體液細(xì)胞學(xué)及檢驗(yàn)規(guī)范化

1、體液細(xì)胞學(xué)及檢驗(yàn)規(guī)范化,,內(nèi) 容,尿液細(xì)胞學(xué)檢測(cè)腦脊液、漿膜腔積液細(xì)胞學(xué)檢測(cè)糞便、前列腺、精液細(xì)胞學(xué)檢測(cè),尿液細(xì)胞學(xué)檢測(cè) ---- 尿液沉渣檢查標(biāo)準(zhǔn)化,一、材料與器材 （一）留置標(biāo)本的容器 1.收集和運(yùn)送尿液容器 2.用于離心尿液的離心管 3.用于尿沉渣分析的玻片,一、材料與器材,（二）尿沉渣檢測(cè)尿沉渣的量（三）離心機(jī)：水平式離心機(jī) 相對(duì)離心力（RCF）應(yīng)在400

2、5;g左右。離心機(jī)轉(zhuǎn)速與RCF的換算公式為： r/min=1000×[G/(11.18×半徑]1/2,不同直徑 不同轉(zhuǎn)數(shù),離心半徑為20cm時(shí),1338r/min(1350r/min）離心半徑為16cm時(shí),1495r/min(1500r/min)離心半徑為10cm時(shí),1892r/min(1900r/min),一、材料與器材,（四）顯微鏡尿沉渣檢查（五）自動(dòng)化設(shè)備 （六）計(jì)算機(jī)數(shù)據(jù)處理系統(tǒng),二、標(biāo)

3、本的收集及運(yùn)送,（一）標(biāo)本的收集 （二）標(biāo)本的運(yùn)送 （三）標(biāo)本的標(biāo)記 （四）標(biāo)本的接收,三、尿沉渣檢驗(yàn)的操作步驟,（一）離心 （二）鏡檢沉渣 取1滴充液到專用尿沉渣檢測(cè)板里，計(jì)數(shù)1µl計(jì)算區(qū)內(nèi)的管型或細(xì)胞數(shù)報(bào)告。 尿結(jié)晶、細(xì)菌、寄生蟲等以每一高倍視野 -、±、+、++、+++報(bào)告。,顯微鏡觀察尿結(jié)晶、細(xì)菌、寄生蟲等報(bào)告方式,三、尿沉渣檢驗(yàn)的操作步驟,（三）尿沉渣的檢查內(nèi)容應(yīng)包括： 1.細(xì)胞：紅

4、細(xì)胞、白細(xì)胞、吞噬細(xì)胞、上皮細(xì)胞、腫瘤細(xì)胞 2.管型：透明管型、細(xì)胞管型、顆粒管型、蠟樣管型、細(xì)菌管型、脂肪管型、混合管型、寬形管型 3.結(jié)晶：磷酸鹽、草酸鈣、尿酸結(jié)晶和藥物結(jié)晶 4.細(xì)菌、寄生蟲（或卵）、酵母菌、精子、粘液。 5.臨床醫(yī)生特殊要求的其他成分。,三、尿沉渣檢驗(yàn)的操作步驟,（四）有條件的實(shí)驗(yàn)應(yīng)開展各種尿液有形成分的染色檢查，以便于有形成分的進(jìn)一步鑒別；具備多種類顯微鏡進(jìn)行尿沉渣分析的實(shí)驗(yàn)室，建議配置相差顯微鏡、暗視

5、野顯微鏡，提高尿沉渣的鑒別能力。,標(biāo)準(zhǔn)流程,新鮮尿液混勻，取10ml放在離心試管內(nèi)，以400g的速度離心5分離心后將上清棄去，沉渣量約0.2ml，輕搖使沉渣混合均勻。取一滴置于載物片上，用18×18mm蓋玻片覆蓋標(biāo)本。顯微鏡下觀察。先以10倍物鏡觀察全片，注意有無管型等較大成分存在，再換40倍物鏡觀察有形成分的種類和數(shù)量。觀察10個(gè)視野并記錄所見倒的細(xì)胞和管型數(shù)量，以最低值至最高值的方式報(bào)告。結(jié)晶等有價(jià)值的病理發(fā)現(xiàn)應(yīng)如實(shí)

6、報(bào)告。,腦脊液細(xì)胞學(xué)檢測(cè),標(biāo)本采集,一般由腰穿刺術(shù)取得CSF分別收集于3-4只無菌試管內(nèi)，每管1～2ml，第一管作細(xì)菌學(xué)檢查，第二管作化學(xué)或免疫學(xué)檢查，第三管作常規(guī)檢查.標(biāo)本采集后應(yīng)立即送檢。,顯微鏡檢查,細(xì)胞總數(shù)計(jì)數(shù)方法: 取混勻的CSF滴入計(jì)數(shù)池,沉淀片刻,低倍鏡計(jì)數(shù)10個(gè)大方格內(nèi)的紅、白細(xì)胞數(shù),總和× 106即得每升CSF的細(xì)胞總數(shù)。 如果細(xì)胞數(shù)較多,可計(jì)數(shù)1個(gè)大方格的細(xì)胞數(shù)乘以10,再乘106。,白細(xì)

7、胞計(jì)數(shù)及直接分類方法:,非血性CSF: 1. 取小試管1只，內(nèi)放冰醋酸1-2滴，轉(zhuǎn)動(dòng)后傾去，滴入混勻的CSF 3-4滴，3-5分鐘后混勻充入計(jì)數(shù)池，同上計(jì)數(shù)。,白細(xì)胞計(jì)數(shù)及直接分類方法:,2. 計(jì)數(shù)后直接換成高倍鏡根據(jù)細(xì)胞核的形態(tài)分別計(jì)數(shù)單個(gè)核細(xì)胞和多核細(xì)胞共100個(gè)，以百分率表示。細(xì)胞數(shù)少于100時(shí)直接寫出單核、多核細(xì)胞的具體個(gè)數(shù)。,白細(xì)胞計(jì)數(shù)及直接分類方法:,血性CSF：用1%冰醋酸稀釋CSF后進(jìn)行計(jì)數(shù)，結(jié)果乘以稀釋倍數(shù)

8、。細(xì)胞總數(shù)-白細(xì)胞數(shù)=紅細(xì)胞數(shù),注意事項(xiàng),（1）腦脊液細(xì)胞計(jì)數(shù)應(yīng)及時(shí)進(jìn)行，一般應(yīng)在1小時(shí)內(nèi)進(jìn)行。（2）細(xì)胞計(jì)數(shù)時(shí)，須注意把紅細(xì)胞或淋巴細(xì)胞與新型隱球菌相區(qū)別,臨床意義:,1.正常腦脊液中無紅細(xì)胞,白細(xì)胞:成人(0-8) × 106 /L, 兒童(0-15) × 106 /L新生兒(0-30) × 106 /L主要是淋巴及大單核細(xì)胞,兩者7:3,臨床意義,2.化腦白細(xì)胞數(shù)明顯增加,通常>10

9、00 × 106 /L,以多核為主;3.結(jié)腦白細(xì)胞數(shù)中度增加,一般<500 × 106 /L,以早期以多核為主,很快過渡到后期則以單個(gè)核細(xì)胞為主.,臨床意義:,4.病腦白細(xì)胞數(shù)僅輕度增加,以淋巴細(xì)胞為主.5.腦寄生蟲?。杭?xì)胞數(shù)可增加，以E為主。6.出血性疾?。憾酁榧t細(xì)胞7.腫瘤：細(xì)胞數(shù)正?；蜉p度增加，以L為主.,漿膜腔脊基液細(xì)胞學(xué)檢測(cè),漿膜腔積液分類和發(fā)生機(jī)理,漏出液（exudate）：為非炎癥性積液，

10、大分子物質(zhì)及有形成分少 滲出液（transudate）：為炎癥性積液血管通透性增加，大分子物質(zhì)及有形成分多,,滲出液與漏出液的鑒別診斷,漿膜腔穿刺液的采集和保存,標(biāo)本由臨床醫(yī)師采集送驗(yàn)標(biāo)本最好留取中段液體于消毒容器試管　常規(guī)及細(xì)胞學(xué)檢查約留取2毫升　生化檢驗(yàn)留2毫升　厭氧菌培養(yǎng)留1毫升　如查結(jié)核桿菌則約需10毫升。,漿膜腔穿刺液的采集和保存,為防止出現(xiàn)凝塊，細(xì)胞變性、細(xì)菌破壞自溶等，應(yīng)即時(shí)送檢及檢驗(yàn)。常規(guī)及細(xì)胞學(xué)

11、檢查可用EDTA·K2抗凝。生化檢查標(biāo)本可用肝素抗凝。加留1管不加任何抗凝劑用以觀察有無凝固現(xiàn)象。,漿膜腔積液細(xì)胞學(xué)檢查,----顯 微 鏡 檢 查,1. 細(xì)胞計(jì)數(shù)及分類：,細(xì)胞總數(shù)計(jì)數(shù)方法:低倍鏡計(jì)數(shù)10個(gè)大方格內(nèi)的紅、白細(xì)胞數(shù)總和× 106即得每升漿膜腔積液的細(xì)胞總數(shù)如果細(xì)胞數(shù)較多,可計(jì)數(shù)1個(gè)大方格的細(xì)胞數(shù)乘以10,再乘以106,,,,1. 細(xì)胞計(jì)數(shù)及分類：,白細(xì)胞計(jì)數(shù)漏出液500 ×

12、;106/L,1. 細(xì)胞計(jì)數(shù)及分類：,(1)直接分類法a.非血性胸腹水:高倍鏡根據(jù)細(xì)胞核的形態(tài)分別計(jì)數(shù)單個(gè)核細(xì)胞和多核細(xì)胞共100個(gè)，以百分率表示。細(xì)胞數(shù)少于100時(shí)，直接寫出單核、多核細(xì)胞的具體個(gè)數(shù)。,1. 細(xì)胞計(jì)數(shù)及分類：,b.血性胸腹水：用1%冰醋酸稀釋后進(jìn)行計(jì)數(shù)，結(jié)果乘以稀釋倍數(shù)細(xì)胞總數(shù)－白細(xì)胞數(shù)=紅細(xì)胞數(shù)胸腹水白細(xì)胞校正數(shù)＝胸腹水白細(xì)胞測(cè)定值－出血增　　　　　　　　　　　　加的白細(xì)胞數(shù)出血增加的白細(xì)胞數(shù)＝外

13、周血白細(xì)胞數(shù)*腦脊液紅細(xì)　　　　　　　　　　胞數(shù)／外周血紅細(xì)胞數(shù),1. 細(xì)胞計(jì)數(shù)及分類：,(2)染色分類法離心沉淀，瑞氏染色,油鏡分類漏出液：主要為淋巴和間皮細(xì)胞滲出液：各種細(xì)胞增多的臨床意義不同,2.細(xì)胞分類的臨床意義,正常漿膜腔積液無紅細(xì)胞白細(xì)胞:(0-8) × 106 /L,主要是淋巴細(xì)胞,2.細(xì)胞分類的臨床意義,(1)紅細(xì)胞： 多見于惡性腫瘤、結(jié)核或穿刺出血(2)中性分葉核粒細(xì)胞： 常見于化膿性滲

14、出液和早期漿膜結(jié)核(3)淋巴細(xì)胞： 主要提示慢性疾病，如結(jié)核、梅毒、腫瘤等,2.細(xì)胞分類的臨床意義,(4)嗜酸性粒細(xì)胞： 見于變態(tài)反應(yīng)、寄生蟲病、多次穿刺刺激等所致的滲出液。(5)間皮細(xì)胞：表示漿膜刺激或受損。,2.細(xì)胞分類的臨床意義,(6)狼瘡細(xì)胞：偶見于SLE患者的漿膜液。(7)癌細(xì)胞：大量形態(tài)不規(guī)則、胞體大小不等、核偏大并可見核仁及胞質(zhì)染色較深的細(xì)胞。,常規(guī)操作流程,,觀察外觀,混勻,計(jì)數(shù),細(xì)胞分類,,,,糞便檢查,

15、一、直接涂片法1.用生理鹽水將糞便涂成薄片2.制成涂片后，覆蓋片3.蟲卵報(bào)告方式未找到注明“未找到蟲卵”；找到幾種報(bào)告幾種4.紅細(xì)胞、白細(xì)胞報(bào)告方式：細(xì)胞數(shù)/HP,直接涂片鏡檢臨床意義,1．細(xì)胞(1)白細(xì)胞（膿細(xì)胞）: 正常糞便中不見或偶見。細(xì)菌性痢疾，可見大量白細(xì)胞,直接涂片鏡檢臨床意義,(2)紅細(xì)胞:細(xì)菌性痢疾時(shí)紅細(xì)胞少于白細(xì)胞，散在分 布，形態(tài)正常。阿米巴痢疾時(shí)紅細(xì)胞多

16、于白細(xì)胞，多成堆存 在并有殘碎現(xiàn)象。,直接涂片鏡檢臨床意義,(3)巨噬細(xì)胞: 為一種吞噬較大異物的單核細(xì)胞;胞體較中性粒細(xì)胞為大，圓形、卵圓形或不規(guī)則形，核形多不規(guī)則，含有吞噬顆粒及細(xì)胞碎屑。見于細(xì)菌性痢疾和直腸炎癥,直接涂片鏡檢臨床意義,(4)腸粘膜上皮細(xì)胞: 為柱狀上皮細(xì)胞，結(jié)腸炎癥、偽膜性腸炎時(shí)糞便中大量存在。(5)腫瘤細(xì)胞: 乙狀結(jié)腸癌、直腸癌時(shí)糞便可能發(fā)現(xiàn)成堆的癌細(xì)胞

17、。,直接涂片鏡檢臨床意義,2．食物殘?jiān)?正常糞便中偶見淀粉顆粒和脂肪小滴等未及充分消化的食物殘?jiān)?直接涂片鏡檢臨床意義,(1)淀粉顆粒: 腹瀉者、慢性胰腺炎糞便中可在糞便中大量出現(xiàn)。(2)脂肪小滴: 急、慢性胰腺炎及胰頭癌時(shí)，糞便中脂肪小滴增多,直接涂片鏡檢臨床意義,(3)肌肉纖維: 腸蠕動(dòng)亢進(jìn)、腹瀉時(shí)可見。(4)植物細(xì)胞及植物纖維:植物細(xì)胞形態(tài)多種，有圓形、長(zhǎng)圓形、雙層細(xì)胞壁,直接涂片鏡檢臨床意義,

18、3．寄生蟲和寄生蟲卵,前列腺液細(xì)胞學(xué)檢查,標(biāo)本采集與處理 前列腺標(biāo)本一般由臨床醫(yī)生行前列腺按摩術(shù)后獲得，可直接涂于玻片上或收集在潔凈的試管中，并立即送檢。,前列腺液細(xì)胞學(xué)檢查,檢查方法： 1. 濕片法檢查，特殊情況可用涂片染色檢查。濕片法操作簡(jiǎn)便、快速，臨床常用。 2. 涂片染色檢查可清晰辨認(rèn)細(xì)胞結(jié)構(gòu)，適合于檢查炎癥細(xì)胞和癌細(xì)胞，有助于前列腺炎和惡性腫瘤的診斷及鑒別診斷。,前列腺液細(xì)胞學(xué)檢查,檢查內(nèi)容及報(bào)

19、告方式1.卵磷脂小體（lecithin bodies) 高倍視野中卵磷脂小體數(shù)量（百分?jǐn)?shù)）2.RBC 正常偶見RBC（＜5/HP)。增多見于前列腺炎、結(jié)核、結(jié)石或腫瘤、按摩用力過重。3.白細(xì)胞 正常前列腺液白細(xì)胞＜10/HP，前列腺炎時(shí)白細(xì)胞增多并成堆分布。,前列腺液細(xì)胞學(xué)檢查,精液顯微鏡檢查,１精子活力分析１）精子活動(dòng)率檢查　精子活動(dòng)率（％）＝活動(dòng)精子數(shù)／（活動(dòng)精子數(shù)＋不活動(dòng)精子數(shù)）*１００正常:精子活動(dòng)率≥5

20、0%,２）精子活動(dòng)力檢查,A級(jí)　活動(dòng)良好，精子呈直線運(yùn)動(dòng)D級(jí)B級(jí)　活動(dòng)較好，精子活動(dòng)，但方向不定．C級(jí)　活動(dòng)不良，活動(dòng)遲鈍，原地轉(zhuǎn)動(dòng)D級(jí) 不活動(dòng)，死精子．正常:A級(jí)活動(dòng)精子≥25％ A級(jí)和B級(jí)的精子≥5０％,２．精子密度與精子總數(shù)檢查,精子數(shù)／Ｌ＝５個(gè)中方格的精子數(shù)＊稀釋倍數(shù)＊ ５＊１０＊１０６精子總數(shù)： 精子數(shù)／Ｌ＊精液量（Ｌ）正常精子數(shù): 大于２０＊１０９／Ｌ

21、,３.精子形態(tài)學(xué)檢查,３.精子形態(tài)學(xué)檢查,正常精子形態(tài)≥3０％,4.精液檢查報(bào)告內(nèi)容及方式,射精量：XX ml 222PH：精子計(jì)數(shù)： XX１０６／Ｌ202020精子形態(tài)：%正常 303015精子存活率：% 757550精子活力 A級(jí)% 252525 A級(jí)%+ B