烏蘇里藜蘆生物堿單體成分計(jì)米丁的抗血栓藥效學(xué)研究.pdf

1、目的：計(jì)米丁是從烏蘇里藜蘆生物堿(VnA)中分離提純的單體成分之一。本實(shí)驗(yàn)旨在研究計(jì)米丁的抗栓降粘作用及其對(duì)血小板聚集及凝血時(shí)間和出血時(shí)間的影響。 方法和結(jié)果： 一、靜脈注射計(jì)米丁半數(shù)致死量(LD<,50>)的測(cè)定：取小鼠50只，隨機(jī)分成5組，每組10只。受試藥物組動(dòng)物分別尾靜脈勻速推注4種濃度(5.22，6.14，7.23，8.50 mg.kg<'-1>)的計(jì)米丁注射液，空白對(duì)照組動(dòng)物給以等容量NS，用Bliss法計(jì)算

2、得小鼠靜脈注射計(jì)米丁的LD<,50>為6.6619 mg.kg<'-1>，其95﹪可信限為5.6120 mg.kg<'-1>～7.9080 mg.kg<'-1>。 二、對(duì)電刺激大鼠頸動(dòng)脈血栓形成的影響：取SD大鼠，按電刺激法造成頸動(dòng)脈血栓模型，觀察計(jì)米丁對(duì)血管堵塞時(shí)間(OT)的影響，并作量效關(guān)系分析。結(jié)果表明，與NS陰性對(duì)照組相比，計(jì)米丁1.25μg.kg<'-1>、2.50μg.kg<'-1>、5.00μg.kg<'-1>、

3、10.00μg.kg<'-1>和20.00μg.kg<'-1>組iv后OT延長(zhǎng)百分率分別為16.4﹪(P<0.05)、27.3﹪、33.8﹪、43.9﹪及66.0﹪(P<0.01)；陽性對(duì)照藥LAS(賴安匹林) 18.0mg.kg<'-1> iv后OI、延長(zhǎng)百分率為52.3﹪(p<0.01)。 三、對(duì)大鼠下腔靜脈血栓形成的影響：取SD大鼠，隨機(jī)均分為7組：NS陰性對(duì)照組，肝素400.0μg.kg<'-1>陽性對(duì)照組，計(jì)米丁1.

4、25μg.kg<'-1>、2.50μg.kg<'-1>、5.00μg.kg<'-1>、10.00μg.kg<'-1>和20.00μg.kg<'-1> iv組。按Rayer氏法造成大鼠下腔靜脈血栓形成模型，觀察各組對(duì)血栓形成率和血栓干重的影響。結(jié)果表明，與NS組相比，計(jì)米丁1.25μg.kg<'-1>、2.50μg.kg<'-1>、5.00μg.kg<'-1>、10.00μg.kg<'-1>和20.00μg.kg<'-1>iv后血栓干重抑

5、制率分別為7.0﹪(P>0.05)、58.8﹪、70.4﹪、72.9﹪和83.0﹪(P<0.01)：陽性對(duì)照藥肝素400.0μg.kg<'-1>iv后的血栓干重抑制率為85.0﹪(p<0.01)。 四、對(duì)大鼠血小板聚集的影響1.對(duì)大鼠體外血小板聚集的影響：取SD大鼠，心臟采血，按常規(guī)制備富血小板血漿(PRP)和貧血小板血漿(PPP)。以ADP(終濃度為3μmol/L)為血小板聚集誘導(dǎo)劑。按Born氏法(比濁沉淀法)測(cè)定血小板5

6、min最大聚集率。結(jié)果表明，與NS組相比，計(jì)米丁終濃度6.25 gg/L、12.50μg/L、25.00gg/L和50.00μg/L對(duì)血小板聚集抑制率分別為19.39﹪、33.55﹪、46.14﹪和61.26﹪；終濃度40.0mg/L的LAS對(duì)血小板聚集抑制率為42.23﹪。 2.對(duì)大鼠體內(nèi)血小板聚集的影響：取SD大鼠，隨機(jī)均分為6組：NS陰性對(duì)照組，LAS 18.0mg.kg<'-1> 陽性對(duì)照組以及計(jì)米丁2.50μg．kg

7、<'-1>、5.00gg．kg<'-1>、10.00gg．kg叫和20.00μg.kg<'-1>組，按4.1項(xiàng)下方法測(cè)定血小板5min最大聚集率。結(jié)果表明，與NS組相比，計(jì)米丁2.50gg.kg<'-1>、5.00μg.kg<'-1>、10.00μg.kg<'-1>和20.00μg.kg<'-1>iv后抑制血小板聚集率分別為22.67﹪、39.87﹪、47.39﹪和62.93﹪(P<0.01)：陽性對(duì)照藥LAS 18.0mg.kg<'-

8、1>iv后抑制血小板聚集率為47.21﹪(p<0.01)。 五、對(duì)小鼠凝血時(shí)間的影響：取昆明種小鼠，隨機(jī)均分為7組：NS陰性對(duì)照組，肝素1.25mg.kg<'-1>陽性對(duì)照組，計(jì)米丁1.25gg.kg<'-1>、2.50μg.kg<'-1>、5.00μg.kg<'-1>、10.00μg.kg<'-1>和20.00μg.kg<'-1>組，測(cè)定小鼠全血凝血時(shí)間(CT)，以NS組為基準(zhǔn)計(jì)算各給藥組CT延長(zhǎng)百分率。結(jié)果表明，計(jì)米丁1.

9、25μg.kg<'-1>、2.50μg.kg<'-1>、5.00μg.kg<'-1>、10.00μg.kg<'-1>和20.00μg.kg<'-1>iv后血栓CT延長(zhǎng)百分率分別為-0.81﹪(P>0.05)、119.14﹪、159.92﹪、228.74﹪和195.14﹪(P<0.01)，陽性對(duì)照藥肝素1.25mg.kg<'-1>iv后CT延長(zhǎng)61.13﹪(p<0.01)。 六、對(duì)小鼠尾出血時(shí)間的影響：取昆明種小鼠，隨機(jī)均分為6組

10、：NS陰性對(duì)照組，肝素1.25mg.kg<'-1>陽性對(duì)照組，以及計(jì)米丁1.25 μg.kg<'-1>、2.50μg.kg<'-1>、5.00μg.kg<'-1>和10.00μg.kg<'-1>組，按斷尾法觀察小鼠尾出血時(shí)間(BT)，以NS組為基準(zhǔn)計(jì)算各給藥組BT延長(zhǎng)百分率。結(jié)果表明，計(jì)米丁1.25μg.kg<'-1>、2.50μg.kg<'-1>、5.00μg.kg<'-1>、10.00μg.kg<'-1>iv后血栓BT延長(zhǎng)率分別為4

11、7.13﹪、58.05﹪、121.84﹪和105.17﹪(P<0.01)，陽性對(duì)照藥肝素1.25mg.kg<'-1>iv后BT延長(zhǎng)78.16﹪(p<0.01)。 七、對(duì)家兔血液流變學(xué)的影響：取家兔，隨機(jī)均分為4組，分別耳緣靜脈注射計(jì)米丁1.25μg.kg<'-1>、2.50μg.kg<'-1>、5.00μg.kg<'-1>和10.00μg.kg<'-1>，測(cè)定全血粘度和血漿粘度，以藥前為基準(zhǔn)計(jì)算給藥后各時(shí)間點(diǎn)血液流變學(xué)參數(shù)的變