黃連、大黃、牡丹皮三種植物對(duì)松材線蟲(chóng)的毒殺活性及作用機(jī)理研究.pdf

1、松材線蟲(chóng)病又稱松樹(shù)萎蔫病，是由松材線蟲(chóng)（Bursaphelenchus xylophilus）寄生在松屬樹(shù)種（Pinus spp.）體內(nèi)取食營(yíng)養(yǎng)而導(dǎo)致樹(shù)木死亡的一種毀滅性病害，被喻為松樹(shù)的癌癥。該病自發(fā)現(xiàn)以來(lái)，已經(jīng)蔓延到世界許多國(guó)家和地區(qū)，對(duì)各國(guó)的林業(yè)資源和生態(tài)環(huán)境造成了嚴(yán)重破壞。目前，對(duì)于該病的防治主要是采用化學(xué)殺線蟲(chóng)劑，但該方法存在周期長(zhǎng)、成本高、污染大、易產(chǎn)生抗藥性等缺點(diǎn)。因此，從植物中尋找高效、低毒、環(huán)保的生物合理型殺線蟲(chóng)劑成為

2、了近年來(lái)研究的熱點(diǎn)。
　　本文選取了36種中草藥，就其乙醇提取物對(duì)松材線蟲(chóng)及其卵的毒殺活性進(jìn)行測(cè)定。結(jié)果表明，牡丹皮、黃連和大黃3種中藥乙醇提取物的殺線蟲(chóng)活性較強(qiáng)，以提取物濃度為10g/L分別處理松材線蟲(chóng)成蟲(chóng)和卵72h后，松材線蟲(chóng)的校正死亡率均為100％，線蟲(chóng)卵的孵化率均低于20％，蟲(chóng)卵的校正死亡率均高于60％。在3種中藥提取物處理松材線蟲(chóng)72h后半致死濃度(LC50)分別為1.81、0.2638和1.07g/L。利用乙酸乙酯和水

3、作溶劑對(duì)3種中草藥進(jìn)行殺線蟲(chóng)活性成分初步分離，結(jié)果表明，牡丹皮的殺線蟲(chóng)活性物質(zhì)存在于乙酸乙酯萃取物中，黃連和大黃的殺線蟲(chóng)活性物質(zhì)存在于水層中。三種活性成分處理松材線蟲(chóng)72h后的半致死濃度(LC50)分別為0.712，2.370和0.067g/L，這表明三種萃取物均具有較高的殺線蟲(chóng)活性。
　　利用黃連、大黃、牡丹皮三種中藥乙醇提取物進(jìn)行了防治松材線蟲(chóng)的溫室水培試驗(yàn)，結(jié)果表明，3種中藥的乙醇提取物對(duì)松材線蟲(chóng)病具有很好的防治效果。250

4、μg/ml中藥提取液處理后40天內(nèi)松枝不發(fā)病;而“清水+線蟲(chóng)”處理后10天內(nèi)不發(fā)病，10天后開(kāi)始表現(xiàn)病情，病情指數(shù)迅速上升，40天內(nèi)松枝枯萎、死亡。
　　本研究還對(duì)三種中草藥黃連、牡丹皮、大黃乙醇提取物毒殺松材線蟲(chóng)作用機(jī)制進(jìn)行初步研究。采用菌絲生長(zhǎng)抑制法測(cè)定其抑真菌活性;測(cè)定其對(duì)線蟲(chóng)體內(nèi)總糖和蛋白含量的影響;測(cè)定線蟲(chóng)體內(nèi)SOD、CAT、POD、GSH-Px和AChE酶活性變化和MDA含量變化;測(cè)定處理前后SOD、CAT、GSH-P