鴨Cav-1，3基因的克隆、組織表達(dá)和單核苷酸多態(tài)性研究.pdf

1、Cav-1，3基因同屬于Caveolin基因家族，Cav-1蛋白有結(jié)合脂肪酸，影響脂肪沉積的功能，Cav-3蛋白對肌肉發(fā)生及其功能的維持起著重要作用。本研究通過RACE、實(shí)時(shí)熒光定量PCR和PCR-SSCP方法研究了肉鴨Cav-1，3基因的結(jié)構(gòu)特征、表達(dá)特征及其品種間多態(tài)性。主要研究結(jié)果如下：
　　 (1)首次克隆了鴨Cav-1，3基因的全長cDNA序列(Accession No：HM054162，HM054163)。鴨Cav-

2、1基因全長cDNA2603 bp，該序列包含537個(gè)核苷酸的開放性閱讀框，編碼178個(gè)氨基酸。鴨Cav-3基因全長cDNA1066 bp，此序列包含456個(gè)核苷酸的開放性閱讀框，編碼151個(gè)氨基酸。將獲得的2個(gè)基因與其他家禽以及哺乳動物的序列進(jìn)行比對，發(fā)現(xiàn)鴨Cav-1，3基因與雞的同源性最高，分別為95.16％、91.67％，與哺乳動物的同源性分別為83.0％、78.0％左右，基因的進(jìn)化關(guān)系與動物形態(tài)分類學(xué)結(jié)果一致，揭示了這些基因在進(jìn)化

3、中的保守性及其對生理功能的重要性。
　　 (2)實(shí)時(shí)熒光定量 PCR證實(shí)鴨Cav-1，基因在所檢測的12個(gè)組織中均有表達(dá)。其中在心肌中的表達(dá)量最高；胸肌、肺、腿肌和脂肪中度表達(dá)；肌胃、腦、腸和腺胃小量表達(dá)；肝臟、腎和脾微量表達(dá)。鴨Cav-3基因在心肌中表達(dá)量最高；胸肌、腿肌、腎臟中度表達(dá)：其他組織痕量表達(dá)。這些結(jié)果說明Car-1，3基因在動物各組織中起到了重要作用。
　　 (3)以金定鴨、巢湖鴨、櫻桃谷鴨和高郵鴨四個(gè)品種

4、為實(shí)驗(yàn)材料，利用PCR-SSCP方法對Cav-1，3基因進(jìn)行單核苷酸多態(tài)性研究。在鴨Cav-1基因序列中沒有檢測到突變。在Cav-3基因第2外顯子上檢測到.A489G、G501A、A557G、T563A、A602G共5個(gè)單堿基突變，其中前2個(gè)突變在編碼區(qū)，為同義突變，其余3個(gè)突變位于3′-UTR區(qū)。這使所檢測的4個(gè)品種共呈現(xiàn)6種基因型。在Cav-3基因內(nèi)含子上檢測到C805T1個(gè)堿基突變，這使所檢測的4個(gè)品種共呈現(xiàn)3種基因型。群體遺傳學(xué)