頑痹清丸的質(zhì)量標準及指紋圖譜研究.pdf

1、　　目的：本課題主要對頑痹清丸建立較完整、可行的質(zhì)量標準體系。采用薄層色譜法對絡石藤、土茯苓、黃芩、益母草、乳香、紫草、吳茱萸、牡丹皮進行定性鑒別,構(gòu)建專屬性強、靈敏度高、重復性好的薄層鑒別方法；對君藥忍冬藤、臣藥黃芩中的指標性成分馬錢苷、黃芩苷進行含量測定；對頑痹清丸進行HPLC指紋圖譜研究,建立頑痹清丸的 HPLC指紋圖譜,以此對頑痹清丸的整體質(zhì)量優(yōu)劣進行評價；對頑痹清丸進行一般質(zhì)量檢查,從而進一步完善頑痹清丸的質(zhì)量標準,為臨床安全

2、有效用藥提供質(zhì)量控制依據(jù)。
　　方法：通過對頑痹清丸處方中忍冬藤、絡石藤、土茯苓、黃芩、益母草、乳香、川牛膝、吳茱萸、紫草、生地黃、牡丹皮以及薏苡仁進行薄層色譜鑒別。了解各味藥材的主要化學成分和有效成分,著重考察提取方法、展開系統(tǒng)、點樣體積、定位試劑和方法,記錄薄層色譜圖。由于TLC鑒別實驗影響因素較多,需完成對環(huán)境條件、溫濕度、薄層板質(zhì)量、不同類型薄層板的使用、以及展開前的預處理、預飽和時間、點樣情況、顯色顏色、清晰度、穩(wěn)定性

3、等諸多因素的綜合考慮和考察,從而構(gòu)建操作簡便、專屬性強、重復性好的 TLC鑒別方法；對該方的君藥忍冬藤和臣藥黃芩進行定量研究,以馬錢苷、黃芩苷為定量指標,采用HPLC法對其進行含量測定；建立頑痹清丸的HPLC指紋圖譜,并對其相似度進行分析,建立了頑痹清丸 HPLC指紋圖譜及其質(zhì)量評價方法；對頑痹清丸進行一般質(zhì)量檢查,包括水分測定、裝量差異測定和溶散時限的測定,能夠科學全面的評價頑痹清丸的質(zhì)量。
　　結(jié)果：選取絡石藤、土茯苓、黃芩

4、、益母草、乳香、吳茱萸、紫草、牡丹皮8味藥的薄層色譜鑒別列入頑痹清丸質(zhì)量標準,所選用的薄層鑒別方法專屬性強、簡便、可行,可用于頑痹清丸的定性鑒別；參考2010版《中國藥典》,采用 HPLC 法對忍冬藤和黃芩進行含量測定；馬錢苷的 HPLC 色譜條件為：Agilent C18柱(4.6mm ×250mm,5μm)；柱溫：30℃；流動相：乙腈-0.1%磷酸溶液( 12：88 )；流速：1.0mL·min-1；檢測波長：236nm；馬錢苷在

5、0.0134~0.0804mg·mL-1范圍內(nèi)呈良好的線性關(guān)系,r=0.9998；平均加樣回收率為97.07%, RSD 為 1.24%。黃芩苷的 HPLC 色譜條件為：Agilent C18 柱( 4.6mm ×250mm,5μm)；柱溫：30℃；流動相：甲醇-0.1%磷酸溶液(47：53)；流速：1.0mL·min-1；檢測波長為 280nm。黃芩苷在 0. 2776μg~ 2.776μg 范圍內(nèi)呈良好的線性關(guān)系,r=0.9994；

6、平均加樣回收率為99.10%,RSD為1.29%；分別采集了 10 批頑痹清丸 HPLC 指紋圖譜,并進行了方法學考察,通過對頑痹清丸 HPLC指紋圖譜的分析找出其特有指紋特征進行分析,確認了樣品有 20個共有峰；根據(jù) 2010年版《中國藥典》,對頑痹清丸進行一般質(zhì)量檢查,包括水分測定、裝量差異、溶散時限的測定,頑痹清丸的水分、裝量差異、溶散時限均符合2010版藥典規(guī)定。
　　結(jié)論：本課題運用薄層色譜法對頑痹清丸處方中絡石藤、土