甘藍(lán)型油菜生態(tài)型細(xì)胞質(zhì)雄性不育的差異表達(dá)研究.pdf_第1頁(yè)
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1、該研究用DDRT-PCR方法,以楊光圣等（1990）育成的在低溫條件下表現(xiàn)雄性可育,而在高溫處理?xiàng)l件下表現(xiàn)雄性不育的甘藍(lán)型油菜生態(tài)型細(xì)胞質(zhì)雄性不育兩用系8-8112AB為材料,分析、鑒定與育性相關(guān)的mRNA差異表達(dá)指紋圖譜.主要結(jié)果如下：1.將DDRT-PCR差異顯示技術(shù)和銀染技術(shù)相結(jié)合運(yùn)用油菜育性機(jī)理研究,建立了一套DDRT-PCR的技術(shù)體系.2.采用3種錨定引物（AAGCT<,12>A,AAGCT<,12>C,AAGCT<,12>G

2、）和26種差異顯示專用引物組成78種引物對(duì),對(duì)兩種溫度下的處于胞原發(fā)育期的花蕾（1-2mm）mRNA的DDRT-PCR分析表明,不同引物對(duì)擴(kuò)增出的帶紋數(shù)目不同,最多可達(dá)70多條,有些則無(wú),平均每對(duì)引物可擴(kuò)增出約20條清楚的帶紋.3.回收差異表達(dá)的cDNA,重?cái)U(kuò)增后在1.5﹪瓊脂糖凝膠上電泳并檢測(cè)純度,該實(shí)驗(yàn)共找到了13個(gè)大小在100-250bp的差異表達(dá)cDNA片段,其中4個(gè)在高溫時(shí)特異表達(dá),另外9個(gè)在低溫時(shí)特異表達(dá).4.將獲得的13條

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