豬瘟兔化弱毒苗抗原量測(cè)定方法的探索及不同免疫程序的差異性比較研究.pdf

1、豬瘟(Classical swine fever,CSF或hog cholera，HC)，是由黃病毒科的豬瘟病毒引起的一種高度接觸性傳染病，該病可分為最急性型、急性型、慢性型、非典型型或遲發(fā)型。該病被國(guó)際獸疫局(OIE)列為必須上報(bào)的A類病，目前仍然遍布全世界。在我國(guó)，盡管豬瘟兔化弱毒苗的大范圍使用有效地控制了豬瘟的急性發(fā)生和大流行。近些年來(lái)，我國(guó)豬瘟的流行發(fā)生了較大變化，出現(xiàn)了慢性和遲發(fā)型豬瘟，為豬瘟的防控帶來(lái)了新的難題。本研究主要對(duì)

2、當(dāng)前使用的豬瘟兔化弱毒苗中豬瘟病毒的含量測(cè)定和豬瘟免疫程序等進(jìn)行了深入的研究，對(duì)當(dāng)前豬瘟的防制提出新方法。
　　 本研究主要包括以下三部分：
　　 1、簡(jiǎn)單、快速地測(cè)定豬瘟病毒的含量是豬瘟兔化弱毒苗(HCLV)生產(chǎn)工藝中難以解決的技術(shù)之一。本試驗(yàn)通過(guò)應(yīng)用豬瘟抗原/血清ELISA試劑盒(IDEXXHerdCheck Co.)，對(duì)已知滴度的24份HCLV半成品細(xì)胞苗和21份成品疫苗進(jìn)行抗原含量測(cè)定，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，對(duì)于24份HCL

3、V半成品細(xì)胞苗，ELISA檢測(cè)方法9與兔體定型熱反應(yīng)結(jié)果符合率達(dá)95.83％。其中，ELISA方法檢測(cè)敏感性可達(dá)20頭份/瓶(或109個(gè)病毒拷貝數(shù)/瓶)，但該方法無(wú)法區(qū)分豬瘟病毒抗原與牛流行性腹瀉病毒抗原。試驗(yàn)結(jié)果證明，IDEXX豬瘟抗原/血清ELISA試劑盒能夠穩(wěn)定、快速、簡(jiǎn)單地用于HCLV細(xì)胞苗的半成品與成品的病毒含量測(cè)定，為疫苗生產(chǎn)的質(zhì)量控制提供了一種可靠和穩(wěn)定的方法。
　　 2、目前在對(duì)豬瘟的防治實(shí)踐中，對(duì)豬瘟超前免疫后

4、抗體水平的變化及保護(hù)效果存在爭(zhēng)議。本試驗(yàn)通過(guò)對(duì)規(guī)?；i場(chǎng)的應(yīng)用觀察，選擇3窩仔豬采用超前免疫，仔豬出生后即免疫豬瘟脾淋苗0.5頭份/只，隔1～1.5小時(shí)采食初乳；2窩仔豬采用豬場(chǎng)常規(guī)免疫程序，21日齡免疫豬瘟脾淋苗1頭份/只。應(yīng)用豬瘟病毒抗體ELISA試劑盒(IDEXX HerdCheck Co.)對(duì)所有仔豬0、20、40、60日齡血清抗體監(jiān)測(cè)，結(jié)果表明：在母源抗體水平較低的情況下采用超前免疫程序能夠取得良好的免疫效果。
　　

5、3、為了研究豬瘟兔化弱毒苗在母豬妊娠期免疫對(duì)母豬及仔豬有無(wú)副作用、妊娠期接種豬瘟疫苗是否能夠提高仔豬的母源抗體水平、根據(jù)仔豬的母源抗體水平確定仔豬的最佳免疫時(shí)間，從而確定仔豬的免疫程序。試驗(yàn)一：隨機(jī)選擇胎次相近、飼養(yǎng)、年齡等大體相同的妊娠母豬，在妊娠中期(分娩前50～59天、40～49天、30～39天)免疫豬瘟脾淋苗2頭份，各組隨機(jī)篩選部分所產(chǎn)仔豬(5頭/窩)，應(yīng)用豬瘟病毒抗體ELISA試劑盒(IDEXX HerdCheck Co.)對(duì)

6、其進(jìn)行抗體監(jiān)測(cè)，仔豬于60日齡免疫豬瘟脾淋苗1頭份，觀察免疫效果。對(duì)照組，妊娠母豬不免疫，仔豬按照常規(guī)免疫程序(25日齡首免、60日齡二免)。試驗(yàn)二：在試驗(yàn)一的基礎(chǔ)上，選擇分娩前40～49天的妊娠母豬3頭免疫豬瘟脾淋苗2頭份，隨機(jī)篩選部分所產(chǎn)仔豬(5頭/窩)，應(yīng)用豬瘟病毒抗體ELISA試劑盒(IDEXX HerdCheck Co.)對(duì)其進(jìn)行抗體監(jiān)測(cè)，采用60日齡首免、85日齡二免的免疫程序，觀察其免疫效果。對(duì)照組，妊娠母豬不免疫，仔豬根