診斷彩色多普勒超聲對大鼠睪丸生殖細胞凋亡的影響.pdf

1、目的：以TI，MI為超聲劑量參數(shù)探討診斷彩色多普勒超聲在不同照射時間(相同TI、MI)、不同TI(相應(yīng)MI、相同照射時間)情況下對大鼠睪丸生精細胞凋亡的影響。 方法：應(yīng)用Sequoia512彩色多普勒超聲診斷儀，二維頻率13MHz，彩色頻率10MHz，照射大鼠睪丸(采用鼠齡為40-44天健康SD大鼠，每小組例數(shù)為6例)，分為2個大組，第Ⅰ組：Pwr0dB，TI0.9，MI1.4，聚焦深度1.5cm，彩色取樣框深度1.5cm，調(diào)節(jié)

2、彩色取樣框?qū)挾扰c睪丸長徑相同，速度量程0.03m/s，彩色取樣門(gate)取1，固定持續(xù)照射大鼠睪丸，依照射時間不同分5組：對照組(為假照射組，其他條件相同探頭凍結(jié)狀態(tài)下置于睪丸上30min)，1組(5min組)，2組(10min組)，3(20min組)，4組(30min組)；第Ⅱ組：聚焦深度1.0cm，彩色取樣框深度1.0cm，彩色取樣門(ga()e)取2，速度量程0.03m/s，照射時間均為30min。按不同TI(相應(yīng)MI)分為6

3、組：對照組，同前為假照射組；A組：TI=0(MI=0.34)；B組：TI=0.2(MI=0.74)；C組：TI=0.4(MI=0.91)；D組：TI=0.7(MI=1.2)；E組：TI=0.9(MI=1.3)。Ⅰ、Ⅱ組均于照射后24h取材，應(yīng)用原位末端脫氧核苷酸轉(zhuǎn)移酶標記(theinsituterminaldeoxynucleotidyltransferase-mediateddUTPnickend-labelingtechnique，

4、TUNEL)技術(shù)檢測上述各組凋亡細胞。采用單因素方差分析兩兩比較各組間差異。抽取部分標本做電鏡觀察。 結(jié)果：經(jīng)TUNEL檢測，發(fā)現(xiàn)第Ⅰ組中1組與對照組凋亡細胞數(shù)差異無統(tǒng)計學意義，2、3、4組細胞凋亡率與對照組差別都有統(tǒng)計學意義，隨照射時間的延長細胞凋亡率明顯增加[強陽性率分別為(2.47±0.78)％、(4.43±1.61)％、(6.27±2.08)％]；第Ⅱ組中A組及B組與對照組凋亡強陽性率差別無統(tǒng)計學意義，但B組陽性率與對照

5、組差別有統(tǒng)計學意義，其余各組凋亡強陽性率、陽性率與對照組差別均有統(tǒng)計學意義，且隨MI、TI的增大而凋亡率增加[強陽性率分別為(2.17±0.74)％、(4.80±1.62)％、(6.83±2.24)％]。凋亡細胞主要為精母細胞、精子細胞。電鏡結(jié)果：超聲照射后曲細精管生精細胞排列紊亂，層次不清，有的精子細胞甚至靠近基膜，細胞核內(nèi)染色質(zhì)堆積成塊、邊集，可見核固縮、凋亡小體形成，線粒體水腫、體積增大、嵴減少，內(nèi)質(zhì)網(wǎng)擴張，伴有溶酶體增多，髓樣體

6、形成。精子細胞形態(tài)不規(guī)則，微管結(jié)構(gòu)改變。1組及A組無明顯改變；2組及B、C組改變輕微，排列紊亂為主，核改變不明顯，線粒體輕度水腫；而3、4組及D、E組可見各種改變，又以4組及E組為明顯。 結(jié)論：診斷劑量彩超基于最大劑量TI，MI(0.9，1.4)基礎(chǔ)上，照射大鼠睪丸組織≥10min可引起生殖細胞凋亡；不同TI(相應(yīng)MI)情況下，TI≥0.2(MI≥0.74)照射30min可引起生殖細胞凋亡。這對臨床超聲檢查者自主調(diào)節(jié)聲能輸出有指