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1、南京森貝伽生物科技有限公司1人血小板衍生生長(zhǎng)因子人血小板衍生生長(zhǎng)因子(PDGF)(PDGF)酶聯(lián)免疫分析酶聯(lián)免疫分析試劑盒使用說(shuō)明書試劑盒使用說(shuō)明書本試劑僅供研究使用本試劑僅供研究使用目的:本試劑盒用于測(cè)定人血清,血漿及相關(guān)液體樣本中目的:本試劑盒用于測(cè)定人血清,血漿及相關(guān)液體樣本中血小板衍生生長(zhǎng)血小板衍生生長(zhǎng)因子因子(PDGF)(PDGF)的含量。的含量。實(shí)驗(yàn)原理:實(shí)驗(yàn)原理:本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測(cè)定標(biāo)本中人血小板衍生生長(zhǎng)因子(PD
2、GF)水平。用純化的人血小板衍生生長(zhǎng)因子(PDGF)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入血小板衍生生長(zhǎng)因子(PDGF),再與HRP標(biāo)記的血小板衍生生長(zhǎng)因子(PDGF)抗體結(jié)合,形成抗體抗原酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過(guò)徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的血小板衍生生長(zhǎng)因子(PDGF)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度(OD值),通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)
3、曲線計(jì)算樣品中人血小板衍生生長(zhǎng)因子(PDGF)濃度。試劑盒組成試劑盒組成:試劑盒組成48孔配置96孔配置保存說(shuō)明書1份1份封板膜2片(48)2片(96)密封袋1個(gè)1個(gè)酶標(biāo)包被板14819628℃保存標(biāo)準(zhǔn)品:18ngL0.5ml1瓶0.5ml1瓶28℃保存標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液1.5ml1瓶1.5ml1瓶28℃保存酶標(biāo)試劑3ml1瓶6ml1瓶28℃保存樣品稀釋液3ml1瓶6ml1瓶28℃保存顯色劑A液3ml1瓶6ml1瓶28℃保存顯色劑B液3ml1
4、瓶6ml1瓶28℃保存終止液3ml1瓶6ml1瓶28℃保存濃縮洗滌液(20ml20倍)1瓶(20ml30倍)1瓶28℃保存樣本處理及要求樣本處理及要求:1.血清:室溫血液自然凝固1020分鐘,離心20分鐘左右(20003000轉(zhuǎn)分)。仔細(xì)收集上清,保存過(guò)程中如出現(xiàn)沉淀,應(yīng)再次離心。2.血漿:應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合1020分鐘后,離心20分鐘左右(20003000轉(zhuǎn)分)。仔細(xì)收集上清,保存過(guò)程中如有沉淀形成
5、,應(yīng)該再次離心。3.尿液:用無(wú)菌管收集,離心20分鐘左右(20003000轉(zhuǎn)分)。仔細(xì)收集上清,保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照實(shí)行。南京森貝伽生物科技有限公司3用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。2濃洗滌液可能會(huì)有結(jié)晶析出,稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶,洗滌時(shí)不影響結(jié)果。3各步加樣均應(yīng)使用加樣器,并經(jīng)常校對(duì)其準(zhǔn)確性,以避免試驗(yàn)誤差。一次加樣時(shí)間最好控制在5分鐘內(nèi),如標(biāo)本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。4請(qǐng)每次測(cè)定的同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線
6、,最好做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測(cè)物質(zhì)含量過(guò)高(樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔第一孔的OD值),請(qǐng)先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測(cè)定,計(jì)算時(shí)請(qǐng)最后乘以總稀釋倍數(shù)(n5)。5封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。6底物請(qǐng)避光保存。7嚴(yán)格按照說(shuō)明書的操作進(jìn)行,試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).8所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。9本試劑不同批號(hào)組分不得混用。10.如與英文說(shuō)明書有異,以英文說(shuō)明書為準(zhǔn)。計(jì)算:計(jì)算:以標(biāo)準(zhǔn)物的濃度為橫坐標(biāo),
7、OD值為縱坐標(biāo),在坐標(biāo)紙上繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線,根據(jù)樣品的OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線查出相應(yīng)的濃度;再乘以稀釋倍數(shù);或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與OD值計(jì)算出標(biāo)準(zhǔn)曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式,計(jì)算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數(shù),即為樣品的實(shí)際濃度。(此圖僅供參考)試劑盒性能:試劑盒性能:1.樣品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值為0.95以上。2.批內(nèi)與批見(jiàn)應(yīng)分別小于9%和11%檢測(cè)范圍:檢測(cè)范圍:0.8ngL15ngL保存條件及有效期:保存條件及有效期:
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