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1、■高中生物課件(人教課標(biāo)版) 安義中學(xué),課題2:月季的花藥培養(yǎng),一、課題目標(biāo)說(shuō)出被子植物花粉發(fā)育的過(guò)程及花藥培養(yǎng)產(chǎn)生花粉植株的兩種途徑,說(shuō)出影響花藥培養(yǎng)的因素,學(xué)習(xí)花藥培養(yǎng)的基本技術(shù),嘗試用月季或其他植物的花藥進(jìn)行培養(yǎng)。二、課題重點(diǎn)與難點(diǎn)課題重點(diǎn):選取適宜的培養(yǎng)材料和培養(yǎng)基。課題難點(diǎn):選取適宜的培養(yǎng)材料和培養(yǎng)基。,(一)被子植物的花粉發(fā)育被子植物的花的結(jié)構(gòu)是怎樣的?觀察下圖,和減數(shù)分裂比較,你能指出對(duì)應(yīng)的時(shí)期嗎?又有何特
2、點(diǎn)?,雌蕊:,,花絲,花藥:囊狀結(jié)構(gòu),內(nèi)有很多花粉粒,花粉是小孢子母細(xì)胞經(jīng)過(guò)減數(shù)分裂而形成的,因此,花粉是單倍體的生殖細(xì)胞?;ǚ鄣陌l(fā)育要經(jīng)歷:四分體時(shí)期、單核期、雙核期,又稱(chēng)人造種子、合成種子或無(wú)性種子,就是將組織培養(yǎng)所產(chǎn)生的體細(xì)胞胚、不定芽、頂芽、腋芽或小鱗莖等繁殖體,包裹在能提供營(yíng)養(yǎng)的膠囊(人造胚乳)里,再在外面包上一層具有保護(hù)功能和防止機(jī)械損傷的外膜(人造種皮),造成一種類(lèi)似種子的結(jié)構(gòu),能在一定的條件下萌發(fā)生長(zhǎng),形成完整植株。,
3、(二)產(chǎn)生花粉植株的兩種途徑有哪兩種途徑?原因是什么?,(三)影響花藥培養(yǎng)的因素1、材料的選擇不同植物同一植物的不同生理狀況(花期早期-初花期)合適的花粉發(fā)育期(單核居中期與靠邊期之間)此外,植株生長(zhǎng)條件、材料低溫預(yù)處理、接種密度等2、培養(yǎng)基的組成,材料的選擇: 花期早期時(shí)的花藥比后期的更容易產(chǎn)生花粉植株。一般,月季的花藥培養(yǎng)時(shí)間選在五月初到五月中旬,即月季的初花期。 選擇合適的花粉
4、發(fā)育時(shí)期也是提高誘導(dǎo)成功率的重要因素。一般來(lái)說(shuō),在單核期,細(xì)胞核由中央移向細(xì)胞一側(cè)的時(shí)期,花藥培養(yǎng)成功率最高。 為了挑選到單核期的花藥,通常選擇完全未開(kāi)放的花蕾。,為什么花瓣松動(dòng)會(huì)給材料的消毒帶來(lái)困難?答:花瓣松動(dòng)后,微生物就可能侵入到花藥,給材料的消毒帶來(lái)困難。,(一)材料的選取染色鏡檢(二)材料的消毒酒精、氯化汞、次氯酸鈣(三)接種和培養(yǎng)結(jié)果分析與評(píng)價(jià),選擇花藥時(shí),一般通過(guò)鏡檢來(lái)確定其中的花粉是否處于
5、適宜的發(fā)育期。 最常用的方法有醋酸洋紅法。但是,某些植物的花粉細(xì)胞核不易著色,需采用焙花青-鉻礬法,這種方法能將花粉細(xì)胞核染成藍(lán)黑色。,1、花蕾用V/V為70%的酒精浸泡30秒2、無(wú)菌水清洗3、無(wú)菌吸水紙吸干花蕾表面的水分4、放入質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0.1%的氯化汞溶液中2~4分鐘(也可質(zhì)量分?jǐn)?shù)為1%的次氯酸鈣溶液或飽和漂白粉溶液)5、無(wú)菌水沖洗3~5次 用于培養(yǎng)花藥,實(shí)際上多數(shù)未熟,由于它的外面有花萼
6、、花瓣或穎片保護(hù),通常處于無(wú)菌狀態(tài),所以只要將整個(gè)花蕾或幼穗消毒即可。,滅菌后花蕾,要在無(wú)菌條件下除去萼片和花瓣,并立即將花藥接種到培養(yǎng)基上。在剝離花藥時(shí),要盡量不損傷花藥(否則接種后,容易從受傷部位產(chǎn)生二倍體的愈傷組織),同時(shí)還要徹底去除花絲,因?yàn)榕c花絲相連的花藥不利于愈傷組織或胚狀體的形成。 通常每瓶接種花藥7-10個(gè),溫度控制在25℃左右,不需要光照。幼小植株形成后才需要光照。 一般經(jīng)過(guò)20-30天培養(yǎng)
7、后,會(huì)發(fā)現(xiàn)花藥開(kāi)裂,長(zhǎng)出愈傷組織或釋放出胚狀體。將愈傷組織及時(shí)轉(zhuǎn)移到分化培養(yǎng)基上,以便進(jìn)一步分化出再生植株。,如果花藥開(kāi)裂釋放出胚狀體,則一個(gè)花藥內(nèi)就會(huì)產(chǎn)生大量幼小植株,必須在花藥開(kāi)裂后盡快將幼小植株分開(kāi),分別移植到新的培養(yǎng)基上,否則這些植株將很難分開(kāi)。 在花藥培養(yǎng)中,特別是通過(guò)愈傷組織形成的花粉植株,常常會(huì)出現(xiàn)染色體倍性的變化。(主要原因是營(yíng)養(yǎng)核和生殖核融合造成的。),植物組織培養(yǎng)技術(shù)與花藥培養(yǎng)技術(shù)的異同點(diǎn),三、課
8、題背景分析課題背景介紹了花藥培養(yǎng)的歷史以及花藥培養(yǎng)在育種工作上的意義。有條件的話(huà)可以 嘗試某種植物的花藥培養(yǎng)。被子植物的花粉發(fā)育知識(shí)要點(diǎn):1.花粉是單倍體生殖細(xì)胞;2.花粉的發(fā)育要經(jīng)歷不同的時(shí)期。產(chǎn)生花粉植株的兩種途徑知識(shí)要點(diǎn):花藥培養(yǎng)產(chǎn)生花粉植株的兩種途徑。影響花藥培養(yǎng)的因素知識(shí)要點(diǎn):選取適宜的材料和培養(yǎng)基組成是花粉植株誘導(dǎo)成功的關(guān)鍵。,練習(xí)1.答:F2代紫色甜玉米的基因型組成可能為Aasusu或AAsusu。如果運(yùn)用
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