抗氧化蛋白SsPrxQ在向日葵中的表達(dá)研究.pdf

1、逆境中鹽堿脅迫是影響農(nóng)作物生長(zhǎng)、發(fā)育和產(chǎn)量的主要因素之一，近幾年，隨著分子生物學(xué)的迅速發(fā)展，轉(zhuǎn)基因技術(shù)已逐漸成為耐鹽堿領(lǐng)域研究的焦點(diǎn)。本研究通過(guò)農(nóng)桿菌介導(dǎo)法將抗氧化蛋白基因(SsPrxQ)轉(zhuǎn)入油葵中，以獲得高耐鹽堿的抗性植株。其中，目的基因SsPrxQ來(lái)源于耐鹽堿植物堿蓬，并將其連入高效植物表達(dá)載體pBI121中，構(gòu)建了植物表達(dá)載體pBI121-SsPrxQ，通過(guò)電擊法將重組載體質(zhì)粒導(dǎo)入農(nóng)桿菌C58中，并進(jìn)行油葵的侵染轉(zhuǎn)化。轉(zhuǎn)化受體是油

2、料作物油葵，向日葵在再生體系與轉(zhuǎn)基因方面已有相關(guān)報(bào)道，本研究在原有體系的基礎(chǔ)上，進(jìn)一步優(yōu)化了向日葵的胚軸分化體系以及農(nóng)桿菌遺傳轉(zhuǎn)化條件，獲得胚軸分化培養(yǎng)基為MS+6-BA0.5mg/L+GA30.1mg/L，胚軸分化率達(dá)55％；生根培養(yǎng)基為MS+NAA0.6mg/L+6g/Lagr,生根率達(dá)50％；最優(yōu)的遺傳轉(zhuǎn)化條件為AS濃度100μmol/L，菌液濃度為OD600值0.6，預(yù)培養(yǎng)16小時(shí)，浸染10分鐘，共培養(yǎng)3天，共培養(yǎng)溫度24℃，C