2023年全國碩士研究生考試考研英語一試題真題（含答案詳解+作文范文）_第1頁
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文檔簡介

1、江南大學(xué)碩士學(xué)位論文重組蛋白GGH在畢赤酵母中高效表達及純化姓名：楊濤申請學(xué)位級別：碩士專業(yè)：微生物與生化藥學(xué)指導(dǎo)教師：許正宏20091201AbstractAbstractGlucagon—likepeptide—I(GLP一1)is30residualpeptidehormonesecretedbyintestinalLcellsinresponsetonutrientingestionItplaysanimportantrolei

2、nsimulatinginsulinsecretion，inducingpancreaticbetacellsproliferationandinhibitingpancreaticbetacellsapoptosisTheuniquehypoglycemicmechanismofGLP一1isunparalleledtotheexistinganti—diabetesdrugsConsequencetoitsnaturalfuncti

3、onaslocallysecretedshort—termmessenger，itshalflifeincirculationisveryshortandprovidedmainlybyfastrenalclearanceduetoitslowmolecularweightandproteolysissusceptibility，resultinginlowclinicalutilityInourlabAGLP1fusionprotei

4、nnamedGGHcomprisingdoubletandemGLP1andhumanserumalbumin(HSA)WasconstructedtoprolongitshalflifenleGLP一1fusionproteinWasexpressedinpichiapastorisKM71transformedwithvectorpPIC9K／(GLP一1A2G)2一HSAInthisstudyimprovingtheexpress

5、ionlevelandpurificationoffusionproteinGGHwerefocusedonThemainconclusionsareasfollows：ThefusionproteinGGHexpressionlevelindifferenthoststrains(KM71，GS115andSMD1168)WasdeterminedandanalyzedbystatisticalmethodsTherelevanceo

6、fgenedosageandfusionproteinGGHexpressionlevelwasinvestigatedbyRT—PCRinthreeGS115recombinantswithdifferentexpressionlevelTheresultsshowedthatthehoststrainGS115wasmoresuitableforexpressingfusionproteinGGHItWasapositivecorr

7、elationbetweengenedosageandfusionproteinGGHexpressionlevelAhighyieldrecombinantstrainGS115／F2withexpressionlevelof328mg／LinshakeflaskcultureWasselectedoutforfurtherstudyAfterinvestigatingthefermentationprocessofhighyield

8、recombinantstrain，theprocessWasconfirmedTheresultsdemonstratedthatorganicnitrogensourcesweremoreconducivet0mghdensitycultureofrecombinantstrainandinhibitingproteolysisApulsefeedingstrategyofO5％methanoleachtimewastheoptim

9、almodeforinducingfusionproteinexpression30“Cwastheoptimaltemperatureforinducing111eyieldoffusionproteinGGHinthefermentationprocessofrecombinantstrainreachedto642mg／L。ApreliminarypurificationprocesswasestablishedTheproces

10、swithatotalrecoveryof334％includedfivesteps：centrifugation，filtration，Bluesepharose，SephadexG25andQsepharosechromatographyThefusionproteinGGHWaspurifiedtoapparenthomogeneity晰tllpuritygreaterthan95％analyzedbySDSPAGEandHPLC

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