西瓜抗炭疽病基因的分子標記研究.pdf

1、西瓜[Citrullus lanatus(Thunb.) Matsum&Nadai]是一種世界性的園藝作物，在農業(yè)生產中占有重要地位。隨著西瓜栽培面積尤其是設施栽培面積的迅速增加，西瓜的病危害加劇。
　　西瓜炭疽病是由瓜類炭疽病菌[Colletotrichum lagenerium(Pass.)Ell.et Halst]引起的真菌性病害，在許多國家都有發(fā)生，該病害已成為影響西瓜產量和質的主要因素之一。防治該病害最有效的方法是培育抗

2、病新品種。分子標記輔助選擇育種可以加速新品種的選育。因此，利用分子標記技術篩選到與抗性基因緊密連鎖的分子標記對育種有重要意義。
　　目前，西瓜炭疽病的分子標記研究方面報道很少，本實驗以抗病母本PI189225和感病父本Black Diamond及其構建的F1、F2代群體為研究材料，通過對親本、F1、F3代243個株系進行西瓜炭疽病抗性苗期接種鑒定，對抗性進行了遺傳性分析;采用AFLP和SSR兩種分子標記相結合對西瓜抗炭疽病基因進行

3、分析，獲得與抗病基因緊密連鎖的分子標記，為西瓜炭疽病分子標記輔助選擇育種提供了良好基礎。本論文的研究內容及結果如下:
　　1、本研究選取抗西瓜炭疽病的PI189225和感西瓜炭疽病的Black Diamand為親本材料，及其有性雜交的F2分離世代為試驗材料。通過對F3代群體苗期接菌鑒定得到PI189225×Black Diamond的F2代抗感分離情況，F(xiàn)2分離群體中抗病與感病的分離符合3∶1的分離比率，初步表明西瓜炭疽病抗性基因

4、為顯性單基因控制。
　　2、以改良的CTAB法提取高質量的西瓜基因組DNA，根據試驗條件進行AFLP技術體系優(yōu)化，通過優(yōu)化模板量、酶切、連接、預擴增選等關鍵試驗步驟，建立適合西瓜基因組AFLP分析的技術體系:500ng的西瓜基因組DNA，用10UEcoR I和5U Mse I37℃雙酶切4h;連接反應于16℃下連接4h;預擴增產物最佳稀釋10倍。
　　3、利用AFLP和SSR技術尋找與西瓜抗炭疽病基因相關的分子標記，32條E