雜色云芝對磺胺二甲基嘧啶降解的研究.pdf

1、抗生素近年來作為一種新型污染物日益受到關(guān)注，其在環(huán)境中的殘留會(huì)破壞生態(tài)系統(tǒng)平衡，誘發(fā)產(chǎn)生耐藥細(xì)菌，危害人類健康和公共衛(wèi)生的安全。而磺胺類抗生素是全國檢出頻率較高的一種抗菌藥物，目前對磺胺類抗生素的生物降解方面研究較少，而生物法具有無二次污染、綠色環(huán)保的優(yōu)點(diǎn)。
　　本文主要利用白腐真菌雜色云芝（Trametes versicolor）獨(dú)特的降解機(jī)制來對磺胺二甲基嘧啶（SM2）進(jìn)行生物降解研究。通過對培養(yǎng)條件的優(yōu)化，得出雜色云芝對SM

2、2生物降解的最佳條件?？疾炝似崦讣捌浣閷?dǎo)物、P450酶抑制劑、白腐真菌種間相互作用對抗生素降解的影響。分析了代謝中間產(chǎn)物以及對代謝物進(jìn)行毒性試驗(yàn)。試驗(yàn)獲得如下結(jié)果：
　?。?）在降解過程中，抗生素的降解率隨著漆酶活性的增大而增大，且木質(zhì)素過氧化物酶和錳過氧化物酶的酶活均很低，所以認(rèn)為漆酶在雜色云芝對SM2的降解中起著重要作用。雜色云芝的生長與漆酶的分泌不同步，漆酶在生長后期達(dá)到高峰。雜色云芝降解 SM2的最佳培養(yǎng)條件是：葡萄糖8

3、g/L，酒石酸銨0.4 g/L，初始pH4.5，培養(yǎng)溫度30℃，Cu2+的濃度為0.05 mmol/L。
　　（2）搖瓶振蕩培養(yǎng)12 d后，雜色云芝對SM2的降解率達(dá)到99.3％。加入漆酶介導(dǎo)物會(huì)提高對 SM2的降解能力，加入P450酶抑制劑會(huì)延遲雜色云芝對SM2的生物降解。選取培養(yǎng)第0 d、第4 d、第12 d的培養(yǎng)液樣品，通過HPLC-ESI+-MS/MS測定樣品所含的代謝產(chǎn)物，得到三種代謝產(chǎn)物。對3種培養(yǎng)液中所含的代謝產(chǎn)物進(jìn)

4、行毒性試驗(yàn)，結(jié)果發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)第12 d的樣品對被試微生物毒性很小，而培養(yǎng)第4d的樣品對被試微生物的毒性較大。
　　（3）雜色云芝和黃孢原毛平革菌在平板上共培養(yǎng)，兩菌種間的菌絲形態(tài)發(fā)生變化，且漆酶酶活增大。兩菌種液體共培養(yǎng)和單菌種雜色云芝得到的粗酶液中的漆酶酶活峰值分別為95 U/L、45 U/L。共培養(yǎng)菌種對SM2的降解能力提高，在共培養(yǎng)第4 d，單菌株雜色云芝和共培養(yǎng)后對抗生素的降解率分別為9.6%，25.4%。經(jīng)加熱處理的共培養(yǎng)液