OsDCL3b基因沉默對穗生長發(fā)育的影響.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、Dicer是一種高度保守的核糖核酸酶,在植物中稱為Dicer-like(DCL)蛋白。Dicer/DCL的直接生物學功能主要是加工生成各種具有調控功能的小分子RNA,這些調控小RNA進一步影響其他相關蛋白基因的時空表達,進而影響生物個體的生長發(fā)育、抗病蟲害能力和逆境適應能力等。因而,研究Dicer/DCL蛋白基因的功能對揭示真核生物的基因表達調控機理具有十分重要的意義。
　　 本研究基于RNA干擾技術,對水稻OsDCL3b進行了

2、轉基因沉默分析,獲得了影響稻穗生長發(fā)育的T2代轉基因陽性純合植株,發(fā)現OsDCL3b基因主要影響21nt和24nt大小的小RNA的生物合成,為深入研究OsDCL3b基因調控稻穗生長發(fā)育的遺傳途徑奠定了基礎。
　　 主要結果如下:
　　 1、基于改造了的RNAi-Ubi質粒pYL,成功構建了OsDCL3b的轉基因沉默載體,利用農桿菌介導轉化水稻中花11,獲得了轉基因T2代陽性純合株系。
　　 2、熒光定量PCR比較

3、分析發(fā)現,OsDCL3b基因在其中2個T2代轉基因純合株系DCL4-6和DCL6-1幼穗中的表達量分別比其在野生型中花11幼穗中的表達量減少了約30％和70%;大田種植成熟期表型分析結果表明,這2個T2代轉基因純合株系植株的結實率分別只有40.0%和37.7%,而野生型中花11的結實率高達91.7%,同時這2個T2代轉基因純合株系植株的每穗枝梗數和總粒數變少,穗長變短;表明OsDCL3b基因與稻穗的生長發(fā)育密切相關。
　　 3、

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