白靈菇雜交育種快速篩選體系的構(gòu)建.pdf

1、白靈菇（Pleurotus nebrodensis）又名白靈側(cè)耳、阿魏菇，肉質(zhì)鮮美、風(fēng)味獨(dú)特，是一種營(yíng)養(yǎng)、藥用價(jià)值極高的珍惜食藥用真菌，市場(chǎng)前景廣闊，極具開(kāi)發(fā)潛力。但由于白靈菇栽培品種退化嚴(yán)重、生產(chǎn)周期長(zhǎng)、生物學(xué)轉(zhuǎn)化率低，導(dǎo)致了白靈菇栽培效益低，影響了白靈菇產(chǎn)業(yè)的發(fā)展。本試驗(yàn)利用分子標(biāo)記技術(shù)建立白靈菇單核菌株交配型的快速鑒別體系和優(yōu)良雜交子的快速篩選體系，以縮短白靈菇雜交育種的周期，為白靈菇育種工作提供理論依據(jù)，加快育種進(jìn)程，保證白靈菇

2、產(chǎn)業(yè)健康快速發(fā)展。本研究得到以下結(jié)果:
　　1.采用原生質(zhì)體單核化技術(shù)處理白靈菇菌株H55×I-630，通過(guò)鏡檢得到39個(gè)單核菌株。然后進(jìn)行拮抗試驗(yàn)，成功獲得正極性單核菌株為24個(gè)，負(fù)極性單核菌株為15個(gè)。隨機(jī)選取正、負(fù)極性單核菌株各5個(gè)，與親本菌株進(jìn)行ISSR和SRAP分子標(biāo)記，并進(jìn)行SCAR標(biāo)記的開(kāi)發(fā)，得到7對(duì)特異性引物，其中正極性引物為3條，負(fù)極性引物4條。多重PCR驗(yàn)證結(jié)果正確。
　　2.將退化的白靈菇菌株“白10”

3、進(jìn)行原生質(zhì)體單核化，得到52個(gè)單核菌株，將不同極性的單核菌株進(jìn)行拮抗試驗(yàn)，挑取拮抗線部位菌絲，得到一株表型良好的雙核菌株，命名為“自雜體45×49”。分別測(cè)定“白10”和“自雜體45×49”的纖維素酶活性和漆酶活性，“自雜體45×49”的酶活性顯著高于退化菌株“白10”，并且利用比色法成功鑒別出退化菌株“白10”，從而對(duì)退化的“白10”進(jìn)行了提純復(fù)壯。在菌絲生長(zhǎng)階段利用YBLB試劑成功鑒別出退化的菌株“白10”;在菌絲發(fā)酵階段利用LBL