海星皂甙的分離純化及其對(duì)果蠅生長(zhǎng)發(fā)育的影響.pdf

1、海星因?yàn)橐院ⅰⅤU魚(yú)等海洋珍貴軟體動(dòng)物為食一直以來(lái)被視為影響海洋養(yǎng)殖業(yè)的有害動(dòng)物，近些年來(lái)，國(guó)內(nèi)外關(guān)于海星中活性成分的提取及其活性研究越來(lái)越多，尤其是海星皂甙的研究，但是關(guān)于其抑制昆蟲(chóng)生長(zhǎng)發(fā)育的研究一直以來(lái)都是個(gè)空白。我國(guó)沿海的海星資源豐富，但一直以來(lái)的研究都無(wú)法使海星被人們大批量的利用，研究一種海星的生物活性使其可以大量的被開(kāi)發(fā)利用應(yīng)該引起人們更多的關(guān)注。本文主要研究了以下幾個(gè)方面。
　　首先，將整體凍干的羅氏海盤(pán)車(chē)粉碎機(jī)粉碎后

2、用改進(jìn)的甲醇提取法進(jìn)行浸提，先用甲醇浸提，再用水飽和的正丁醇進(jìn)行提取，最終得到海星總皂甙，利用香草醛-硫酸檢測(cè)法及其溶血活性對(duì)提取出的總皂甙進(jìn)行初步鑒定。然后用甲醇復(fù)溶提取物后中壓柱層析分離，最終得到了10個(gè)組分，其中F-2所得到的峰面積最大，對(duì)這十個(gè)組分進(jìn)行高效液相色譜的分析，F(xiàn)-2組分的峰型最好，對(duì)F-2進(jìn)行進(jìn)一步分離純化后得到較純的一種化合物F-2B。
　　其次，對(duì)化合物F-2利用高效液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用等方法進(jìn)行結(jié)構(gòu)解析。<

3、br>　　最后，對(duì)提取出的海星皂甙的活性進(jìn)行研究。研究海星皂甙對(duì)果蠅生長(zhǎng)發(fā)育的影響。用提取出的100μg/mL、50μg/mL、20μg/mL、10μg/mL的海星皂甙溶液以及對(duì)照組、100μg/mL的毛地黃皂甙溶液組、DMSO組配制果蠅培養(yǎng)基對(duì)同種條件果蠅進(jìn)行飼養(yǎng)，研究其子代果蠅的蛹化和羽化情況。實(shí)驗(yàn)證明，與對(duì)照組相比，海星皂甙對(duì)果蠅子代的蛹化和羽化都有一定的抑制作用，其抑制活性隨培養(yǎng)基中皂甙的濃度增加而增大，而DMSO組則沒(méi)有抑制活

4、性。其中100μg/ml在第七天的蛹化最大抑制率為48.9％，在第九天的羽化抑制率為68.75％，顯示出比較高的抑制活性，而毛地黃皂甙的第七天蛹化抑制率為21.2％，第九天羽化抑制率為31.25％。
　　另外，利用MTT法檢測(cè)500μg/mL、350μg/mL、250μg/mL、125μg/mL的海星總皂甙和毛地黃皂甙標(biāo)準(zhǔn)品對(duì)HepG2肝癌細(xì)胞的增殖抑制作用，結(jié)果表明，海星總皂甙和毛地黃皂甙對(duì)細(xì)胞都有比較高的抑制活性，并且隨著標(biāo)準(zhǔn)

5、品和樣品濃度的增加，其抑制活性也增加，在終濃度500μg/mL濃度下對(duì)細(xì)胞有較大的抑制能力，抑制率分別為:49.89％和60.48％，而絲裂霉素的抑制率為63.55％。
　　本論文中提取出的海星總皂甙對(duì)果蠅的蛹化和羽化都有比較高的抑制活性，若在此基礎(chǔ)上，進(jìn)一步研究其抑制機(jī)理，并對(duì)其化學(xué)及其生理上進(jìn)行研究，有望開(kāi)發(fā)出一種新型的生物活性物質(zhì)，可作為一種潛在的天然昆蟲(chóng)殺蟲(chóng)劑，同時(shí)，根據(jù)近些年的研究成果，亦可能開(kāi)發(fā)成為一種新型的天然藥物。