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1、本論文分三個(gè)部分,分別研究了抗氰呼吸途徑在水稻幼苗低溫脅迫下的作用,抗氰呼吸途徑在黃化水稻幼苗轉(zhuǎn)綠過(guò)程中的作用以及外源H2O2提高水稻幼苗抗寒性的作用。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示: 1.水稻幼苗低溫處理12h之后,相對(duì)含水量(relativewatercontent,RWC)明顯下降,相對(duì)膜透性和活性氧(reactiveoxygenspecies,ROS)含量明顯上升,總呼吸速率(Vt)、交替途徑容量(Valt)和交替途徑容量在總呼吸中的比值
2、Valt/Vt于對(duì)照相比都上升。低溫處理前4h,用交替途徑抑制劑水楊基氧肟酸(salicylhydroxamicacid,SHAM)處理葉片,低溫脅迫后測(cè)得SHAM處理過(guò)的葉片與對(duì)照相比擁有更低的RWC和更高的相對(duì)膜透性、O2-產(chǎn)生速率、H2O2含量。電鏡結(jié)果顯示:常溫下,交替途徑抑制后對(duì)葉綠體結(jié)構(gòu)和H2O2含量影響不大,低溫脅迫下,SHAM可使水稻幼苗葉綠體結(jié)構(gòu)破壞更加嚴(yán)重,H2O2還出現(xiàn)在細(xì)胞膜、細(xì)胞壁、葉綠體周圍等多個(gè)地方。實(shí)驗(yàn)結(jié)
3、果顯示:低溫脅迫下交替途徑的升高在抑制ROS方面發(fā)揮作用,表明交替途徑與提高水稻幼苗抗寒性有關(guān)。 2.黃化水稻幼苗持續(xù)光照12h后,經(jīng)過(guò)交替途徑抑制劑SHAM預(yù)處理的水稻幼苗葉綠素含量明顯低于對(duì)照,O2-產(chǎn)生速率和H2O2含量高于對(duì)照,顯示交替途徑在葉綠體發(fā)育過(guò)程中具有一定的正向作用且與ROS之間有密切關(guān)系。O2-的清除劑鈦鐵試劑(4,5-dihydroxy-1,3-benzenedisulfonicacid,Trion)能夠明
4、顯抑制葉綠體的發(fā)育,H2O2的清除劑二甲基硫脲(N,N’-Dimethylthiourea,DMTU)卻使葉綠素含量有了增加。外源O2-明顯促進(jìn)葉綠體發(fā)育,高濃度時(shí)對(duì)其有抑制作用,但隨著外源H2O2濃度的升高,葉綠素含量一直下降。表明O2-對(duì)黃化水稻幼苗轉(zhuǎn)綠過(guò)程具有促進(jìn)和抑制作用并存的“雙重性”影響,H2O2卻具有毒性作用。交替途徑的存在降低了O2-和H2O2,增加了葉綠素含量,重要的是緩解了H2O2的破壞作用。 3.常溫下,用
5、不同濃度的外源H2O2(0-20mM)對(duì)水稻幼苗進(jìn)行預(yù)處理,12h6℃低溫脅迫后,測(cè)定RWC和相對(duì)膜透性,結(jié)果表明:0-8mMH2O2可以增加水稻幼苗的RWC、降低相對(duì)膜透性,以4mM濃度為最佳。低溫脅迫后,與沒(méi)有進(jìn)行4mMH2O2處理的實(shí)驗(yàn)組比較,水稻幼苗Vt、Valt都有增加,4mM的外源H2O2還抑制了丙二醛(malonaldehyde,MDA)的含量,增加了可溶性糖、可溶性蛋白質(zhì)和脯氨酸的含量。然而,外源H2O2對(duì)內(nèi)源H2O2的
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