濟寧青山羊皮膚毛囊的發(fā)育性變化與MTR-1A、IGF-1和TYR基因的差異表達研究.pdf

1、為揭示濟寧青山羊皮膚毛囊的發(fā)育性變化規(guī)律及其候選基因的差異表達對皮膚毛囊生長和發(fā)育的影響，本研究采用組織學和實時熒光定量PCR等分子細胞生物學技術(shù)，對青山羊不同發(fā)育階段皮膚毛囊的組織結(jié)構(gòu)及其發(fā)育性變化規(guī)律和皮膚組織中褪黑素受體1A（MTR-1A）、類胰島素生長因子1（IGF-1）和酪氨酸酶（TYR）基因的mRNA差異表達量進行了比較研究。主要研究結(jié)果如下：
　　 一、采用組織學與顯微觀測技術(shù)，比較研究了濟寧青山羊胎兒羊（妊娠80

2、-85d）、小猾皮（出生后3d）、大猾皮（出生后30d）和1齡成年羊皮膚毛囊的組織學結(jié)構(gòu)，以及成年羊皮膚不同部位的組織學差異，結(jié)果表明：
　　 （1）胎兒羊（妊娠80-85d）胚胎性表皮分化為三層并增厚，真皮分化為兩層，交織分布著成纖維細胞。在表皮區(qū)可以發(fā)現(xiàn)次級毛囊毛基的發(fā)生。
　　 （2）小猾皮毛囊層中的膠原纖維平行縱橫交錯，與網(wǎng)狀層相比排列較為緊密；而網(wǎng)狀層中的膠原纖維呈水平走向，為平行交織狀排列。毛囊層內(nèi)的彈性纖維

3、細而彎曲，相互交織，縱橫排列。網(wǎng)狀層內(nèi)無彈性纖維的分布。小猾皮的毛囊組織間隙較大，密度較稀，初級毛囊發(fā)達，次級毛囊較少。小猾皮每個毛囊群僅由2-3個初級毛囊和1-2個次級毛囊組成。
　　 （3）大猾皮毛囊層和網(wǎng)狀層明顯增厚，有粗大的膠原纖維束分布其中。大猾皮的毛囊密度和毛囊群直徑極顯著地大于小猾皮。次級毛囊密集排列在初級毛囊的周圍。大猾皮毛囊群由1-5個初級毛囊和若干個次級毛囊組成，其中3毛囊群最多，發(fā)達的毛囊群使大猾皮表面粗糙

4、。
　　 （4）成年羊皮膚毛囊層的厚度超過網(wǎng)狀層，毛囊層內(nèi)含有較多的結(jié)締組織、膠原纖維和彈性纖維，形成致密的彈性纖維網(wǎng)。網(wǎng)狀層中的膠原纖維粗大，膠原纖維呈平行疏松排列。成年羊皮膚初級毛囊較粗長，具有皮脂腺等附屬結(jié)構(gòu)，毛干有髓質(zhì)；次級毛囊沒有髓質(zhì)且毛球較小，皮脂腺不發(fā)達或缺如。成年羊毛囊群和大猾皮相似，3毛囊群最多，占81.32％。
　　 （5）成年羊頸、背、腹和臀四個部位的皮膚厚度、表皮厚、真皮各層厚均以頸部最厚，背部次

5、之，腹部最薄，頸部與背部、腹部差異極顯著，背部與臀部差異不顯著：四個部位的羊毛密度，以背部最密，腹部最?。≒>0.05）。羊毛細度在各個部位的差異不顯著。毛囊群直徑，以腹部最粗，背部次之，臀部最細（P<0.01）。初級毛囊和次級毛囊的深度，均以頸部最深，背部次之，臀部最淺（P<0.01）。
　　 二、采用實時熒光定量PCR技術(shù)，研究了MTR-1A、IGF-1和TYR基因在濟寧青山羊胎兒羊、小猾皮、大猾皮和1齡成年羊背部皮膚組織中

6、mRNA的差異表達量，結(jié)果表明：
　　 （1）MTR-1A在大猾皮的表達量極顯著地高于其他三個時期（P<0.01），為胎兒期的19.5倍，為小猾皮的14.98倍，為1齡成年羊的8.87倍：IGF-1在大猾皮的表達量極顯著地高于其他三個時期（P<0.01），為胎兒期的39.26倍，為小猾皮的24.61倍，為1齡成年羊的19.52倍；表明，MT和IGF-1參與調(diào)控次級毛囊的分化與發(fā)育。在大猾皮時期，MTR-1A和IGF-1的高表達說

7、明，在此時期大量初級毛囊的毛纖維生長和次級毛囊毛基的發(fā)育啟動了次級毛囊的毛纖維的發(fā)生和生長。
　　 （2）MTR-1A在1齡成年羊皮膚頸部和背部的表達量與臀部的表達量差異顯著（P<0.05）；IGF1在1齡成年羊皮膚頸部、背部和臀部的表達量與腹部的表達量差異顯著（P<0.05）。成年羊皮膚組織中MTR-1A和IGF-1的差異表達以及毛囊群分布提示MT對初級毛囊的作用大于IGF-1。
　　 （3）MTR-1A和IGF-1的

8、表達量與成年羊的羊毛細度存在一定的相關性（P>0.05），說明MT和IGF-1是影響羊毛細度的重要候選基因。
　　 （4）TYR在小猾皮和成年羊皮膚組織的表達量極顯著地高于胎兒期和大猾皮階段（P<0.01），其在小猾皮和成年羊背部皮膚中的表達量分別為胎兒期的14.4倍和10.89倍。TYR在小猾皮中的高表達說明，胎兒出生后，由于光照等環(huán)境因素的影響，位于毛囊乳頭頂部的黑素細胞活化，皮膚組織中有大量黑素顆粒生成，在毛干堆積影響毛纖