血細(xì)胞分離機(jī)的臨床應(yīng)用

1、血細(xì)胞分離機(jī)的臨床應(yīng)用,© Copyright Fresenius Kabi AG,基本概念,血液：血液是人體唯一的液體“器官”由液態(tài)血漿和自由懸浮于血漿中的有形成分組成血液容量一般為體重6-8%，其中血漿55-60%，血細(xì)胞40-45%非細(xì)胞成分—血漿，含有各種血漿蛋白、凝血因子和晶體鹽細(xì)胞成分—紅細(xì)胞、白細(xì)胞、血小板等,© Copyright Fresenius Kabi AG,全血的組成,,全血,細(xì)胞成

2、分 血漿,白細(xì)胞 血小板纖維蛋白原 血清,紅細(xì)胞,纖維蛋白,coagulation / clotting凝血/血栓形成,,,,Hematocrit 血細(xì)胞比容(壓積),© Copyright Fresenius Kabi AG,基礎(chǔ)知識(shí),全血是一個(gè)”液體器官” 多種不同的細(xì)胞懸浮在液體中-”血漿” 在健康個(gè)體中的差異顯著,,1,36,45,1,63,54,紅細(xì)胞 血漿 Leukocyt

3、es and Platelets (白膜),,,,© Copyright Fresenius Kabi AG,基礎(chǔ)知識(shí)-------全血的組成,血漿:水 蛋白質(zhì) 脂肪碳水化合物 電解質(zhì)血紅蛋白（游離）,細(xì)胞:紅細(xì)胞 (RBC)白細(xì)胞 (WBC) - 淋巴細(xì)胞 - 單核細(xì)胞 - 粒細(xì)胞血小板,1,36,63,紅細(xì)胞 血漿 Leukocytes and Platelets (白膜),&#

4、169; Copyright Fresenius Kabi AG,基礎(chǔ)知識(shí)------血漿的蛋白組成及功能,,蛋白種類典型成員Typical member功能,運(yùn)輸?shù)鞍装椎鞍?(HSA; 約占血漿蛋白的60%,通用的運(yùn)輸者。維持血管內(nèi)的滲透壓,免疫球蛋白(Ig),抗體 (IgG, IgM, IgA,IgD, IgE),免疫防御 (體液免疫),Cytokines白介素, 干擾素,生長(zhǎng)因子,免疫系統(tǒng)間的信號(hào)。也與許多提體細(xì)胞

5、和組織反應(yīng),*不完整顯示; 僅顯示與輸血有關(guān)的最主要蛋白,,,,凝集因子F.VIII, 纖維蛋白原 凝聚/產(chǎn)生纖維蛋白多聚體.補(bǔ)體C1 到 C9 引起炎性反應(yīng)，引起溶血抑制物抗凝血酶 III (ATIII) 纖維蛋白溶解. 一般說(shuō)來(lái): 阻斷酶 的激活,非細(xì)胞成分（血漿）的主要功能：免疫調(diào)節(jié)、

6、代謝、物質(zhì)交換、凝血,© Copyright Fresenius Kabi AG,基礎(chǔ)知識(shí)- - 細(xì)胞成分來(lái)源和主要功能,細(xì)胞成分 紅細(xì)胞：在骨髓中產(chǎn)生 是血液中最多的細(xì)胞，占總血量45% 主要成分為血紅蛋白 主要功能是儲(chǔ)存和運(yùn)送氧和二氧化碳 白細(xì)胞：由骨髓和淋巴組織制造 包括粒細(xì)胞、淋巴細(xì)胞

7、、單核細(xì)胞等 主要作用是免疫功能，破壞和排除進(jìn)入人體的外來(lái)物孩子 占總血量1% 血小板：骨髓中產(chǎn)生 主要功能為形成血小板血栓，起到初步止血作用,© Copyright Fresenius Kabi AG,造血干細(xì)胞,定義：具有高度自我更新和分化潛能的造血前體細(xì)胞，是不均一的細(xì)胞群體，由不同分化或者年齡等級(jí)的干細(xì)胞組成。所有的血細(xì)

8、胞都源自一種干細(xì)胞 干細(xì)胞具有多能性，它們能產(chǎn)生造血系統(tǒng)的任何細(xì)胞特性：高度自我更新能力—維持造血干細(xì)胞數(shù)量穩(wěn)定，與成熟細(xì)胞之間動(dòng)態(tài)平衡 長(zhǎng)期或永久造血重建 多向分化潛能—分化為各種成熟血細(xì)胞 沒(méi)有特異性形態(tài)學(xué)鑒別特征—分子水平方可分析鑒別 主要標(biāo)志——CD34抗原,© Copyright Fresenius Kabi AG,

9、造血干細(xì)胞,移植用途造血干細(xì)胞的可靠來(lái)源 骨髓造血干細(xì)胞移植——經(jīng)典造血干細(xì)胞移植方法 優(yōu)點(diǎn)：能獲得大量造血干細(xì)胞 缺點(diǎn)：操作繁瑣，需要麻醉，有一定手術(shù)風(fēng)險(xiǎn) 外周血造血干細(xì)胞移植——最常用 優(yōu)點(diǎn)：易于接受，能滿足多次采集要求，造血重建快 缺點(diǎn)：

10、需用細(xì)胞因子動(dòng)員 臍帶血造血干細(xì)胞移植——移植后GVHD輕，但造血干細(xì)胞絕對(duì)數(shù)量少，不能多次采集，適用于體重較小兒童,© Copyright Fresenius Kabi AG,造血干細(xì)胞,分類 自體造血干細(xì)胞移植，同基因造血干細(xì)胞移植，異基因造血干細(xì)胞移植（健康供者）臨床應(yīng)用現(xiàn)狀 — 20多年以來(lái)，干細(xì)胞治療疾病已為臨床所肯定，特別是外周血造血干細(xì)胞移植 — 應(yīng)用范圍和適應(yīng)癥已大大超過(guò)當(dāng)初針

11、對(duì)惡性血液疾病的范疇 — 逐漸向免疫治療、基因治療以及細(xì)胞治療擴(kuò)展 — 外周血干細(xì)胞的廣泛應(yīng)用得益于兩個(gè)有益因素： (1)與其他組織類型的干細(xì)胞相比，造血干細(xì)胞更容易獲得且數(shù)量龐大 (2)血細(xì)胞分離機(jī)的出現(xiàn)及性能的不斷提高 — 目前，外周血干細(xì)胞已取代骨髓干細(xì)胞成為臨床干細(xì)胞移植的最主要來(lái)源,造血干細(xì)胞,臨床應(yīng)用范圍 經(jīng)典——血液系統(tǒng)疾?。◥盒耘c非惡性） 發(fā)展——實(shí)

12、體腫瘤、自身免疫病、肝炎（免疫治 療） 組織細(xì)胞壞死性疾?。ㄖС种委煟?© Copyright Fresenius Kabi AG,現(xiàn)代細(xì)胞分離技術(shù),物理學(xué)特性——溫和，保留細(xì)胞性質(zhì)，對(duì)患者無(wú)傷害，適于臨床應(yīng)用 （1）離心式：95%以上，應(yīng)用范圍廣 （2）濾膜式：應(yīng)用范圍狹窄，主要用于血漿置換和血漿/血小板采集 （3）吸附式：嚴(yán)格說(shuō)來(lái)屬于血漿成分分離

13、，利用吸附柱選擇性去除致病物質(zhì)是血漿置換的發(fā)展方向，但吸附柱價(jià)格昂貴限制了臨床廣泛應(yīng)用生物化學(xué)特性——基礎(chǔ)研究不適用于臨床,© Copyright Fresenius Kabi AG,血細(xì)胞分離機(jī)的發(fā)展歷史,© Copyright Fresenius Kabi AG,Apheresis-單采,含義： 源于希臘語(yǔ)，“taking out”之意，意為通過(guò)外力或者分離的方法將某物移去或拿走放血療法，水蛭現(xiàn)

14、代血液分離技術(shù)：1914年 美國(guó)Johns Hopkins醫(yī)學(xué)院 尿毒癥狗第二次世界大戰(zhàn) 血液短缺 加速血液分離技術(shù)研究血細(xì)胞分離機(jī)（20世紀(jì)）50年代初 Dr.Cohn開(kāi)發(fā)出第一臺(tái)封閉式血液分離機(jī)，非連續(xù)式，抽取-分離-返還Latham設(shè)計(jì)，Latham離心機(jī)，效果較好，Hemonetics公司成立，首次倫敦1962年，IBM 開(kāi)發(fā)第一臺(tái)連續(xù)式血細(xì)胞分離機(jī)，1966年推出2990型1984年，COBE獲得IBM的

15、設(shè)計(jì)，后來(lái)推出Spectra,© Copyright Fresenius Kabi AG,當(dāng)前市售主要機(jī)型,連續(xù)式 兩個(gè)血管通路，采血針-回輸針 血流在整個(gè)分離過(guò)程中不間斷 體外容量小，安全，效率高 COBE Spectra，CS3000Plus，COM.TEC間斷式 一個(gè)血管通路，采血與回輸同一根針 血流間斷 MCS+,基本原理,根據(jù)細(xì)胞大小和密度不同，在離心力的作用下，其

16、在一定介質(zhì)中的沉降速率也不同，，從而將它們分離。,沉降率,影響沉降的因素細(xì)胞密度細(xì)胞容量和形狀血漿粘滯度細(xì)胞數(shù)離心力與離心時(shí)間 抗凝劑,© Copyright Fresenius Kabi AG,© Copyright Fresenius Kabi AG,全血離心的結(jié)果,,重離心 輕離心,血漿,富血小板血漿 (PRP),白膜(白細(xì)胞+ 血小板),白膜(白細(xì)胞),紅細(xì)胞,紅細(xì)胞,,,

17、,© Copyright Fresenius Kabi AG,血細(xì)胞分離機(jī)能做什么？,分離得到血液中某種成分 血漿（置換、吸附）血小板（采集、去除）白細(xì)胞（采集外周血干細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、粒細(xì)胞;白細(xì)胞去除;骨髓淘洗）紅細(xì)胞（置換、去除）臨床應(yīng)用分類采集有用細(xì)胞用于治療（白細(xì)胞群：外周血干細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、單核細(xì)胞、樹(shù)突細(xì)胞）去除血液中的病理物質(zhì),© Copyright Fresenius Kabi AG,

18、COM.TEC-------費(fèi)森尤斯-血液分離機(jī),© Copyright Fresenius Kabi AG,原理示意,© Copyright Fresenius Kabi AG,原理示意,© Copyright Fresenius Kabi AG,應(yīng)用范圍,血小板采集機(jī)采血小板（采供血機(jī)構(gòu)）術(shù)前自體血小板儲(chǔ)備？ 粒細(xì)胞采集嚴(yán)重感染,© Copyright Fresenius Kabi

19、 AG,應(yīng)用范圍,造血干細(xì)胞移植、血液治療血液科特點(diǎn)：技術(shù)成熟，開(kāi)展廣泛；但病例集中在少數(shù)大醫(yī)院需配套硬件建設(shè),© Copyright Fresenius Kabi AG,應(yīng)用范圍,外周血干細(xì)胞移植（再生醫(yī)學(xué)）：下肢缺血性疾?。ㄌ悄虿∽?、下肢血管閉塞）神經(jīng)缺血壞死性疾病（腦外傷后遺癥、腦癱、帕金森病、脊髓側(cè)索硬化癥）骨質(zhì)壞死性疾?。ü晒穷^壞死、骨折后愈合不良） ……內(nèi)分泌科、神經(jīng)外科、骨科、心臟內(nèi)外科、再生醫(yī)

20、學(xué)中心 特點(diǎn)：發(fā)展迅速，潛力大應(yīng)用極為廣泛，病例多，技術(shù)門(mén)檻低，能馬上開(kāi)展，管理寬松，學(xué)術(shù)空間大,© Copyright Fresenius Kabi AG,應(yīng)用范圍,淋巴細(xì)胞采集：腫瘤生物免疫治療肝炎、肝纖維化的免疫治療不明原因的習(xí)慣性流產(chǎn)？ 特點(diǎn)前沿治療方法，病例量大需要配套基本的實(shí)驗(yàn)室技術(shù),© Copyright Fresenius Kabi AG,應(yīng)用范圍,血漿置換急診科，免疫科

21、，肝病科，神經(jīng)內(nèi)科，腎內(nèi)科，血液科特點(diǎn)：應(yīng)用極為廣泛快速有效的治療手段血漿來(lái)源困難,© Copyright Fresenius Kabi AG,TPE臨床應(yīng)用指南,TPE臨床應(yīng)用指南（續(xù)）,© Copyright Fresenius Kabi AG,TPE臨床應(yīng)用指南（續(xù)）,TPE臨床應(yīng)用指南（續(xù)）,© Copyright Fresenius Kabi AG,應(yīng)用范圍,血漿吸附治療 高脂血癥

22、 免疫疾?。⊿LE……） 高膽紅素血癥,© Copyright Fresenius Kabi AG,應(yīng)用范圍,血漿吸附治療高脂血癥免疫疾?。⊿LE……）高膽紅素血癥--- 吸附柱的可靠性問(wèn)題，在血漿來(lái)源困難的情況下有一定出路,COM.TEC-------全功能,© Copyright Fresenius Kabi AG,,高效分離血小板,,多種高效干細(xì)胞程序,自體和供者干細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、粒細(xì)

23、胞采集骨髓采集后的離體處理,,所有的血液治療程序,血漿置換＼紅細(xì)胞置換或去除 ＼血小板去除＼粒細(xì)胞或白細(xì)胞去除\獨(dú)有的血漿吸附治療,臨床應(yīng)用實(shí)例,輸血科目前共完成細(xì)胞單采術(shù)59人次，均取得了良好的療效 2013年6月成功開(kāi)展第一例血細(xì)胞分離治療（白細(xì)胞單采術(shù)），該患者為一名慢粒急變患者，入院檢查白細(xì)胞高達(dá)139*109/L,白細(xì)胞過(guò)高易引起淤滯危及生命，經(jīng)血液科、輸血科與患者溝通，決定及時(shí)為患者實(shí)施白細(xì)胞單采術(shù)，經(jīng)過(guò)4個(gè)小時(shí)的單采，

24、病人白細(xì)胞降至74.5*109/L，單采過(guò)程中患者無(wú)不適，自覺(jué)癥狀良好。,2014年8月21日，血液科慢粒患者，白細(xì)胞239*109/L,經(jīng)過(guò)52個(gè)循環(huán)白細(xì)胞分離去除，白細(xì)胞數(shù)降至37*109/L，治療效果非常明顯。,第一例白細(xì)胞單采患者,白細(xì)胞單采去除的白細(xì)胞,紅細(xì)胞單采術(shù)主要應(yīng)用于真性紅細(xì)胞增多癥患者， 利用血細(xì)胞分離機(jī)將患者血液中的病理性紅細(xì)胞分離和祛除出去，但又不丟失血小板等其他珍貴的血液成分，該辦法具有安全可靠的特點(diǎn)，能在最短

25、的時(shí)間內(nèi)緩解患者病情，減輕了患者痛苦，大大縮短患者住院時(shí)間。,真紅增多癥患者采集前手部照片,真紅增多癥患者紅細(xì)胞去除后手照片,上圖為一名真紅增多癥的患者，單采前后手部照片對(duì)比，手部顏色明顯變淺。該患者入院時(shí)紅細(xì)胞為199*109/L，紅細(xì)胞壓積為61.6%，經(jīng)過(guò)單采治療去除紅細(xì)胞664毫升，紅細(xì)胞降至160*109/L，壓積51.4%，單采后病人情況良好，第二天即辦理出院。,血漿置換能夠清除不易被血液透析和血液濾過(guò)所清除的藥物、毒物或其

26、他疾病因子，對(duì)同時(shí)伴有肝功能衰竭者可有效清除體內(nèi)有毒代謝物，把細(xì)胞成分和所需補(bǔ)充的血清蛋白、新鮮血漿及平衡液等輸回體內(nèi)，達(dá)到清除毒物的目的。該技術(shù)對(duì)于救治急性中毒，特別是農(nóng)藥中毒具有很大的臨床價(jià)值，對(duì)神經(jīng)系統(tǒng)疾病、腎臟疾病、免疫性疾病及其他一些急危重疾病的療效顯著，能迅速緩解癥狀，這是藥物在短時(shí)間內(nèi)很難達(dá)到的。特別是針對(duì)血栓性血小板減少性紫癜，血漿置換是治療該病的唯一方法。目前，科室開(kāi)展血漿置換24人次，其中包括血栓性血小板減少性紫癜、