白腐真菌產(chǎn)漆酶的條件優(yōu)化及其對(duì)多環(huán)芳烴的降解.pdf

1、多環(huán)芳烴(PAHs)是一類普遍存在于環(huán)境中的持久性有機(jī)污染物，具有致畸、致癌、致突變作用，易在環(huán)境中沉積和生物體內(nèi)積累，對(duì)人類的健康和生態(tài)系統(tǒng)造成極大的危害。
　　微生物對(duì)PAHs的降解具有無(wú)二次污染、成本低和大面積應(yīng)用的特點(diǎn)。白腐真菌憑借其強(qiáng)大的降解酶系，特別是木質(zhì)素降解酶系，對(duì)芳香族化合物和木質(zhì)素有獨(dú)特的降解作用。本文選用兩株不同白腐真菌對(duì)PAHs進(jìn)行降解，其中一株白腐真菌-偏腫擬栓菌（Pseudotrametes gibbo

2、sa）是從東北林區(qū)分離出來(lái)的，對(duì)此菌株產(chǎn)漆酶進(jìn)行條件優(yōu)化，使菌株分泌大量地漆酶。然后在相同的培養(yǎng)條件，偏腫擬栓菌和糙皮側(cè)耳菌（Pleurotusostreatus選用不同的液體培養(yǎng)基，對(duì)比PAHs的降解效果。
　　通過(guò)正交試驗(yàn)對(duì)偏腫擬栓菌產(chǎn)漆酶培養(yǎng)基進(jìn)行優(yōu)化，正交試驗(yàn)數(shù)據(jù)經(jīng)過(guò)直觀分析法和極差分析法進(jìn)行分析，得出分泌漆酶最優(yōu)培養(yǎng)基的配制方案為A4B2C2D2E4，即碳源選擇玉米粉，濃度為10g/L，氮源選擇氯化銨，氮源濃度為0.44

3、g/L，pH為7.0。各因素對(duì)偏腫擬栓菌分泌漆酶的影響順序?yàn)?RE＞RD＞RB＞RA＞RC，即說(shuō)明pH對(duì)白腐真菌產(chǎn)漆酶影響最大，接著是氮源濃度、氮源種類，最后是碳源種類和碳源濃度。然后根據(jù)正交試驗(yàn)所得的最優(yōu)培養(yǎng)基，對(duì)偏腫擬栓菌產(chǎn)漆酶的進(jìn)行培養(yǎng)環(huán)境實(shí)驗(yàn)，得出最佳產(chǎn)漆酶溫度和轉(zhuǎn)速分別為25℃和130r/min。在所建立的最優(yōu)培養(yǎng)基和培養(yǎng)環(huán)境下，偏腫擬栓菌產(chǎn)漆酶酶活最大，酶活為2841.3U/L，是傳統(tǒng)白腐菌研究中普遍采用的TK液體培養(yǎng)基產(chǎn)漆

4、酶酶活的5倍多，同時(shí)，還得出白腐真菌產(chǎn)酶活高峰期與生長(zhǎng)量的最高值不同步。
　　糙皮側(cè)耳菌對(duì)葸和芘的降解率分別為30.12％和18.76％，偏腫擬栓菌對(duì)蒽和芘的降解率為43.43％和24.26％，通過(guò)比較兩株白腐真菌降解效果，偏腫擬栓菌降解PAHs效果好于糙皮側(cè)耳菌降解PAHs的效果，培養(yǎng)基對(duì)兩菌株降解PAHs的效果影響較大，偏腫擬栓菌選用的優(yōu)化培養(yǎng)基漆酶酶活為2841.36U/L，糙皮側(cè)耳菌在馬鈴薯液體培養(yǎng)基分泌漆酶酶活為471.