山羊腦包蟲病研究.pdf

1、腦多頭蚴?。ㄋ追Q腦包蟲?。┦怯蓭Э?、多頭屬（Multiceps）的多頭帶絳蟲(M Multiceps)的中絳期幼蟲(腦多頭蚴Coenurus cerebralis)寄生于牛、羊等有蹄類草食動(dòng)物所引起的一種寄生蟲病，是危害養(yǎng)牛、羊業(yè)健康發(fā)展的主要寄生蟲病之一。目前，該病只能采用藥物和手術(shù)治療，但藥物的長(zhǎng)期使用易導(dǎo)致抗藥蟲株的出現(xiàn)，尤其是存在藥物在畜產(chǎn)品中的殘留以及對(duì)環(huán)境的污染等問題，因此，迫切需要尋找新的防治方法。為此，本研究開展了山羊腦

2、包蟲病的手術(shù)穿刺治療，多頭帶絳蟲四川蟲株的生物學(xué)特性觀察，多頭帶絳蟲Tm16抗原基因的克隆與原核表達(dá)，同時(shí)分析了該基因的免疫原性，主要研究工作和結(jié)果如下：
　　 1、了解多頭帶絳蟲的生活史及其成蟲孕卵節(jié)片內(nèi)蟲卵的數(shù)量和蟲卵的大小，同時(shí)觀察次氯酸鈉作用下蟲卵的孵化過程，為今后該病的相關(guān)研究奠定基礎(chǔ)。人工感染2只實(shí)驗(yàn)犬，自糞便中出現(xiàn)節(jié)片的第一天起，開始記錄每天排出的節(jié)片數(shù)量，直至節(jié)片排出數(shù)量減少為零。其間，對(duì)實(shí)驗(yàn)犬隨機(jī)排出的50個(gè)孕

3、卵節(jié)片，以1.0％胃蛋白酶消化收集蟲卵，進(jìn)行蟲卵計(jì)數(shù)和形態(tài)大小的觀察。并用1.0％次氯酸鈉溶液孵化蟲卵，在顯微鏡下觀察蟲卵的孵化過程，拍照記錄。兩只實(shí)驗(yàn)犬分別在感染后的第45d、第50d開始排出節(jié)片且實(shí)驗(yàn)犬體內(nèi)孕卵節(jié)片排出的持續(xù)時(shí)間分別為142d和54d，實(shí)驗(yàn)犬每日排節(jié)片數(shù)最高可達(dá)64片。孕卵節(jié)片內(nèi)蟲卵數(shù)最少約為780枚，最多約為16035枚，平均為：5278.800±3696.769枚，蟲卵數(shù)量主要集中在2000～6000范圍內(nèi)，共占

4、總節(jié)片數(shù)的52％。蟲卵大小為（33.74士2.71）μm×(32.33士2.09)pm。
　　 2、利用RTR-PCR技術(shù)從激活的多頭帶絳蟲六鉤蚴中獲得多頭帶絳蟲的Tm16cDNA，將其重組于原核表達(dá)載體pET32a中，構(gòu)建pET32a-Tm16表達(dá)載體，轉(zhuǎn)化至大腸桿菌BL21中，經(jīng)IPTG誘導(dǎo)表達(dá)了融合蛋白。獲得了Tm16cDNA，其序列長(zhǎng)度為569bp，包括399bp的開放性閱讀框。SDS-PAGE分析顯示：重組表達(dá)質(zhì)粒產(chǎn)生