果膠甲基酯酶基因?qū)τ筒怂貎?nèi)酯和一氧化氮的響應(yīng).pdf

1、果膠甲基酯酶(pectin methylesterase，PME)是一種普遍存在于植物細(xì)胞中的果膠酶，主要起內(nèi)源調(diào)控植物細(xì)胞壁上以及細(xì)胞之間果膠含量的作用。為了研究在擬南芥(Arabidopsis thaliana)中油菜素內(nèi)酯(Brassinolide BR)和一氧化氮(Nitric oxide NO)對(duì)PME基因的表達(dá)調(diào)控，我們進(jìn)行了一系列實(shí)驗(yàn)，獲得以下結(jié)論： 1.BR和NO對(duì)PME基因的表達(dá)調(diào)控：研究表明，BR可以促進(jìn)PM

2、E基因的表達(dá)，NO可以抑制PME基因的表達(dá)，并且NO能夠抑制BR對(duì)PME基因的調(diào)控作用，但BR不能影響NO對(duì)PME基因的表達(dá)調(diào)控。 這就說明，PME基因是BR和NO共同作用的位點(diǎn)，BR和NO可以共同調(diào)控該基因的表達(dá)，NO對(duì)PME基因的作用位點(diǎn)在BR對(duì)該基因作用位點(diǎn)的上游。由此可見，BR和NO的一些生理功能的調(diào)節(jié)可能是通過PME基因?qū)崿F(xiàn)的。 2.檢測(cè)脅迫條件對(duì)擬南芥PME基因的影響：實(shí)驗(yàn)證明，鹽脅迫，滲透脅迫，冷脅迫能夠促

3、進(jìn)PME基因的表達(dá)，熱脅迫能夠抑制該基因的表達(dá)，并且這些脅迫對(duì)PME的調(diào)節(jié)是通過BR來完成的，BR能夠響應(yīng)鹽脅迫、滲透脅迫、溫度脅迫等植物的逆境脅迫，PME可能是BR響應(yīng)這些脅迫的一個(gè)重要的作用位點(diǎn)。 3.利用Gateway技術(shù)對(duì)擬南芥PME基因啟動(dòng)子和編碼區(qū)的克隆以及植物表達(dá)載體的構(gòu)建：根據(jù)已報(bào)道的擬南芥PME基因序列，通過PCR技術(shù)從擬南芥中擴(kuò)增得到PME基因的啟動(dòng)子片段及CDS全長(zhǎng)，利用Gateway克隆技術(shù)，將啟動(dòng)子構(gòu)建