng)度有關(guān)，也與植物

2、抗逆性的強(qiáng)弱有關(guān)?！緦?shí)驗(yàn)材料實(shí)驗(yàn)材料】1.材料：小麥幼苗：（1）對(duì)照（2）100mM、200mMNaCl處理48h（3）5%、15%PEG6000處理48h2.試劑：雙蒸水3.器材：水浴鍋，電導(dǎo)儀【實(shí)驗(yàn)內(nèi)容實(shí)驗(yàn)內(nèi)容】1、取0.1g對(duì)照和鹽或PEG6000處理的小麥葉片，切成小段（每種處理兩組平行）；2、用雙蒸水沖洗幾遍以除去表面粘附的電解質(zhì)；3、加10ml雙蒸水，25℃振蕩溫育1小時(shí)，期間經(jīng)常搖動(dòng)，測(cè)定此時(shí)的電導(dǎo)率為C1；4、將盛有小麥

3、葉片的試管100℃煮沸15min，冷卻到室溫后，測(cè)定此時(shí)的電導(dǎo)率為C2；5、相對(duì)電導(dǎo)率根據(jù)公式計(jì)算得出：Relativeionleakage=(C1C0)(C2C0)100（注C0為雙蒸水的電導(dǎo)率）【實(shí)驗(yàn)結(jié)果實(shí)驗(yàn)結(jié)果】各種處理數(shù)據(jù)及結(jié)果見(jiàn)下表：雙蒸水電導(dǎo)率C0=1.6處理平行質(zhì)量（g）P1P2相對(duì)電導(dǎo)率10.09899.9151.4對(duì)照20.10260.100811.210.6158.0154.75.845910.1024111.157

4、0.0100mMNaCl20.10420.1033105.0108.1500.0535.019.956910.107892.6640.0200mMNaCl20.10340.105686.689.6489.0564.515.633310.09977.9113.85%PEG600020.10460.10227.27.6114.2114.05.293610.102221.3195.915%PEG600020.10040.101341.731.

5、5186.2191.115.7825【實(shí)驗(yàn)討論實(shí)驗(yàn)討論】1.從結(jié)果中可以看出，逆境脅迫會(huì)導(dǎo)致小麥葉片的膜透性增加，且脅迫程度越大，溶液電導(dǎo)率越大。但與脯氨酸含量測(cè)定的結(jié)果一樣，用5%PEG6000處理后的葉片外溶液相對(duì)電導(dǎo)率甚至小于對(duì)照組。這樣可以推斷，實(shí)驗(yàn)中操作出現(xiàn)結(jié)果誤差的可能性較小，主要原因是由于5%PEG6000處理（輕度干旱脅迫）對(duì)小麥的威脅并不是很大。據(jù)研究，植物體對(duì)逆境脅迫有一耐受程度，當(dāng)逆境脅迫程度小于該臨界值時(shí)，植物體

6、的各項(xiàng)反應(yīng)均變化不大，只有當(dāng)脅迫程度大于該臨界值時(shí)，植物的各項(xiàng)生理指標(biāo)均有突然地，較大的變化。如脯氨酸含量的大量增加，膜透性的突然增加等等。因此，對(duì)于本次實(shí)驗(yàn)而言，有可能是輕度干旱脅迫沒(méi)有達(dá)到臨界程度，植物體各方面生理變化都不明顯，加之操作不精細(xì)，很容易導(dǎo)致樣本測(cè)定值小于空白值。2.與脯氨酸含量趨勢(shì)相同的是，鹽脅迫比干旱脅迫對(duì)小麥的影響要顯著的多。因此，對(duì)于小麥來(lái)講，考慮其種植條件首先是土地的鹽堿化狀況，其次才是土地的干旱情況。小麥在全

7、球的分布范圍很廣，雖然大部分集中在溫帶，但如此高的分布范圍證明小麥對(duì)氣候的適應(yīng)性還是較強(qiáng)的，因此輕度干旱不會(huì)對(duì)小麥造成太大的影響。3.與脯氨酸含量增加不同的是，膜透性的增加是細(xì)胞被傷害所致（脯氨酸含量增加是一種對(duì)逆境的適應(yīng)機(jī)制）。生物膜的選擇透性是生物膜最主要的特征，也是細(xì)胞保持生物活性的基礎(chǔ)。（1）高濃度NaCl可置換細(xì)胞膜結(jié)合的Ca2，使膜結(jié)合Na增加，膜結(jié)構(gòu)和功能破壞，細(xì)胞內(nèi)的K、磷和有機(jī)溶質(zhì)外滲。（2）鹽脅迫和干旱條件下，植物體

8、內(nèi)SOD活性降低，削弱其清除自由基的能力，促進(jìn)膜脂過(guò)氧化作用，導(dǎo)致膜脂過(guò)氧化產(chǎn)物（如MDA）雞肋，這些過(guò)氧化產(chǎn)物與一些細(xì)胞組分進(jìn)行反應(yīng)，使一些酶和膜（結(jié)構(gòu)和功能）遭到破壞，，導(dǎo)致質(zhì)膜透性增大，細(xì)胞內(nèi)溶質(zhì)外滲，外界鹽離子進(jìn)入，從而破壞胞內(nèi)離子平衡，導(dǎo)致代謝紊亂，抑制生長(zhǎng)發(fā)育。（3）根際干旱影響葉片總膜脂脂肪酸配比。受到脅迫時(shí)，質(zhì)膜飽和脂肪酸增加，不飽和脂肪酸減少，當(dāng)葉片含水量下降時(shí)，會(huì)產(chǎn)生這種膜脂配比的改變。（4）逆境脅迫改變細(xì)胞膜沒(méi)系統(tǒng)

9、的活性。當(dāng)植物遭受干旱時(shí)，許多種植物的轉(zhuǎn)化酶，蔗糖酶，蛋白酶，磷酸酶等水解酶和抗壞血酸酶，多酚氧化酶活力增加，MgATP酶活力降低，從而改變了膜沒(méi)系統(tǒng)的活性狀態(tài)，導(dǎo)致酶功能紊亂，使得膜透性增加?？傊?，當(dāng)受到逆境脅迫時(shí)，位于膜上的酶功能紊亂，各種代謝無(wú)序進(jìn)行，膜脂過(guò)氧化加劇。導(dǎo)致質(zhì)膜透性的改變。4.不同植物膜透性隨逆境程度而改變的程度不同，即使在同一植物不同器官中也不同。衰老的葉片很容易受逆境的影響而膜透性增加。抗旱性強(qiáng)或者抗鹽性強(qiáng)的植物