18029.安徽牯牛降自然保護區(qū)耳霉物種多樣性及其疑難種的分子鑒定

1、獨創(chuàng)性聲明本人聲明所呈的學位論文是本人在導師指導下進行的研究工作及取得的研究成果。據(jù)我所知，除了文中特別加以標注和致謝的地方外，論文中不包含其他人已經(jīng)發(fā)表或撰寫過的研究成果，也不包含為獲得安徽農(nóng)業(yè)大學或其他教育機構的學位或證書而使用過的材料。與我一同工作的同志對本研究所做的任何貢獻均已在論文中作了明確的說明并表示謝=也恩。學位論文作者簽名：企翌蘭j僉A：于rL日期：h／戽‘月V日學位論文版權使用授權書本學位論文作者完全了解安徽農(nóng)業(yè)大學有

2、關保留、使用學位論文的規(guī)定，有權保留并向國家有關部門或機構送交論文的復印件和電子文件，允許論文被查閱和借閱。本人授權安徽農(nóng)業(yè)大學可以將學位論文的全部或部分內(nèi)容編入有關數(shù)據(jù)庫進行檢索，可以采用影印、縮印或掃描等復制手段保存、匯編學位論文(保密的學位論文在解密后適用本授權書)。學位論文作者簽名：金翌!!簽字日期：_，厶年6月≥日學位論文作者畢業(yè)后去向：工作單位：——通信地址：指導教師簽名：耄辱確簽字日期：一，L年f月歹日電話：郵編：摘要耳霉

3、屬不僅在蟲霉目乃至菌物的系統(tǒng)學中都占有特殊的重要地位，而且在生態(tài)環(huán)境中也發(fā)揮重要作用。牯牛降自然保護區(qū)是我國東部亞熱帶常綠闊葉林帶的重要典型地區(qū)之一，保護區(qū)內(nèi)動植物和真菌的種類極其豐富。因此我們對安徽牯牛降自然保護區(qū)的耳霉(真菌)物種多樣性及其疑難種進行了系統(tǒng)研究。2010年4月至2012年3月，在安徽省池州市石臺縣和黃山市祁門縣牯牛降自然保護區(qū)進行土壤及枯枝落葉樣品的采集和分離，并對分離所獲耳霉菌株進行形念學鑒定。根據(jù)Drechsle

4、r和King的分離和鑒定方法，從該地區(qū)樣品中共分離獲得82株耳霉。依據(jù)King和BenZe‘ev&Kenneth的耳霉形態(tài)學分類系統(tǒng)，將這82個菌株鑒定為10個耳霉種，其中包括1個新種，1個新變種和1個新記錄種；它們分屬于3個亞屬，即耳霉亞屬中含有：牯牛降耳霉Conidiobolusguni巧iangensisspnox，(新種)(1株)、有味耳霉Conidiobolusosmodes(5株)、近隔接合孢耳霉Conidiobolusiu

5、xtagenitus(2株)、大乳突耳霉Conidiobolusmacropapillatus(3株)；毛管霉亞屬含有：異形孢耳霉Conidiobolusheterosporus(12株)，皺孢耳霉Conidiobolusrhys05porus(新已錄種)(1株)：德拉霉亞屬有：冠耳霉Conidioboluscoronatus(55株)，貝爾弗雷德耳霉Conidiobolusbrefeldianus(1株)、多育耳霉Conidiobol

6、uspolytocus(1株)、冠耳霉長柔毛變種Conidioboluscoronatusvar10ngvillosusvatnov(新變種)(1株)。經(jīng)調查和研究發(fā)現(xiàn)，安徽省牯牛降自然保護區(qū)的冠耳霉分布最多，其次是異形孢耳霉。對所獲得的10株耳霉采用CTAB法提取DNA，用引物LROR和LR5對28SrDNA基因的部分區(qū)域進行特異性擴增，測序獲得1000bp左右的序列。使用軟件BIOEDIT和DNAMAN進行序列編輯和比對，以尖突巴科

7、霉Batkoaapiculata和蠅蟲霉Entomophthoramuscae為外群，利用PAUP木4Obl0軟件的最大簡約法對27個耳霉菌株進行系統(tǒng)發(fā)育分析。從系統(tǒng)發(fā)育樹可看出明顯3個分支，這3個分支基本符合BenZe‘ev&Kenneth在1982提出的3個亞屬的劃分標準。同時分子證據(jù)支持我們10個耳霉種的形態(tài)學研究結果。在對該區(qū)域耳霉進行形態(tài)學研究時，我們發(fā)現(xiàn)一株RCEF5347耳霉菌株和常見的冠耳霉近似，但在柔毛孢子上和原描述有