轉(zhuǎn)WYMV-Nib8基因抗黃花葉病小麥N12-1對根際土壤理化性質(zhì)、酶活性和微生物群落多樣性的影響.pdf

1、轉(zhuǎn)WYMV-Nib8基因抗黃花葉病小麥N12-1由于導(dǎo)入黃花葉病毒的復(fù)制酶基因，對小麥黃花葉病毒病具有顯著效果。N12-1種植后對小麥的根際環(huán)境的生物多樣性的影響不僅有關(guān)轉(zhuǎn)基因生物的安全性，而且也有關(guān)土傳病害生態(tài)系統(tǒng)的演變。
　　根際是植物根微域土壤生態(tài)系統(tǒng)的重要組成部分，根際土壤中來自根系分泌物、根際微生物的分泌物和各種酶類不僅參與土壤中重要的生物化學(xué)過程，直接關(guān)系到土壤肥力，而且反作用于植物生長和根際微生物群落多樣性。

2、　　與此同時，根際土壤微生物作為植物生態(tài)系統(tǒng)中的重要參與者，其群落變化會影響到植物病原微生物的數(shù)量變化，最終影響重大植物病害的發(fā)生。因此根際對于生物多樣性和微生態(tài)研究有重要價值。
　　本試驗于2010-2011年度和2011-2012年度在江蘇六合和河南新鄉(xiāng)轉(zhuǎn)基因試驗田進(jìn)行，轉(zhuǎn)WYMV-Nib8基因抗黃花葉病小麥N12-1與受體揚麥158為研究材料，分析小麥主要生長階段（播種期、返青期、灌漿期和成熟期）轉(zhuǎn)基因小麥根際土壤中脲酶、蔗

3、糖酶和脫氫酶活性的影響。脲酶的測定采用靛藍(lán)比色法;蔗糖酶的測定采用DNS比色法;脫氫酶的測定使用傳統(tǒng)TTC法效果不佳，因此采用優(yōu)化后的TTC還原法進(jìn)行檢測。土壤理化性質(zhì)均按其標(biāo)準(zhǔn)方法檢測。
　　對微生物多樣性的檢測，增加了抽樣頻度，包括了小麥主要生長階段播種期、苗期、返青期、抽穗期、灌漿期和成熟期，研究了轉(zhuǎn)基因小麥N12-1與受體揚麥158根際土壤的生物多樣性。本試驗采用試劑盒法提取土壤總DNA，分別對真菌和細(xì)菌的PCR擴(kuò)增產(chǎn)物進(jìn)

4、行DGGE電泳，用QuantityOne軟件對電泳結(jié)果進(jìn)行分析。
　　結(jié)果表明:轉(zhuǎn)基因小麥與受體小麥對土壤酶活性的影響在2年2地的試驗中根際土壤脲酶、蔗糖酶活性均無顯著差異。脫氫酶在河南新鄉(xiāng)2010-2011年度的小麥成熟期表現(xiàn)出差異，其余2年2地轉(zhuǎn)基因小麥N12-1與受體小麥揚麥158之間脫氫酶活性沒有顯著差異。無論轉(zhuǎn)基因小麥或受體小麥，同一種酶在同一種植地點不同生育期之間則存在差異，這表明根際土壤酶活性主要受作物生育期的影響。