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1、辛硫磷在我國(guó)是一種常用的有機(jī)磷農(nóng)藥,被廣泛用于農(nóng)業(yè)生產(chǎn)和水產(chǎn)養(yǎng)殖中,施于農(nóng)田的辛硫磷會(huì)隨水體遷移進(jìn)入江河中,繼而在水生生物體內(nèi)蓄積。在水產(chǎn)養(yǎng)殖中主要被用作抗寄生蟲(chóng)藥,用于治療中華鳋、錨頭鳋以及三代蟲(chóng)等寄生蟲(chóng)。用作漁藥的辛硫磷也會(huì)對(duì)水生生物的安全造成影響,當(dāng)水體中辛硫磷濃度較高時(shí)會(huì)對(duì)魚(yú)體產(chǎn)生毒性作用,其毒性主要表現(xiàn)為對(duì)魚(yú)體的乙酰膽堿酯酶的抑制作用。本論文進(jìn)行了巨大芽孢桿菌降解辛硫磷的研究,旨在探究有機(jī)磷農(nóng)藥辛硫磷的微生物降解方法,在藥物濃
2、度、碳氮含量和接種量方面進(jìn)行了研究。實(shí)驗(yàn)采用水產(chǎn)用辛硫磷溶液,經(jīng)測(cè)定后確定藥液的有效成分為23%。實(shí)驗(yàn)采用三氯甲烷液液萃取法萃取辛硫磷進(jìn)行高效液相色譜檢測(cè),此萃取法的回收率為105.71%~111.53%。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,當(dāng)辛硫磷濃度低于0.48mg/L時(shí),隨培養(yǎng)基中辛硫磷藥物濃度的增大,巨大芽孢桿菌對(duì)辛硫磷的降解率增高;當(dāng)辛硫磷濃度高于0.48mg/L時(shí),隨培養(yǎng)基中辛硫磷藥物濃度的增大,巨大芽孢桿菌對(duì)辛硫磷的降解率降低,辛硫磷濃度為0.
3、48mg/L時(shí),降解率為79.90±1.37%。培養(yǎng)基中碳氮含量影響辛硫磷的降解率,隨培養(yǎng)基中碳氮含量的降低,辛硫磷的降解率增加。巨大芽孢桿菌的接種量同樣影響辛硫磷的降解率,當(dāng)接種比例為3%,可達(dá)最佳降解效果。實(shí)驗(yàn)表明,當(dāng)藥物濃度較低,碳氮含量為原培養(yǎng)基的1%,接種量為3%時(shí),可取得較好降解效果,最大降解率可達(dá)100%。同時(shí),本實(shí)驗(yàn)采用液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜法對(duì)充足碳氮源和缺乏碳氮源條件下的辛硫磷降解產(chǎn)物進(jìn)行了比較分析,發(fā)現(xiàn)充足碳氮源條件下的
4、辛硫磷可能存在感光異構(gòu)體,其它組分無(wú)明顯差異。最后,對(duì)巨大芽孢桿菌降解后的辛硫磷水溶液進(jìn)行了生物毒性評(píng)估實(shí)驗(yàn),記錄了實(shí)驗(yàn)過(guò)程中魚(yú)體的死亡率,檢測(cè)了魚(yú)體內(nèi)乙酰膽堿酯酶和超氧化物歧化酶的活性,藥物細(xì)菌組乙酰膽堿酯酶活性為0.413±0.101U/mL,明顯仍低于空白組3.361±0.349U/mL,推斷辛硫磷降解后的水溶液對(duì)乙酰膽堿酯酶仍有抑制作用;但藥物細(xì)菌組魚(yú)體死亡率為0%,藥物組的魚(yú)體死亡率為100%,證明在辛硫磷降解后水溶液中,魚(yú)體
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