雞Nrampl基因的遺傳變異、表達(dá)以及與部分免疫性狀的關(guān)聯(lián)分析.pdf

1、Nrampl(natural resistance associated macrophage protein)基因,即天然抗性相關(guān)的巨噬蛋白基因,該基因與傷寒沙門氏菌、利什曼菌、卡介苗分枝桿菌等多種細(xì)胞內(nèi)感染病原體的易感性和抗性有關(guān)。本實(shí)驗(yàn)以15個(gè)雞品種為實(shí)驗(yàn)動(dòng)物,利用PCR-SSCP技術(shù)對(duì)15個(gè)雞品種Nrampl基因第9外顯子進(jìn)行多態(tài)性分析和比較。以如皋雞、漳州斗雞和隱性白羽雞為研究對(duì)象,測(cè)定部分免疫指標(biāo),并與SSCP結(jié)果進(jìn)行關(guān)聯(lián)分

2、析;同時(shí)采用熒光定量PCR技術(shù)分析不同基因型個(gè)體的Nrampl基因在如皋雞中的時(shí)空表達(dá)規(guī)律,主要研究結(jié)果如下:
　　 1.在白耳雞、大骨雞、茶花雞、固始雞、北京油雞、泰和烏骨雞、藏雞、如皋雞、漳州斗雞、文昌雞、泰原雞、蕭山雞、鹿苑雞、隱形白羽雞、安卡雞15個(gè)雞種中對(duì)Nrampl基因第九外顯子進(jìn)行單核苷酸多態(tài)性分析,結(jié)果發(fā)現(xiàn)5個(gè)突變位點(diǎn):C242A、C315G、C357T、G419T、C427T。15個(gè)雞品種(除鹿苑雞)的雜合度都

3、在0.382-0.500之間,多態(tài)信息含量在0.35左右。
　　 2.以如皋雞、漳州斗雞和隱性白羽雞為研究對(duì)象,檢測(cè)了3個(gè)品種的部分免疫性狀。結(jié)果顯示:(1)如皋雞法氏囊指數(shù)在2周齡時(shí)最大,胸腺指數(shù)在8周齡時(shí)最大,脾臟指數(shù)在6周齡時(shí)最大;(2)如皋雞淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化率隨日齡的增加而增加;(3)如皋雞IgG和IgM含量在0周齡時(shí)最大,隨后逐漸的變小,到最后逐漸達(dá)到平穩(wěn)。(4)不同品種免疫性狀相比,如皋雞的H/L比值要顯著低于隱性白羽雞

4、和漳州斗雞(P＜0.05),而如皋雞淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化率要顯著高于隱性白羽雞和漳州斗雞(P＜0.05),漳州斗雞的IgG和IgM含量顯著高于如皋雞和隱性白羽雞(P＜0.05),同時(shí)如皋雞也顯著高于隱性白羽雞(P＜0.05)。結(jié)果表明,中國(guó)地方雞品種的綜合免疫性能要優(yōu)于外來引進(jìn)品種。
　　 3.不同基因型與免疫性狀相關(guān)分析表明:如皋雞不同基因型的大部分免疫指標(biāo)存在顯著差異,AA基因型的H/L值顯著低于AB基因型和BB基因型(P＜0.05

5、);AB基因型和BB基因型間也存在顯著差異(P＜0.05)。AA基因型的淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化率,IgM含量和IgG含量的均值都高于AB基因型和BB基因型,且差異顯著(P＜0.05),AB基因型與BB基因型之間差異不顯著(P＞0.05),但AB基因型的均值要高于BB基因型。在漳州斗雞和隱性白羽雞中也有同樣的趨勢(shì)。這說明AA基因型個(gè)體在3個(gè)群體中都表現(xiàn)出了較好的抗逆性和抗應(yīng)激的能力。
　　 4.如皋雞不同基因型與經(jīng)濟(jì)性狀相關(guān)分析結(jié)果表明:A

6、A基因型個(gè)體的腹脂重高于BB基因型,且差異顯著(P＜0.05)。除此之外不同基因型的其他經(jīng)濟(jì)性狀相比,差異都不顯著(P＞0.05)。說明不同基因型與經(jīng)濟(jì)性狀之間無明顯負(fù)相關(guān),進(jìn)一步表明AA基因型可以作為候選抗病基因型。
　　 5.Nrampl基因在雞11個(gè)組織中都表達(dá),胸腺、心臟和肝臟中呈高度表達(dá),胸腺和法氏囊的表達(dá)規(guī)律基本一致。胸腺的表達(dá)量顯著高于法氏囊(P＜0.05)。心臟和肝臟在O周齡時(shí)表達(dá)量較高,而法氏囊和胸腺在6周齡表