阿維菌素降解菌的篩選及其降解特性研究.pdf

1、阿維菌素被視為目前最為優(yōu)良、應(yīng)用最廣泛的獸用驅(qū)蟲藥，大量的應(yīng)用已導(dǎo)致該藥在環(huán)境中的殘留，其殘留不僅會誘導(dǎo)耐藥菌株的形成，還會破壞生態(tài)環(huán)境，因此必將出現(xiàn)嚴(yán)重的污染問題。微生物降解是近些年來發(fā)展起來的處理環(huán)境中殘留藥物的有效方法之一。本文以研究阿維菌素降解菌的篩選為主線，建立了高效降解菌的篩選模型并進(jìn)行了菌株降解特性的研究。
　　 本文首先建立了無機鹽培養(yǎng)基中阿維菌素含量的HPLC檢測方法。采用乙腈提取阿維菌素，以甲醇∶水(92∶8

2、，v/v)為流動相進(jìn)行HPLC分析。阿維菌素在培養(yǎng)基中的回收率分別為82.33％-94.9％。日內(nèi)變異系數(shù)范圍為2.3-3.0％，日內(nèi)變異系數(shù)范圍為3.0-5.0％，LOQ為1mg/L。
　　 以相對貧乏的培養(yǎng)基作為限制性條件構(gòu)建菌株篩選模型。采用直接涂布分離法得到4株菌，其中AVM1菌株降解率相對較高，經(jīng)革蘭氏染色觀察和生理生化試驗，初步鑒定該菌株為蠟樣芽孢桿菌。
　　 AVM1菌株在pH7.0，溫度為35℃，底物濃度

3、40mg/L，裝樣量為100mL時，能夠維持較高的降解率。添加少量的外加碳、氮源能夠提高菌株對阿維菌素的降解率。在添加牛肉膏的條件下，AVM1菌株對初始濃度為40mgL/的阿維菌素6d的降解率為41％；金屬離子對菌株降解阿維菌素的速率也有很大的影響，本實驗研究了7種金屬離子對菌株降解阿維菌素的影響，其中添加0.1％的Cu2+時可提高菌株對阿維菌素的降解率，AVM1菌株對初始濃度為40mgL/的阿維菌素6d的降解率為43.5％。