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1、苯酚及其衍生化合物是一類重要的環(huán)境污染物,具有很大的毒性和致癌、致突變作用。隨著經(jīng)濟(jì)的發(fā)展,未經(jīng)處理的含酚廢水對(duì)人類的生存環(huán)境已經(jīng)造成了嚴(yán)重的威脅。微生物法處理含酚廢水與物理法和化學(xué)法相比,具有效率高、成本低并且無(wú)二次污染等優(yōu)點(diǎn),微生物降解在廢水處理中起著主要作用。因此,開(kāi)展酚降解菌的研究對(duì)于認(rèn)識(shí)和利用微生物在含酚廢水處理過(guò)程中的作用具有重要意義。
本研究利用LB、216L和以苯酚或間甲酚為唯一碳源的無(wú)機(jī)鹽固體培養(yǎng)基,從首
2、鋼焦化廢水污泥樣品中分離得到26株可能的降解菌。同時(shí),以間甲酚為唯一碳源,通過(guò)富集馴化方法篩選得到能高效降解間甲酚、苯酚的菌株AEJ1和ANJ3。菌株AEJ1在48 h內(nèi)對(duì)間甲酚(790.77 mg/L)的降解率達(dá)到94.6%,而菌株ANJ3對(duì)762.75mg/L間甲酚的降解率也達(dá)到了92.2%。通過(guò)16S rRNA基因序列分析,從2個(gè)供試污泥樣品中共獲得了28株不同單菌,分屬于20個(gè)屬的28個(gè)種,主要為變形菌綱β和γ亞群,其中4株菌可
3、能屬于新種。本研究對(duì)其中2株潛在新種AN3和AE31進(jìn)行了系統(tǒng)的分類鑒定,結(jié)果顯示菌株AN3是Ottowia屬的一個(gè)新種,并命名為Ottowiabeijingensis AN3T。菌株AE31為Pedobacter屬的一個(gè)新種,并命名為Pedobacterbeijingensis AE31T。
對(duì)部分菌株通過(guò)PCR擴(kuò)增、分析其基因組DNA苯酚羥化酶基因,結(jié)果只從菌株AE14、AN3、AEJ1和ANJ3得到了苯酚羥化酶基因序
4、列。菌株AE14與Pseudomonasmendocina PC3苯酚羥化酶基因的序列相似性達(dá)到99%;菌株AN3與Diaphorobactersp.J5-51的苯酚羥化酶基因序列相似度為100%;菌株AEJ1和ANJ3與Pseudomonasputida KL33苯酚羥化酶基因的序列相似性均為99%。
本研究對(duì)苯酚、間甲酚降解菌AN3T進(jìn)行了基因組草圖的測(cè)序,并分析了其中與苯酚、間甲酚降解相關(guān)的功能基因。菌株AN3T基因
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