甲乙煎影響H-,22-小鼠肝癌組織粘附分子E-cadherin、CD54表達的實驗研究.pdf

1、目的：原發(fā)性肝癌是世界范圍內(nèi)發(fā)病率最高的惡性腫瘤之一，每年約有100萬以上的人新患此病。在我國，原發(fā)性肝癌也是常見惡性腫瘤之一，死亡率高，被稱為“癌中之王”。侵襲轉(zhuǎn)移是肝癌等惡性腫瘤的本質(zhì)特征，也是導(dǎo)致患者死亡的主要原因。肝癌惡性程度高，早期即發(fā)生肝內(nèi)播散轉(zhuǎn)移，因此在原發(fā)性肝癌的治療中，積極防治肝癌的侵襲轉(zhuǎn)移是非常重要的。中醫(yī)藥抗肝癌轉(zhuǎn)移有其獨特的優(yōu)勢。劉亞嫻教授根據(jù)中醫(yī)理論，參考古今醫(yī)家的經(jīng)驗(如王旭高的有關(guān)論述、秦伯未《謙齋醫(yī)學(xué)講稿

2、》論肝病的內(nèi)容等)，結(jié)合多年治療肝癌的臨床經(jīng)驗，科學(xué)選藥組成了中藥復(fù)方甲乙煎。該方臨床應(yīng)用中取得了滿意的療效，可改善患者生存質(zhì)量，延長生存時間，防止肝癌進展、轉(zhuǎn)移、復(fù)發(fā)。肝癌轉(zhuǎn)移是一個極其復(fù)雜的多基因調(diào)控和多步驟發(fā)生過程，涉及癌細胞粘附、基質(zhì)降解、細胞遷移等許多環(huán)節(jié)，細胞粘附是其中重要步驟之一。 本實驗的目的在于探討甲乙煎抗H22小鼠肝癌轉(zhuǎn)移的作用機理，重點探討甲乙煎對肝癌組織中細胞粘附分子E-cadherin和CD54表達的影

3、響，為該方防治肝癌轉(zhuǎn)移提供客觀而科學(xué)的依據(jù)，進一步指導(dǎo)和擴大臨床應(yīng)用。 方法：取SPF級雄性BALB/C小鼠75只，體重18±2克，隨機分為5組：病理模型對照組(A)，西藥(5-Fu)對照組(B)，中藥復(fù)方甲乙煎小劑量組(C)、中劑量組(D)、大劑量組(E)，每組各15只。復(fù)制小鼠肝癌淋巴道轉(zhuǎn)移模型：復(fù)蘇肝癌H<,22>瘤株，注入BALB/C小鼠腹腔內(nèi)，觀察腹圍增至最大時抽取腹水，經(jīng)過處理后，注入第二代小鼠腹腔內(nèi)，依次傳第三代，

4、抽取腹水，經(jīng)過處理注入小鼠爪墊內(nèi)側(cè)皮下。自造模第2天，開始灌胃，模型組予等量生理鹽水，日1次，連續(xù)20天。實驗結(jié)束后第2天，各組小鼠頸椎脫臼法處死，稱重，取脾、胸腺和原發(fā)瘤。計算脾指數(shù)、胸腺指數(shù)；通過HE染色，光鏡下觀察H<,22>小鼠肝癌細胞局部侵襲程度；并通過免疫組化法觀察局部瘤組織中細胞粘附分子E-cadherin和CD54的表達水平。數(shù)據(jù)采用方差分析、秩和檢驗。 結(jié)果：1 各組脾指數(shù)的比較：西藥5-Fu治療組的脾指數(shù)顯著

5、低于病理模型對照組及甲乙煎各劑量治療組，在統(tǒng)計學(xué)上有顯著性差異(P<0.01.)；模型對照組的脾指數(shù)高于甲乙煎小、中劑量組，但均無顯著性差異(P>0.05)，而低于甲乙煎大劑量組，且有顯著性差異(P<0.05)：甲乙煎大劑量組的脾指數(shù)高于小、中劑量組，有顯著性差異(p<0.01或.P<0.05)，中劑量組雖然高于小劑量組，但無顯著性差異(P>0.05)。2 各組胸腺指數(shù)的比較：模型對照組的胸腺指數(shù)均低于各治療組，與甲乙煎中、大劑量組有顯

6、著性差異(P<0.05)，而與甲乙煎小劑量組和5-Fu組無顯著性差異(P>0.05)：各治療組之間比較，均無顯著性差異(P>0.05)。3 各組局部瘤組織侵襲程度比較：模型對照組的瘤組織侵襲程度均高于各治療組，有顯著性差異(P<0.01)；而各治療組之間比較，均無顯著性差異(P>0.05)。4 各組局部瘤組織E-鈣粘蛋白表達的比較：模型對照組瘤組織E-鈣粘蛋白的表達均弱于各治療組，有顯著性差異(P<0.01或P<0.05)；而各治療組之

7、間比較，均無顯著性差異(p>0.05)。5 各組局部瘤組織CD54表達的比較：模型對照組瘤組織CD54的表達均強于各治療組，有顯著性差異(P<0．01或．P<0．05)；而各治療組之間比較均無顯著性差異(P>0．05)。 結(jié)論：1 甲乙煎可提高小鼠機體免疫能力，對免疫功能的調(diào)整，存在量效關(guān)系，對脾指數(shù)、胸腺指數(shù)的影響均以大劑量組最明顯。2 甲乙煎可降低H<,22>肝癌小鼠癌細胞在局部的侵襲程度，與劑量大小無關(guān)。3 甲乙煎可提高H