藥學(xué)研究生開(kāi)題報(bào)告

1、龍須藤的有效部位治療關(guān)節(jié)炎的抗炎藥效機(jī)理及質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)研究,指導(dǎo)老師：XXX教授教授,匯報(bào)人: XXX,,,,國(guó)內(nèi)外研究概況,,研究的主要內(nèi)容,,,主要內(nèi)容,選題的依據(jù),,已開(kāi)展的工作,,選題的目的和意義,,研究方法及技術(shù)路線,,研究的創(chuàng)新點(diǎn),,實(shí)驗(yàn)進(jìn)展,1 選題的目的和意義,,骨關(guān)節(jié)炎（OA）也稱(chēng)退行性骨關(guān)節(jié)病，本病是由于關(guān)節(jié)軟骨完整性破壞以及關(guān)節(jié)軟骨下骨板病變，導(dǎo)致關(guān)節(jié)癥狀和體征的一組異質(zhì)性疾病。按照關(guān)節(jié)分布可以分為局限性關(guān)

2、節(jié)炎和全身性骨關(guān)節(jié)炎。膝骨關(guān)節(jié)炎是局限性骨關(guān)節(jié)炎的常見(jiàn)病，臨床上以關(guān)節(jié)疼痛、僵硬、活動(dòng)受限、活動(dòng)時(shí)有磨擦響聲為特征。本病中年以后多發(fā)，發(fā)病率隨年齡增長(zhǎng)而增高，嚴(yán)重危害著中老年人的健康。 膝骨關(guān)節(jié)炎的病因目前尚不完全明了，一般認(rèn)為膝骨關(guān)節(jié)炎發(fā)病的主要原因有生物力學(xué)因素、遺傳因素、外源性因素等參與導(dǎo)致滑膜、軟骨和骨的代謝改變，進(jìn)而產(chǎn)生炎癥、關(guān)節(jié)結(jié)構(gòu)破壞，其最基本的病理改變是關(guān)節(jié)軟骨的損傷退變。,目的和意義,1 選題的目的和意義,現(xiàn)代

3、藥理研究表明，龍須藤的提取物具有良好的抗炎作用。龍須藤提取物能明顯抑制膠原誘導(dǎo)性關(guān)節(jié)炎大鼠足腫脹，改善關(guān)節(jié)滑膜組織炎性浸潤(rùn)及增生等炎癥反應(yīng)，降低TNF-α、IL-6、IL-8等炎癥介質(zhì)的含量。從龍須藤乙醇提取物中得到的乙酸乙酯萃取部分能顯著提高昆明小鼠的痛閾值、明顯抑制二甲苯所致的急性炎癥反應(yīng)。 龍須藤的抗炎療效確切，有利于開(kāi)發(fā)成治療膝骨關(guān)節(jié)炎的抗炎藥物。此外，作用治療膝骨關(guān)節(jié)炎的抗炎中藥受用人群廣泛，患者順應(yīng)性好，將龍須藤藥材

4、開(kāi)發(fā)成治療膝骨關(guān)節(jié)炎的抗炎中藥具有一定的經(jīng)濟(jì)及社會(huì)效益。,目的和意義,2 國(guó)內(nèi)外研究概況,國(guó)外學(xué)者對(duì)龍須藤的研究主要是化學(xué)成分的分析，而國(guó)內(nèi)也有不少學(xué)者對(duì)龍須藤的化學(xué)成分進(jìn)行研究，目前為止，已經(jīng)從龍須藤中分離鑒別出數(shù)十種化學(xué)成分，主要為黃酮、鞣質(zhì)、氰苷以及揮發(fā)油等。 Chien CC等從我國(guó)臺(tái)灣產(chǎn)的龍須藤根莖中分離出6種多甲基黃酮類(lèi)化合物，并且從龍須藤中分離出沒(méi)食子酸，表兒茶素沒(méi)食子酸酯。白海云等從龍須藤藤莖的乙酸乙酯

5、部位中分離鑒定出2種黃酮苷類(lèi)化合物，分別是槲皮苷、楊梅苷；從龍須藤中分離得到2個(gè)甾醇類(lèi)化合物，分別為β-谷甾醇、胡蘿卜苷。葉蕻芝等通過(guò)龍須藤揮發(fā)油經(jīng)氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)分離鑒定，分離出78個(gè)峰，鑒定出其中的24種化合物。,,,,2 國(guó)內(nèi)外研究概況,易荊麗等通過(guò)藥效學(xué)實(shí)驗(yàn)跟蹤方法研究龍須藤藥材的鎮(zhèn)痛抗炎活性成分，表明了龍須藤的乙醇提取物具有較好的鎮(zhèn)痛抗炎作用，其乙酸乙酯萃取部分是其有效活性部位之一；從廣東產(chǎn)的龍須藤中分離出數(shù)種化合物，

6、通過(guò)藥理實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證了5,7,3’,4’,5’-五甲氧基黃酮具有較強(qiáng)的鎮(zhèn)痛抗炎活性。 張玉琴等通過(guò)膠原誘導(dǎo)性關(guān)節(jié)炎大鼠模型證明龍須藤具有抗類(lèi)風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎的作用，其中正丁醇部位和乙酸乙酯部位為佳，可以降低膠原誘導(dǎo)性關(guān)節(jié)炎大鼠關(guān)節(jié)腫脹度、改善膠原誘導(dǎo)性關(guān)節(jié)炎大鼠外在體征，并且可以降低膠原誘導(dǎo)性關(guān)節(jié)炎大鼠血清和滑膜組織中TNF-α、IL-6、IL-8的含量、抑制滑膜組織增生、改善關(guān)節(jié)滑膜炎癥。,,,,3 選題依據(jù),理論依據(jù)

7、 目前臨床上用于治療膝骨關(guān)節(jié)炎的化學(xué)藥物主要有非甾體抗炎藥、甾體類(lèi)抗炎藥。非甾體抗炎藥治標(biāo)不治本，甾體類(lèi)抗炎藥療效確切，但伴隨較多的不良反應(yīng)。 龍須藤的抗炎療效確切，有望開(kāi)發(fā)成治療膝骨關(guān)節(jié)炎的抗炎藥物。此外，作用治療膝骨關(guān)節(jié)炎的抗炎中藥受用人群廣泛，患者順應(yīng)性好。 本課題組長(zhǎng)期從事龍須藤的抗炎療效的科研工作，有較深厚的學(xué)科基礎(chǔ)。,,,,3 選題依據(jù),前期工作研究依據(jù) 已經(jīng)

8、成功運(yùn)用SD大鼠造膝骨關(guān)節(jié)炎模型。明確該模型的致炎物質(zhì)的用量、濃度，以及造模過(guò)程的操作細(xì)節(jié)與注意事項(xiàng)。 龍須藤的抗炎療效確切，龍須藤的不同濃度乙醇提取物對(duì)治療膝骨關(guān)節(jié)炎具有不同程度的療效，且70%濃度乙醇提取物效果最佳。 本課題組長(zhǎng)期從事龍須藤的抗炎療效的科研工作，有較深厚的學(xué)科基礎(chǔ)。,,,,4 研究的創(chuàng)新點(diǎn),運(yùn)用大鼠膝骨關(guān)節(jié)炎模型驗(yàn)證龍須藤乙醇提取物、抗炎有效部位治療膝骨關(guān)節(jié)炎的藥效

9、基礎(chǔ)。,對(duì)從乙酸乙酯萃取部位分離得到的有效抗炎成分進(jìn)行藥理藥效研究，更加符合中醫(yī)藥傳統(tǒng)理論的整體觀念。,根據(jù)龍須藤抗炎有效部位的體內(nèi)吸收代謝過(guò)程，為其選擇合適的藥物劑型。,5 研究?jī)?nèi)容,,1．SD大鼠膝骨關(guān)節(jié)炎造?？尚行苑治?。2. 龍須藤乙醇提取物治療膝骨關(guān)節(jié)炎的藥效基礎(chǔ)研究。3. 龍須藤治療膝骨關(guān)節(jié)炎的抗炎有效部位的篩選、分離以及藥效機(jī)理研究。4. 對(duì)從龍須藤乙酸乙酯萃取部位分離得到的有效抗炎成分進(jìn)行藥動(dòng)學(xué)研究。5. 根據(jù)龍須

10、藤抗炎有效部位的藥動(dòng)學(xué)參數(shù)為龍須藤抗炎有效部位選擇合適的藥物劑型，并對(duì)所選的藥物劑型進(jìn)行制備工藝優(yōu)化。,內(nèi)容,6 研究方法及技術(shù)路線,1.1,.1,31,41,5,采用溶劑系統(tǒng)二氯甲烷/乙酸乙酯、二氯甲烷/甲醇不同梯度洗脫，TLC跟蹤分析，分離龍須藤抗炎有效部位。,考察使用碘乙酸鈉對(duì)SD大鼠進(jìn)行膝關(guān)節(jié)注射造膝骨關(guān)節(jié)炎模型的可行性與造模周期，明確操作細(xì)節(jié)。,考察龍須藤乙醇提取物治療膝骨關(guān)節(jié)炎的藥效基礎(chǔ)，采用SPSS軟件進(jìn)行系統(tǒng)的分析比較

11、，選擇合適的提取濃度。,考察龍須藤抗炎有效部位治療膝骨關(guān)節(jié)炎的藥效機(jī)理，采用SPSS軟件進(jìn)行系統(tǒng)的分析比較。,采用HPLC法測(cè)定龍須藤抗炎有效部位用藥后的血藥濃度，研究其藥代動(dòng)力學(xué)特征及口服生物利用度，為其選擇合適藥物劑型，運(yùn)用正交設(shè)計(jì)對(duì)所選劑型進(jìn)行制備工藝優(yōu)化。,本試驗(yàn)技術(shù)路線,,,大量查閱相關(guān)文獻(xiàn),,本試驗(yàn)技術(shù)路線,,大量查閱相關(guān)文獻(xiàn),,預(yù)試驗(yàn)造膝骨關(guān)節(jié)炎模,,,本試驗(yàn)技術(shù)路線,,大量查閱相關(guān)文獻(xiàn),,預(yù)試驗(yàn)造膝骨關(guān)節(jié)炎模,,,,對(duì)模

12、型大鼠灌胃龍須藤乙醇提取物，考察龍須藤乙醇提取物的抗炎藥效基礎(chǔ),,本試驗(yàn)技術(shù)路線,,大量查閱相關(guān)文獻(xiàn),,預(yù)試驗(yàn)造膝骨關(guān)節(jié)炎模,,,,對(duì)模型大鼠灌胃龍須藤不同濃度乙醇提取物，考察龍須藤乙醇提取物的抗炎藥效基礎(chǔ),,,,對(duì)模型大鼠灌胃龍須藤抗炎有效部位，考察抗炎有效部位抗炎藥效機(jī)理,本試驗(yàn)技術(shù)路線,,,大量查閱相關(guān)文獻(xiàn),,預(yù)試驗(yàn)造膝骨關(guān)節(jié)炎模,,,,對(duì)模型大鼠灌胃龍須藤乙醇提取物，考察龍須藤乙醇提取物的抗炎藥效基礎(chǔ),,,,對(duì)模型大鼠灌胃龍須藤

13、抗炎有效部位，考察抗炎有效部位抗炎藥效機(jī)理,,通過(guò)藥動(dòng)學(xué)實(shí)驗(yàn)明確龍須藤抗炎有效部位的體內(nèi)吸收代謝過(guò)程,,本試驗(yàn)技術(shù)路線,,,大量查閱相關(guān)文獻(xiàn),,預(yù)試驗(yàn)造膝骨關(guān)節(jié)炎模,,,,對(duì)模型大鼠灌胃龍須藤乙醇提取物，考察龍須藤乙醇提取物的抗炎藥效基礎(chǔ),,,,對(duì)模型大鼠灌胃龍須藤抗炎有效部位，考察抗炎有效部位抗炎藥效機(jī)理,,通過(guò)藥動(dòng)學(xué)實(shí)驗(yàn)明確龍須藤抗炎有效部位的體內(nèi)吸收代謝過(guò)程,,,,選擇合適的藥物劑型,本試驗(yàn)技術(shù)路線,,,大量查閱相關(guān)文獻(xiàn),,預(yù)試驗(yàn)

14、造膝骨關(guān)節(jié)炎模,,,,對(duì)模型大鼠灌胃龍須藤乙醇提取物，考察龍須藤乙醇提取物的抗炎藥效基礎(chǔ),,,,對(duì)模型大鼠灌胃龍須藤抗炎有效部位，考察抗炎有效部位抗炎藥效機(jī)理,,,通過(guò)藥動(dòng)學(xué)實(shí)驗(yàn)明確龍須藤抗炎有效部位的體內(nèi)吸收代謝過(guò)程,,,,藥物劑型的制備工藝優(yōu)化,選擇合適的藥物劑型,7 實(shí)驗(yàn)進(jìn)展,2013.7-2013.8：SD大鼠膝骨關(guān)節(jié)炎模型可行性研究2013.9-2013.10：龍須藤不同濃度乙醇提取物治療膝骨關(guān)節(jié)炎的藥效基礎(chǔ)研究201

15、3.11：龍須藤乙酸乙酯萃取部位的抗炎有效部位的分離2013.12-2014.1：龍須藤抗炎有效部位的藥效機(jī)理研究2014.2：數(shù)據(jù)整理分析2014.3-2014.5：龍須藤抗炎有效部位的藥動(dòng)學(xué)研究2014.6-2014.8：龍須藤抗炎有效部位的制備工藝優(yōu)化研究,8 已開(kāi)展的工作,,,明確了使用碘乙酸鈉對(duì)SD大鼠進(jìn)行膝關(guān)節(jié)注射造膝骨關(guān)節(jié)炎模型的可行性。使用該模型驗(yàn)證龍須藤不同濃度乙醇提取物的抗炎藥效基礎(chǔ),其中70%乙醇提

16、取物治療效果最佳。,通過(guò)經(jīng)典的溶劑分離系統(tǒng)法從龍須藤70%乙醇提取物的乙酸乙酯萃取部位分離出抗炎有效部位，預(yù)實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證了該部位具有抗炎藥效，治療膝骨關(guān)節(jié)炎的效果優(yōu)異。,8 已開(kāi)展的工作,造模前和造模后的對(duì)比,,,8 已開(kāi)展的工作,←未造模,造模后給藥治療→,8 已完成的研究成果,,9 研究工作中面臨的技術(shù)難點(diǎn)和擬采取的解決辦法,,1. 運(yùn)用大鼠膝骨關(guān)節(jié)炎模型對(duì)龍須藤乙醇提取物、抗炎有效部位進(jìn)行藥理藥效研究，確定該藥理模型的可行性與操作細(xì)節(jié)