太湖富營(yíng)養(yǎng)化水體和底泥中微生物群落的分子生態(tài)學(xué)研究.pdf

1、20世紀(jì)以來(lái)，富營(yíng)養(yǎng)化問(wèn)題已經(jīng)影響全球許多的淡水湖泊。而水體富營(yíng)養(yǎng)化的顯著特征就是在春夏季節(jié)會(huì)出現(xiàn)大規(guī)模的藍(lán)細(xì)菌水華，其不僅嚴(yán)重破壞了水體中微生物的生態(tài)結(jié)構(gòu)，同時(shí)會(huì)產(chǎn)生大量毒素，給公共安全帶來(lái)重大的威脅。當(dāng)前，我國(guó)湖泊的富營(yíng)養(yǎng)化問(wèn)題是非常突出的，但是對(duì)富營(yíng)養(yǎng)化湖泊中微生物群落進(jìn)行系統(tǒng)性的生態(tài)學(xué)特征研究卻非常有限。因此，了解富營(yíng)養(yǎng)化水環(huán)境中微生物群落的變遷，尤其是對(duì)水華的“罪魁禍?zhǔn)住彼{(lán)細(xì)菌的追蹤，顯得非常的必要，這將有助于人們?nèi)嬲J(rèn)識(shí)藍(lán)細(xì)

2、菌水華暴發(fā)的過(guò)程以及富營(yíng)養(yǎng)化對(duì)整個(gè)水生態(tài)系統(tǒng)的影響。
　　 本研究中，以典型的富營(yíng)養(yǎng)化湖泊--太湖作為研究樣本，通過(guò)克隆文庫(kù)、DGGE指紋圖譜和熒光定量PCR等分子生物學(xué)手段相結(jié)合，對(duì)太湖水體和底泥中的微生物群落結(jié)構(gòu)和豐度進(jìn)行研究，尤其是對(duì)藍(lán)細(xì)菌群落變遷作了較為詳細(xì)和系統(tǒng)的闡述，旨在揭示太湖水體中重要微生物(如藍(lán)細(xì)菌)的群落結(jié)構(gòu)和數(shù)量的動(dòng)態(tài)變化規(guī)律，以及太湖長(zhǎng)期的富營(yíng)養(yǎng)化對(duì)底泥生態(tài)系統(tǒng)的影響，從而對(duì)太湖藍(lán)細(xì)菌水華暴發(fā)、發(fā)展的機(jī)理

3、有更全面的認(rèn)識(shí)，為治理和控制太湖的富營(yíng)養(yǎng)化問(wèn)題提供理論依據(jù)。
　　 對(duì)太湖梅粱灣水域進(jìn)行了為期一年的取樣研究，基于16S rRNA基因特異性片段，并結(jié)合DGGE指紋圖譜和熒光定量PCR技術(shù)對(duì)水體中藍(lán)細(xì)菌群落結(jié)構(gòu)和數(shù)量的動(dòng)態(tài)變化進(jìn)行了研究。結(jié)果顯示：水體中藍(lán)細(xì)菌群落是隨季節(jié)變化而有所變遷的，其中夏季和冬季樣品中的藍(lán)細(xì)菌群落結(jié)構(gòu)構(gòu)成2個(gè)特征類群，而春季和秋季樣品中藍(lán)細(xì)菌的群落結(jié)構(gòu)有很大的相似性。Synechococcus(聚球藻)和

4、Microcystis(微囊藻)是夏季太湖水華暴發(fā)中占優(yōu)勢(shì)的藍(lán)細(xì)菌，它們的大量生長(zhǎng)很可能抑制了水體中其他藍(lán)細(xì)菌的生長(zhǎng)，從而導(dǎo)致了藍(lán)細(xì)菌群落在水華暴發(fā)期間多樣性的下降。在太湖水華暴發(fā)的過(guò)程中，Synechococcus和Microcystis顯示了不同的生長(zhǎng)動(dòng)力學(xué)特征。在太湖藍(lán)細(xì)菌水華暴發(fā)的初期，Syechococcus的生長(zhǎng)速度大于Microcystis的生長(zhǎng)速度；在水華暴發(fā)的后期，Microcystis的生長(zhǎng)速度大于Synechoco

5、ccus的生長(zhǎng)速度；而當(dāng)水華暴發(fā)結(jié)束后，太湖水體中Microcystis的降解速度要慢于Synechococcus。
　　 基于mcyA-Cd基因片段，對(duì)太湖水體中產(chǎn)微囊藻毒素(MC)藍(lán)細(xì)菌的群落結(jié)構(gòu)和豐度進(jìn)行了研究，研究表明：太湖梅粱灣水域中產(chǎn)MC的藍(lán)細(xì)菌幾乎都屬于Microcystis屬。全年中產(chǎn)MC藍(lán)細(xì)菌群落的多樣性是隨著水華的暴發(fā)而變化，水華暴發(fā)期中產(chǎn)MC藍(lán)細(xì)菌群落的多樣性高于非暴發(fā)期內(nèi)產(chǎn)MC藍(lán)細(xì)菌群落的多樣性；而在水華

6、暴發(fā)期間，暴發(fā)的前期(5月～6月)產(chǎn)MC藍(lán)細(xì)菌的多樣性要高于水華暴發(fā)后期(7月～10月)的產(chǎn)MC藍(lán)細(xì)菌的多樣性。同時(shí)，產(chǎn)MC藍(lán)細(xì)菌群落結(jié)構(gòu)的遷移滯后于水華暴發(fā)的程度。對(duì)太湖水體中產(chǎn)MC藍(lán)細(xì)菌的mcyA-Cd基因片段定量的結(jié)果顯示，太湖水體中產(chǎn)MC藍(lán)細(xì)菌的數(shù)量隨著水華的暴發(fā)急劇增加，在5月～10月水華暴發(fā)期，產(chǎn)MC藍(lán)細(xì)菌的數(shù)量是相當(dāng)高的；而在冬季非水華暴發(fā)期，水體中沒(méi)有檢測(cè)到MC的含量，但是mcyA基因仍然能檢測(cè)到，顯示了MC的潛在威脅在

7、水華暴發(fā)期和非暴發(fā)期都是存在的。太湖水體中產(chǎn)MC藍(lán)細(xì)菌的數(shù)量和MC的濃度之間并沒(méi)有顯示出顯著相關(guān)，但產(chǎn)MC藍(lán)細(xì)菌數(shù)量峰值的出現(xiàn)滯后水體中MC含量峰值的出現(xiàn)。
　　 在對(duì)太湖不同深度的6個(gè)底泥樣品中沉積的藍(lán)細(xì)菌群落結(jié)構(gòu)和豐度進(jìn)行了研究顯示，太湖底泥中Microcystis和Synechococcus在整個(gè)藍(lán)細(xì)菌的群落中呈現(xiàn)了很高的多樣性，它們的數(shù)量是隨著深度增加而減少。太湖底泥中Microcystis和Synechococcus的

8、分布特征顯示，隨著太湖水體的富營(yíng)養(yǎng)化程度從中營(yíng)養(yǎng)向超富營(yíng)養(yǎng)轉(zhuǎn)變，Synechococcus也如同Microcystis一樣也開(kāi)始成為太湖水華中占優(yōu)勢(shì)的藍(lán)細(xì)菌，并在水華暴發(fā)時(shí)有趨勢(shì)超越Microcystis的數(shù)量。
　　 通過(guò)綜合運(yùn)用克隆文庫(kù)、DGGE和實(shí)時(shí)熒光定量PCR等分子手段，結(jié)合16S rRNA基因同源性分析，對(duì)太湖不同深度的底泥中細(xì)菌和古菌群落結(jié)構(gòu)和豐度的分布特征作了系統(tǒng)性研究，結(jié)果顯示，太湖底泥中營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)負(fù)荷的升高對(duì)細(xì)

9、菌群落結(jié)構(gòu)的影響較小，其不同深度的底泥樣品之間細(xì)菌群落的結(jié)構(gòu)相對(duì)還是比較相似的，其中δ-變形菌綱和Nitrospira(硝化螺菌)在底泥樣品中呈現(xiàn)了很高的多樣性。同時(shí)結(jié)果顯示，底泥中細(xì)菌的數(shù)量隨著底泥深度的增加也略有增加。太湖底泥樣品中古菌群落主要由廣古菌門(mén)和泉古菌門(mén)組成，其中產(chǎn)甲烷菌是一類重要的古菌群落，它們?cè)诘啄鄻悠分酗@示了很高的多樣性。古菌在不同深度的底泥樣品中群落結(jié)構(gòu)的變化比較大，但其數(shù)量水平并沒(méi)有顯示受到富營(yíng)養(yǎng)化的顯著影響，不