1488.難以再生菜豆不定芽的誘導(dǎo)

1、摘要摘要植物再生技術(shù)是遺傳轉(zhuǎn)化的基礎(chǔ)，在農(nóng)業(yè)生產(chǎn)、植物保護(hù)等方面都起到促進(jìn)作用。但不同種類的植物在再生能力上表現(xiàn)出巨大差異，部分植物的再生存在困難(如：水稻、玉米等的成熟組織)，菜豆(PhaseolusvulgarisL)亦為難再生植物中的一種。本研究以菜豆為試驗(yàn)材料，對(duì)其進(jìn)行了不定芽誘導(dǎo)的研究，同時(shí)也為其它難以再生植物不定芽的誘導(dǎo)提供參考。主要研究結(jié)果如下：首先，以菜豆下胚軸為外植體，探究不同濃度組合的生長(zhǎng)素(2，4D、NAA、IBA

2、)和細(xì)胞分裂素(6BA、TDZ、KT)對(duì)其愈傷組織誘導(dǎo)和分化的影響。結(jié)果表明，多數(shù)組合的愈傷組織誘導(dǎo)率為10000％，而MS培養(yǎng)基中則無(wú)愈傷組織的形成。其中，MSI5gmolL‘1NAA1gmolL。1TDZ培養(yǎng)基中愈傷組織的平均鮮重和平均干重最高分別為1032200386g和00868400016g，但愈傷組織皆呈褐色，質(zhì)地疏松，且無(wú)不定芽產(chǎn)生。后以MSI5gmolL1NAAIgmolLoTDZ為基本培養(yǎng)基，以下胚軸為外植體，探究活性

3、炭、抗壞血酸、硝酸銀對(duì)抑制愈傷組織褐化的影響。結(jié)果表明，愈傷組織褐化并沒(méi)有得到減輕。由于菜豆下胚軸在誘導(dǎo)愈傷組織的過(guò)程中出現(xiàn)褐化，且無(wú)法產(chǎn)生不定芽，故更換外植體取材部位，嘗試以菜豆的根段為外植體，探究不同濃度組合的生長(zhǎng)素(24D、NAA、IBA)和細(xì)胞分裂素(6BA、TDZ、KT)對(duì)根外植體愈傷組織誘導(dǎo)和分化的影響。結(jié)果表明，多數(shù)組合的愈傷組織誘導(dǎo)率為10000％，而MS培養(yǎng)基中無(wú)愈傷組織的形成。其中，最佳誘導(dǎo)培養(yǎng)基為MSI，tmolL

4、～2，4一D10gmolL～TDZ，愈傷組織平均鮮重及平均干重最大分別為02971400189g和00317士00017g，且愈傷組織呈淡綠色，結(jié)構(gòu)致密，但無(wú)不定芽產(chǎn)生。為獲得不定芽，以MSIgmolL～2，4一D10gmolL’1TDZ誘導(dǎo)的根愈傷組織為試驗(yàn)材料，探究不同濃度組合的NAA、／BA和6BA、TDZ、KT對(duì)愈傷組織繼代培養(yǎng)和分化的影響。結(jié)果表明，外植體在含有IBA和TDZ的MS培養(yǎng)基中可以誘導(dǎo)出具有最大鮮重和最大干重的愈傷

5、組織，但愈傷組織呈深褐色，質(zhì)地疏松。后探究一種生長(zhǎng)素(NAA、IBA)和兩種細(xì)胞分裂素(6BA、TDZ、KT)的不同濃度組合對(duì)愈傷組織繼代培養(yǎng)和分化的影響。結(jié)果證明，與單獨(dú)使用一種細(xì)胞分裂素相比，同時(shí)使用兩種細(xì)胞分裂素誘導(dǎo)出的愈傷組織結(jié)構(gòu)呈褐色，質(zhì)地疏松，不利于不定芽的誘導(dǎo)?；谝陨涎芯恳约皩?duì)相關(guān)文獻(xiàn)的綜合分析，采用含有10gmolL。1TDZ的MS培養(yǎng)基對(duì)菜豆種子進(jìn)行預(yù)培養(yǎng)，并以菜豆上胚軸薄片為外植體，以B5液體培養(yǎng)基為基本培養(yǎng)基，探