禽肺小葉電鏡及細(xì)胞化學(xué)的研究.pdf

1、摘要用掃描電鏡、透射電鏡和細(xì)胞化學(xué)技術(shù)對雞和鶴鶉(eotanatlxuta“ttz)肺小葉的超微結(jié)構(gòu)，肺表面活性物質(zhì)的定位和功能，板層小體的產(chǎn)生和形成過程比較詳細(xì)的研究現(xiàn)三級支氣管和肺房的上皮與以往資料記載不同，而是單層立方上皮一種是矮立方細(xì)胞.三級支氣管和肺房上皮有兩種細(xì)胞:不是單層扁平上皮，一種是立方細(xì)胞，另。漏斗的上皮細(xì)胞為矮立方狀，逐漸過渡為扁平狀這些細(xì)胞的游離面都有短小的微絨毛，胞質(zhì)中有許多板層小體。呼吸毛細(xì)管內(nèi)襯單層扁平上皮

2、，未發(fā)現(xiàn)有板層結(jié)構(gòu)。經(jīng)電鏡磷脂定位，進(jìn)一步證明禽肺與哺乳動物肺一樣，確實存在表面Yk性物質(zhì)，其主要化學(xué)成分是磷脂，板層小體是表面活性物質(zhì)的貯存庫。表面活性物質(zhì)主要涂布在三級支氣管、肺房和漏斗的表面，而相當(dāng)于哺乳動物肺泡的呼吸毛細(xì)管表面極少，由此認(rèn)為禽肺表面活性物質(zhì)的主要作用與哺乳動物不同，可能不是防止塌陷。經(jīng)電鏡結(jié)合人cP酶定位，證明板層小體是溶酶體系列物，來源于粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基復(fù)合體，其發(fā)生過程大致經(jīng)歷前板層體、小板層體和成熟板層體

3、段，其間無明顯界限，肺毛細(xì)血管十分豐富，緊密環(huán)繞在呼吸毛細(xì)管周個、刀三圍關(guān)鍵詞:磷服酸性磷酸酶超微結(jié)構(gòu)細(xì)胞化學(xué)肺小葉雞鶴鶉二材料與方法健康的成年三黃雞8只，鶴鶉6只，公母各半.斷頭后立即打開腹腔和胸腔，除去內(nèi)臟暴露出肺，迅速取材，然后按以下不同的實驗?zāi)康姆謩e處理。2.1透射電鏡樣品「nel將新鮮肺(包括雞和鶴鶉，下同)切成lmm，的小塊，用2.5%戊二醛(0.1M磷酸緩沖液配制，pH7.4)4℃預(yù)固定2小時以上，漂洗30分鐘。1%俄酸(

4、pH7.4)4℃固定1小時，相同緩沖液漂洗數(shù)次，丙酮梯度脫水，Epon812包埋.超薄切片厚60一70nm酷酸鈾一一檸檬酸鉛雙染，7EM1200EX透射電鏡觀察并攝片.2.2電鏡細(xì)胞化學(xué)樣品2.2.1酸性磷酸酶(AcP酶)細(xì)胞化學(xué)反應(yīng)‘iszzl將新鮮肺切成數(shù)平方毫米大小，厚lcm左右的小塊，在2.5戊二醛〔含8%蔗糖，0.1M二甲腫酸鈉緩沖液配制，pH7.4)中固定，4C60分鐘，相同緩沖液(含8%蔗搪)4C漂洗1小時，用冷凍切片機切