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1、大連依利特大連依利特P1201P1201高效液相色譜儀操作程序高效液相色譜儀操作程序梯度梯度僅作參考(不同實驗需區(qū)別對待)請盡早閱讀使用手冊僅作參考(不同實驗需區(qū)別對待)請盡早閱讀使用手冊1.1.儀器組成儀器組成大連依利特高效液相色譜儀由P1201泵兩臺、UV1201檢測器(190650nm)一臺、ZWII柱溫箱(選配)一臺及EC2006色譜數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)組成。2.2.開機開機2.1接通穩(wěn)壓電源,依次打開兩臺P1201泵開關(guān),UV1201
2、檢測器開關(guān),ZWII柱溫箱開關(guān)(實驗無溫度要求可不開),(第一次使用連續(xù)按兩下泵“操作菜單”進入菜單2,按“下光標(biāo)”鍵進入AB泵的設(shè)定選項,分別設(shè)定好AB泵。具體參考P1201泵使用手冊3.3AB泵設(shè)定第28頁.)通入經(jīng)過濾并超聲處理的流動相,打開放空閥,按“沖洗”鍵排除氣泡,按“沖洗”鍵放空閥出口無液體流出時,需要用20ml注射器抽去管路上的氣泡,,待氣泡排盡后(一般至少30秒以上),再按一次“沖洗”鍵,停止沖洗,然后關(guān)閉放空閥。(注
3、:更換流動相時需要注意是否互溶。具體參考P1201泵使用手冊41流動相的更換第36頁.)2.2打開計算機主機開關(guān),顯示器開關(guān),打印機開關(guān)。2.3進入EC2006色譜數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)(具體參考EC2006色譜數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)使用手冊(第4章系統(tǒng)控制41頁.)2.3.1在計算機桌面上雙擊EC2006色譜數(shù)據(jù)處理,或者在開始菜單→程序→EC2006色譜數(shù)據(jù)處理→EC2006色譜數(shù)據(jù)處理系統(tǒng),啟動EC2006色譜數(shù)據(jù),點擊左邊儀器控制→系統(tǒng)配置,選擇U
4、V1201檢測器,P1201泵AP1201泵B柱溫箱(未開啟可不選),點擊驗證系統(tǒng)配置,彈出窗口內(nèi)當(dāng)前的設(shè)備必須包括前面所有選擇的儀器(檢測器,泵A,泵B,柱溫箱),否則不能進入下一步操作。2.3.2分析參數(shù)的設(shè)置2.3.2.1若是一個新的分析物質(zhì),點擊“新建一個新方法”,點擊左邊儀器控制→儀器控制,在“梯度控制”內(nèi)設(shè)置總流速,兩種流動相比例,梯度曲線設(shè)置,最大壓力等;色譜圖。點擊色譜圖上的“最大化”按鈕,在譜圖的下方會出現(xiàn)具體的數(shù)據(jù),
5、或者點擊“查看組分表與積分結(jié)果”,出現(xiàn)組分表窗口,與譜圖下方出現(xiàn)的數(shù)據(jù)一致,在窗口內(nèi)單擊右鍵,出現(xiàn)菜單,選擇“屬性”,彈出“項目選項”窗口,在我們所需要的選項前打鉤,在組分表內(nèi)出現(xiàn)相應(yīng)的圖譜數(shù)據(jù)。根據(jù)需要對色譜圖及數(shù)據(jù)進行分析處理,然后點擊“打印預(yù)覽”,查看是否符合要求,然后再點擊“打印”即可打印相應(yīng)的圖譜及數(shù)據(jù)。5關(guān)機關(guān)機5.1測定工作完成后,用甲醇洗泵、柱和檢測器。逐級關(guān)閉EC2006軟件窗口退出,關(guān)閉計算機和打印機,或者等柱子沖洗
6、完畢后再一起關(guān)閉亦可。如:反相色譜柱C18保存步驟。1.普通有機相水相體系(不含緩沖鹽)可以直接用純有機相體系1mlmin洗30倍柱體積(30min以上),走平基線,保存柱子及儀器。2.用含緩沖鹽(酸,堿,鹽等)流動相做實驗時,先用甲醇:水=10:90(或乙腈:水=10:90)1mlmin洗30倍柱體積(30min以上),再換上純甲醇(或純乙腈)體系1mlmin洗30倍柱體積(30min以上),走平基線,保存柱子及儀器。其他色譜柱保存嚴(yán)
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