圍產蒙古牛外周血中性粒細胞凋亡調控基因表達研究.pdf

1、目的:通過探討圍產蒙古牛外周血中性粒細胞p53，Bax，cyt-c，caspase-3和Bcl-2基因表達，為揭示和評價圍產免疫抑制提供理論依據(jù)。
　　方法:試驗選用經(jīng)產蒙古牛（2～3胎次）10頭，同期發(fā)情、配種，從中選取合適受孕牛3頭（Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ），于分娩前22，18，14，10，8，6，4和2天(-22d，-18d，-14d，-10d，-8d，-6d，-4d，-2d)，生產當天(0d)，產后2，4，6，8，10，14天(2d、

2、4d、6d、8d、10d、14d)頸靜脈采血。采用全自動動物血液分析儀檢測外周血主要白細胞數(shù)量;分離血清，放射免疫法檢測血清中雌二醇、孕酮及糖皮質激素濃度;分離中性粒細胞，RT-PCR和WesternBlot檢測中性粒細胞p53，Bax，cyt-c，caspase-3和Bcl-2基因mRNA與蛋白表達。
　　結果:1.外周血白細胞總數(shù)、PMNs和MC總數(shù)的變化趨勢是從-22d逐漸升高，-10d升至最高，0d時顯著下降(P＜0.05

3、)，2d時迅速升高(P＜0.05)，2～14d維持在正常水平;淋巴細胞-22～-8d變化不明顯，-8～0d逐漸下降，0d降至最低，2d時顯著升高(P＜0.05)，2～14d維持在正常水平;嗜酸細胞-22～-10d逐漸升高，-10d達到峰值，隨后下降，在-6、-2d有所回升，0d最低，產后逐漸增加。
　　2.各受試牛E2從-22d逐漸升高，-2d升至最高，2d時顯著下降(P＜0.05)，2～14d維持在基礎濃度;P4濃度從-22d逐

4、漸下降，2d降至最低，2～14d維持在基礎濃度;GC濃度從-22d逐漸升高，0d升至最高，2d時迅速下降(P＜0.05)，2～14d維持在基礎濃度。ERαmRNA豐度從-22d逐漸升高，-8d升至最高，-8～14d逐漸下降，而ERβ無明顯變化。
　　3.p53，Bax，cyt-c和caspase-3mRNA豐度從-22d逐漸下降，0d降至最低，0～14d逐漸升高;抗凋亡基因Bcl-2mRNA豐度從-22d逐漸上升，0d升至最高，0