荸薺顆粒結(jié)合型淀粉合成酶基因的克隆與表達(dá)分析.pdf

1、荸薺（Eleocharis tuberosa）是莎草科荸薺屬多年生水生草本植物，原產(chǎn)于中國(guó)和印度。淀粉是荸薺球莖的主要貯藏物質(zhì)，由直鏈淀粉和支鏈淀粉組成，其中直鏈淀粉可以被完全分解為麥芽糖和少量的葡萄糖，而支鏈淀粉水解后得到的產(chǎn)物為麥芽糖、葡萄糖以及分子量比較大的極限糊精。一般情況下荸薺水分和可溶性固形物含量較高，淀粉含量較低，渣少，味甜，口感較好，因此直鏈淀粉的含量及其與支鏈淀粉的比例將影響著荸薺球莖的品質(zhì)。前人研究已證明，顆粒結(jié)合型

2、淀粉合成酶(GBSS)在直鏈淀粉合成過(guò)程中起著關(guān)鍵作用。論文以荸薺品種‘紅寶石’為材料，克隆得到荸薺GBSS基因的全長(zhǎng)cDNA序列、基因組DNA序列，并分析GBSS基因在荸薺品種‘紅寶石’、‘蘇州荸薺’中的表達(dá)特性。主要結(jié)果如下:
　　1、以荸薺‘紅寶石’幼嫩球莖總RNA為模板，采用RACE-PCR技術(shù)，克隆得到長(zhǎng)為2265 bp的荸薺GBSS cDNA序列，其開(kāi)放閱讀框?yàn)?818 bp，編碼605個(gè)氨基酸，編碼蛋白的分子量為66

3、.5 kDa。
　　2、以荸薺‘紅寶石’幼嫩球莖為材料，提取荸薺總DNA，克隆得到長(zhǎng)4578bp的GBSS基因DNA序列，包括13個(gè)外顯子和12個(gè)內(nèi)含子，其中第1內(nèi)含子最大，長(zhǎng)504 bp，第7內(nèi)含子最小，長(zhǎng)83 bp;第1外顯子最大，長(zhǎng)532 bp，第5外顯子最小，長(zhǎng)64 bp，有5個(gè)外顯子的長(zhǎng)度小于100 bp。
　　3、采用qPCR技術(shù)分析了荸薺GBSS的表達(dá)特性。荸薺GBSS在不同組織中的表達(dá)規(guī)律為:球莖＞匍匐莖＞葉