水稻9311對(duì)于水稻細(xì)菌性條斑病侵染應(yīng)答的差異蛋白質(zhì)組學(xué)研究.pdf

1、水稻細(xì)菌性條斑病是由Xanthomonas oryzae pv. oryzicola引起的,在熱帶、亞熱帶稻區(qū)廣泛發(fā)生的細(xì)菌病害,也是目前威脅我國(guó)南方稻區(qū)水稻生產(chǎn)的重要病害之一,可以引起5%-40%的產(chǎn)量損失。本研究以對(duì)水稻細(xì)菌性條斑病極感病的水稻品種-9311為研究對(duì)象。通過(guò)雙向電泳聯(lián)用質(zhì)譜技術(shù),研究了9311在水稻細(xì)菌性條斑病病菌侵染后4個(gè)不同時(shí)間段(12h、48h、5d、10d)的葉片全蛋白2-DE圖譜的變化,并對(duì)差異表達(dá)的蛋白質(zhì)

2、點(diǎn)進(jìn)行MALDI-TOF/MS分析。2-DE圖譜分析結(jié)果表明：在病原菌侵染9311后不同時(shí)期,共檢測(cè)到164個(gè)差異蛋白出現(xiàn),其中表達(dá)量上升的23個(gè)；表達(dá)量下降的16個(gè)；誘導(dǎo)出現(xiàn)的蛋白71個(gè)；抑制表達(dá)的蛋白54個(gè)。將164個(gè)差異蛋白點(diǎn)經(jīng)MALDI-TOF/MS分析,得到其中106個(gè)蛋白的肽質(zhì)量指紋圖譜。通過(guò)MASCOT數(shù)據(jù)庫(kù)比對(duì),鑒定出水稻細(xì)菌性條斑病病菌侵染誘導(dǎo)差異表達(dá)蛋白86個(gè)。對(duì)這86個(gè)差異表達(dá)蛋白的同源性序列比對(duì)以及功能分析,并著

3、重研究了其中的R和PR類蛋白,得到了其中NBS-LRR類蛋白質(zhì)的同源進(jìn)化樹(shù),以及NBS-LRR類蛋白和RLK/激酶類蛋白的保守區(qū)/功能區(qū)的分析結(jié)果。并根據(jù)蛋白序列分析結(jié)果,設(shè)計(jì)PCR引物,經(jīng)RT-PCR,從水稻cDNA中,獲得水稻RLK/激酶類基因片斷5個(gè),NBS-LRR類基因片斷2個(gè),PR-10基因家族成員基因片斷1個(gè)。其中一個(gè)編號(hào)13-3-4的NBS-LRR類基因,在基因庫(kù)中,與現(xiàn)有的同類基因最高的同源性為91%。經(jīng)Northern