河北和內(nèi)蒙古馬鈴薯干腐病菌種類鑒定及優(yōu)勢病原菌的分子檢測.pdf

1、馬鈴薯干腐病是馬鈴薯最重要的貯藏期病害之一，由多種鐮刀菌引起。規(guī)模種植、機械化收獲和批量貯藏使得干腐病的為害更加突出，現(xiàn)已成為馬鈴薯貯藏期爛窖的重要原因。明確干腐病菌種類是防治該病害的前提和基礎(chǔ)，而實現(xiàn)病原菌的快速檢測和篩選有效的化學藥劑并正確使用則對病害診斷和科學防控具有重要的實踐意義。本研究通過形態(tài)和分子相結(jié)合的方法對河北和內(nèi)蒙古的干腐病菌進行了種類鑒定，并開展了優(yōu)勢病原菌分子檢測和殺菌劑室內(nèi)毒力測定及防治的研究工作。其主要研究結(jié)果

2、如下:
　　 1.從河北承德、張家口和內(nèi)蒙古呼和浩特采集了干腐病病薯300塊，共分離到鐮刀菌235株。鑒定出接骨木鐮刀菌、銳頂鐮刀菌、尖孢鐮刀菌和芬芳鐮刀菌4種病原菌，數(shù)量分別為149、80、3和3株。其中銳頂鐮刀菌和芬芳鐮刀菌在河北為首次報道，芬芳鐮刀菌在內(nèi)蒙古為首次報道。河北省的優(yōu)勢種群為接骨木鐮刀菌和銳頂鐮刀菌，其發(fā)生頻率分別為50.00％和48.68％;內(nèi)蒙古的優(yōu)勢種群為接骨木鐮刀菌，其頻率為87.95％。接骨木鐮刀菌是

3、兩省共有的優(yōu)勢種群。
　　 2.基于鐮刀菌翻譯延伸因子序列設(shè)計了一對接骨木鐮刀菌的特異引物Fs-F/Fs-R。利用該特異引物進行PCR擴增，可從接骨木鐮刀菌中獲得309 bp的特異性擴增片段，而其他種類鐮刀茵及馬鈴薯重要病害病原菌中均無此片段，說明該引物具有很好的專一性。該PCR反應對接骨木鐮刀菌靈敏度檢測結(jié)果表明，最低能檢測到的基因組DNA濃度為70 pg/μL。該引物也適用于發(fā)病馬鈴薯塊莖中接骨木鐮刀菌的快速檢測。
　

4、　 3.測定了咯菌腈、苯醚甲環(huán)唑、咪鮮胺、戊唑醇、氰烯菌酯和惡霉靈6種殺菌劑對4種馬鈴薯干腐病菌的室內(nèi)毒力。結(jié)果表明，不同種類鐮刀菌對藥劑的敏感性存在差異。對4種鐮刀菌抑制作用最強的藥劑均為咪鮮胺，EC50值范圍為0.010～0.057μg/mL;氰烯菌酯對接骨木鐮刀菌菌絲生長無抑制作用;而惡霉靈的抑菌作用普遍較差，EC50值在9.340～64.408μg/mL之間;其它4種藥劑效果較好。對接菌薯塊進行藥劑處理可抑制病斑橫向擴展及病原