半夏快繁體系的建立及次生代謝規(guī)律的初步研究.pdf

1、半夏Pinellia ternata(Thunb.)Breit.為天南星科多年生草本植物,以干燥塊莖入藥,是歷版《中國藥典》收載的常用中藥。本研究采用植物組織培養(yǎng)技術,選擇合適半夏外植體、植物生長調節(jié)劑,誘導、增殖半夏類原球莖,通過液體懸浮培養(yǎng)方式,建立半夏快繁體系；同時研究了半夏熒光參數(shù)日變化,Ca2+對半夏類原球莖抗性相關生理生化指標的影響,以及不同培養(yǎng)條件對半夏次生代謝產物合成的影響。研究結果如下:
　　 1半夏葉柄基部是

2、誘導類原球莖和愈傷組織的最佳外植體；在單因素實驗中,最適宜誘導類原球莖的2,4-D濃度為0.5mg·L-1,6-BA濃度為1.5mg·L-1,NAA濃度為0.5mg·L-1,KT濃度為1.0mg·L-1；正交試驗結果表明誘導的最佳條件為MS+0.1mg·L-12,4-D+0.5mg·L-16-BA+0.5mg·L-1KT。
　　 2在懸浮培養(yǎng)過程中,半夏類原球莖生長曲線呈“S”型；最利于類原球莖增殖的2,4-D濃度為0.5mg·

3、L-1；最利于類原球莖增殖的6-BA濃度為1.0mg·L-1；6-BA與2,4-D配合使用對半夏類原球莖的增殖效應優(yōu)于單獨使用,最適宜增殖組合為6-BA1.0mg·L-1+2,4-D0.2 mg·L-1。
　　 3一定濃度Ca2+增強半夏類原球莖對高溫的抗性。Ca2+濃度在0～660mg·L-1范圍內,SOD、POD活性隨Ca2+濃度升高增強,至660mg·L-1時,酶活性最高,但Ca2+濃度過高(880mg·L-1),SOD、

4、POD活性均降低.
　　 4半夏組培苗與栽培苗PSII原初光能轉化效率(Fv/Fm)、光合量子產額(φPSII)、光化學猝滅系數(shù)(qP)、非光化學猝滅系數(shù)(qN)和表觀電子傳遞速率(ETR)均存在著明顯的日變化規(guī)律。其中Fv/Fm、φPSII、qP均呈先下降后上升的趨勢,在中午強光下降低到最低值；qN則呈先上升后下降的趨勢,在中午時分達到峰值；ETR日變化呈雙峰曲線。
　　 5無糖條件下半夏類原球莖無法生長,蔗糖濃度為3

5、0g·L-1、15g·L-1時,生物堿、游離有機酸含量最高,但對鳥苷含量影響不大。
　　 2,4-D濃度不超過0.5mg·L-1時,半夏類原球莖正常生長,濃度過高時,明顯抑制生長；2,4-D對半夏類原球莖中總游離有機酸、鳥苷含量影響顯著,濃度為0.2mg·L-1、1.0mg·L-1時,總游離有機酸、鳥苷含量分別達到最高；但2,4-D對生物堿含量影響不大。
　　 不同濃度6-BA處理半夏類原球莖總生物堿含量均高于2,4-D