馬鈴薯莖尖脫毒及試管薯形成的研究.pdf

1、廣東省冬種馬鈴薯近年來發(fā)展迅猛，但我省氣溫偏高，降雨較多，傳毒媒介和病毒毒源多而復雜，品種退化速度快，容易造成商品薯產(chǎn)量低質(zhì)量差。加上科研、技術水平累積不足等原因的影響，目前我省馬鈴薯還不能就地繁種，這已成為華南地區(qū)冬種馬鈴薯生產(chǎn)發(fā)展的制約因素。因此探索馬鈴薯種薯本地繁育體系的相關問題非常必要。馬鈴薯種薯本地繁育包括脫毒苗獲取、微型薯(原原種)生產(chǎn)、原種生產(chǎn)、一級種生產(chǎn)、二級種生產(chǎn)和種薯生產(chǎn)。其中馬鈴薯莖尖培養(yǎng)脫毒苗和微型薯的生產(chǎn)是馬鈴

2、薯種薯本地繁育的基礎。本研究以廣東冬種馬鈴薯主要栽培品種-粵引85-38為材料，研究影響馬鈴薯莖尖脫毒獲取脫毒試管苗的技術參數(shù)和形成馬鈴薯試管薯的有關機理，取得了如下結果：
　　 1.莖尖脫毒：采用兩種培養(yǎng)體系。培養(yǎng)體系Ⅰ：取帶1至2個葉原基的莖尖先接種于愈傷組織誘導培養(yǎng)基(MS+0.1mg/l6-BA+0.1mg/l NAA+0.1mg/lGA+3％蔗糖+0.7％瓊脂)中，培養(yǎng)兩個月后再轉至愈傷組織分化培養(yǎng)基(MS+0.5mg

3、/l6-BA+0.1mg/lNAA+0.1mg/lGA+3％蔗糖+0.7％瓊脂)，再培養(yǎng)35d后，不定芽誘導率為9.17％；培養(yǎng)體系Ⅱ：將莖尖直接接種于莖尖培養(yǎng)基(MS+0.2mg/l6-BA+0.1mg/l NAA+0.1mg/lGA+3％蔗糖+0.7％瓊脂)，培養(yǎng)90天后，不定芽誘導率為1.67％，遠低于培養(yǎng)體系Ⅰ的誘導率。通過以上兩種莖尖組織培養(yǎng)體系，一共接種240個外植體，產(chǎn)生了12株的試管苗。采用RT-PCR方法檢測馬鈴薯卷葉

4、病毒，結果顯示該12株試管苗均成功脫去馬鈴薯卷葉病毒。
　　 2.試管薯的形成：在優(yōu)化試管薯發(fā)生體系的研究中，發(fā)現(xiàn)將單節(jié)莖為外植體接種在含MS+0.1％活性碳+8％蔗糖+0.7％瓊脂+500mg/l矮壯素的培養(yǎng)基中，暗培養(yǎng)，在第5d就開始腋芽的膨大，并在10d之內(nèi)完成試管薯初始發(fā)育過程。莖段外植體在2MS培養(yǎng)基中比在MS培養(yǎng)基中培養(yǎng)產(chǎn)生的試管苗粗壯，有利于下一步試管薯的發(fā)生。組織學研究表明，試管薯形成的早期發(fā)育是從腋芽伸長生長開