tPA-PAI-1系統(tǒng)在牛卵丘卵母細(xì)胞復(fù)合體體外成熟進程中的表達(dá).pdf

1、為了初步了解組織型纖溶酶原激活劑(tissue-plasminogen activator，tPA)、1型纖溶酶原激活劑抑制劑(plasminogen activator inhibitor-1，PAI-1)和纖溶酶原(plasminogen，PLG)在牛卵丘卵母細(xì)胞復(fù)合體體外成熟進程中的潛在作用；本文運用實時定量RT-PCR技術(shù)分別檢測體外成熟過程中不同時間段（0 h、8 h、16 h、24 h）、添加不同濃度卵泡刺激素(follic

2、le-stimulating hormone，F(xiàn)SH)以及卵泡刺激素受體結(jié)合抑制劑(follicle-stimulating hormone receptor-binding inhibitor，F(xiàn)RBI-10)成熟培養(yǎng)16 h后牛卵丘細(xì)胞和卵母細(xì)胞中tPA、PAI-1及PLG基因相對表達(dá)變化，觀察添加不同濃度FSH成熟培養(yǎng)16 h后卵丘細(xì)胞膨脹程度差異，并統(tǒng)計卵母細(xì)胞第一極體排出情況。
　　1.卵丘卵母細(xì)胞復(fù)合體在體外成熟過程中

3、，卵丘細(xì)胞和卵母細(xì)胞tPA mRNA相對表達(dá)量，于體外成熟16 h顯著高于0 h和8 h，24 h達(dá)到最高(P<0.05)；而卵丘細(xì)胞PAI-1mRNA相對表達(dá)量于8 h達(dá)到最高，顯著高于16 h和24 h(P<0.05)。卵丘細(xì)胞PLG mRNA相對表達(dá)量總體趨勢和tPA類似，于16 h顯著高于0 h和8 h，在24 h達(dá)到最高(P<0.05)。卵母細(xì)胞PAI-1 mRNA相對表達(dá)量于16 h顯著高于0 h和8 h，達(dá)到最高，并顯著高

4、于24 h(P<0.05)。
　　2.在添加不同濃度FSH(0、0.01、0.1和1 IU/mL)體外成熟16 h的各處理組，卵丘細(xì)胞中tPA mRNA相對表達(dá)量隨FSH添加濃度的升高而升高，當(dāng)FSH添加濃度1 IU/mL，卵丘細(xì)胞之間的縫隙連接較為松散且發(fā)暗。卵丘細(xì)胞中的PAI-1 mRNA相對表達(dá)量在0.01 IU/mLFSH時高于其他各處理組；同時卵丘細(xì)胞PLG mRNA表達(dá)水平在0.01 IU/mL FSH時達(dá)到最低，于0

5、.1 IU/mL和1 IU/mL時顯著升高(P<0.05)。卵母細(xì)胞tPA表達(dá)變化顯示出與第一極體排出率相似的趨勢，即0.01 IU/mL FSH處理組的tPA mRNA水平和第一極體排出率顯著高于其他處理組(P<0.05)。卵母細(xì)胞中PAI-1 mRNA相對表達(dá)量在0.01 IU/mL FSH時最高，顯著高于其他各FSH添加組(P<0.05)。
　　3.在添加FRBI-10體外成熟16 h的各處理組，在只添加FSH組的卵丘細(xì)胞t

6、PA mRNA相對表達(dá)量顯著高于其他各處理組(P<0.05)；卵母細(xì)胞中tPA mRNA相對表達(dá)量在只添加FSH組顯著高于空白組(P<0.05)，在只添加FSH組，卵丘細(xì)胞和卵母細(xì)胞中PAI-1 mRNA相對表達(dá)量最高，顯著高于其他各處理組(P<0.05)；卵丘細(xì)胞和卵母細(xì)胞PLG mRNA相對表達(dá)量在只添加FSH組卻顯著低于空白組(P<0.05)。
　　綜合以上研究結(jié)果，本研究認(rèn)為：牛卵丘細(xì)胞中tPA與PAI-1基因的表達(dá)受FS