生防叢枝菌根真菌的發(fā)掘及在煙草上的應(yīng)用研究初探.pdf

1、貴州省位于我國西南地區(qū)，地形復(fù)雜多樣，具有典型的喀斯特地貌，是我國主要的煙草種植區(qū)之一。本研究收集了該省主要煙草產(chǎn)地的煙草根圍土樣，濕篩離心法分離叢枝菌根（AM）真菌孢子，采用形態(tài)學(xué)方法，共鑒定出4屬20種AM真菌;同時(shí)，利用巢氏PCR—變性梯度凝膠電泳(DGGE)技術(shù)對AM真菌群落多樣性進(jìn)行了分析，對圖譜中55條主要條帶進(jìn)行了回收和測序。研究結(jié)果表明，DGGE圖譜中55個(gè)優(yōu)勢條帶的基因序列中有31個(gè)基因序列與GenBank中登錄的相關(guān)

2、序列的相似性為100％，22個(gè)基因序列的相似性在95％以上。土壤中AM真菌主要為球囊霉屬（Glomus）真菌，這與形態(tài)學(xué)方法鑒定所得結(jié)果一致。溫室實(shí)驗(yàn)中，對分離得到的AM真菌的促生和防效作用進(jìn)行了統(tǒng)計(jì)，結(jié)果表明，三種AM真菌，明球裘霉（Glomusclarum）、毛氏無梗囊霉（Acaulosporamorriwae）、極大巨孢囊霉（Gigasporagigantea）對煙草具有明顯的生防效果，煙草根長、株高、鮮重等指標(biāo)顯著高于對照，且它

3、們對煙草青枯病的防效都在50％以上。這些結(jié)果為進(jìn)一步研究貴州地區(qū)AM真菌多樣性以及AM真菌資源的應(yīng)用開發(fā)提供了依據(jù)。
　　1.貴州煙草根圍AM真菌多樣性的初步研究
　　從貴州省內(nèi)不同煙草產(chǎn)地采集煙草根際土樣，濕篩離心法分離(AM)真菌孢子，共鑒定出煙草AM真菌4屬20種。其中球囊霉屬（Glomus）9種，無梗囊霉屬（Acaulospora）7種，巨孢囊霉屬（Gigaspora）3種，盾巨孢囊霉屬（Scutellospora）

4、1種。實(shí)驗(yàn)提取土壤DNA樣品，擴(kuò)增AM真菌特異性片段，并采用PCR—DGGE技術(shù)對AM真菌多樣性進(jìn)行了分析。對DGGE圖譜中55條優(yōu)勢條帶測序結(jié)果顯示，煙草根際土壤中AM真菌主要為球囊霉屬（Glomus）真菌，這與形態(tài)學(xué)方法鑒定的結(jié)果一致，實(shí)驗(yàn)為進(jìn)一步研究貴州煙草AM真菌多樣性提供了依據(jù)。
　　2.AM真菌對煙草青枯病的生防效果研究
　　實(shí)驗(yàn)研究了AM真菌對煙草生長及其對煙草青枯病的防治效果，得到了分離于貴州煙草根圍、并對煙