pH-溫度雙重敏感型納米凝膠的制備及釋藥研究.pdf

1、在給藥系統(tǒng)的研究中，凝膠材料常被用于藥物的控釋。尤其是環(huán)境敏感水凝膠具有刺激應(yīng)答特性，成為藥學(xué)界廣泛關(guān)注的熱點(diǎn)。研究表明，機(jī)體炎癥部位及腫瘤組織周圍pH均低于正常組織，而溫度卻略高于正常體溫。針對這一特征性差異，為了能更好的靶向治療各種炎癥乃至惡性腫瘤，以智能高分子材料為主體構(gòu)建的應(yīng)答式智能釋藥系統(tǒng)成為當(dāng)前研究的熱點(diǎn)方向。本文以葡聚糖（Dex）、N-異丙基丙烯酰胺（NIPAAm）為原料，沉淀聚合法制備pH和溫度雙重敏感的馬來?；暇厶?

2、g-聚（N-異丙基丙烯酰胺）(Dex-MA-g-PNIPAAm)納米凝膠藥物載體，以羥基喜樹堿(HCPT)為藥物模型，研究了不同條件下的釋藥性質(zhì)。
　　1.改性葡聚糖的制備
　　將一定質(zhì)量的順丁烯二酸酐（MA）和葡聚糖（Dex，MW70，000）溶解在LiCl/DMF(10wt％)中，三乙胺作催化劑，一定條件下制備得到馬來酰化葡聚糖(Dex-MA)。核磁共振（1H-NMR）測定其取代度。
　　2．納米凝膠的制備

3、　　分別利用無皂乳液聚合法和沉淀聚合法制備納米凝膠，在沉淀聚合方法中考查了三種不同的表面活性劑（溴化十六烷基三甲銨、吐溫-80、十二烷基硫酸鈉（SDS））以及反應(yīng)配比對納米凝膠的影響。通過比較納米凝膠的形態(tài)、粒徑、包裹率、載藥率等指標(biāo)，最終采用以SDS為乳化劑的沉淀聚合法為最佳制備納米凝膠工藝。
　　3.納米凝膠的性質(zhì)研究
　　納米凝膠的理化性質(zhì)通過FT-IR，1H-NMR，TEM，粒度儀分別進(jìn)行表征。利用透射電鏡和粒度儀考

4、察不同表面活性劑的量對成粒的影響。結(jié)果顯示：在反應(yīng)體系中，當(dāng)表面活性劑的濃度小于其臨界膠束濃度時，得到的納米凝膠粒徑較大、形態(tài)不規(guī)則；而當(dāng)其濃度大于其臨界膠束濃度時，得到的納米凝膠粒徑均勻，形態(tài)圓整，分散性良好。通過調(diào)節(jié)反應(yīng)配比或改變表面活性劑的量可以將粒徑控制在300nm以下。同時考察了溫度對不同配比的納米凝膠粒徑的影響。隨著馬來酰化葡聚糖含量的增多，粒徑增大；隨著溫度的升高，粒徑減小，說明溫度升高納米凝膠發(fā)生了萎縮。
　　濁度

5、法測定不同配比下各個凝膠的臨界相變溫度并考察了pH對其的影響，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，pH3.0時，納米凝膠的臨界相變溫度（LCST）小于PNIPAAm的臨界相變溫度即32℃，在pH6時大于32℃，表明Dex-MA-g-PNIPAAm的LCST既受反應(yīng)配比的影響，也與溶液的pH有關(guān)。以羥基喜樹堿為藥物模型，動態(tài)透析法測定不同條件時的釋藥特性。12h后，在溫度為37℃，pH為2.0、5.0、7.4中的釋藥率分別為11％、19.65％、33％。隨著pH的

6、增大，藥物釋放率逐漸變大，說明納米凝膠發(fā)生了溶漲。在此基礎(chǔ)上進(jìn)一步對納米凝膠的溫敏特性進(jìn)行了探討；4h后，pH7.4時在37℃、40℃的緩沖液中藥物累積釋放率分別為15％、25％。實(shí)驗(yàn)中NP8的LCST為38.1℃，37℃時，介質(zhì)溫度小于其LCST，納米溶膠主要靠溶漲擴(kuò)散釋藥；當(dāng)溫度升高至40℃，即大于自身的LCST時，納米凝膠內(nèi)部結(jié)構(gòu)構(gòu)象發(fā)生變化，疏水性作用增強(qiáng)，凝膠收縮，將藥物擠壓釋放出來，因此后者藥物釋放率明顯高于前者。
　

7、　4.Dex-MA-g-PNIPAAm納米凝膠生物學(xué)實(shí)驗(yàn)研究
　　以RPE細(xì)胞為研究對象，MTT比色法評價納米凝膠的生物相容性，細(xì)胞相對增長率均在90％以上，生物相容性良好。
　　同樣方法制備熒光納米凝膠，研究了影響RPE細(xì)胞內(nèi)攝作用的兩個因素：（1）納米凝膠的濃度，將細(xì)胞放在含有0.01mg/mL、0.1mg/mL、1mg/mL的納米凝膠的培養(yǎng)基中6h，觀察現(xiàn)象。（2）納米凝膠與細(xì)胞接觸時間的影響，將細(xì)胞分別放在1mg/m