DHPO對(duì)鋁中毒小鼠的治療作用機(jī)理及其毒理學(xué)研究.pdf

1、[目的]研究表明，鋁可在人體內(nèi)蓄積并產(chǎn)生慢性毒性。目前對(duì)于鋁中毒疾病的治療尚無十分有效的方法。本實(shí)驗(yàn)把DHPO(1,2-甲基-3-羥基-4-吡啶酮)作為一種新型鋁螯合劑進(jìn)行小鼠動(dòng)物實(shí)驗(yàn)，主要從DHPO對(duì)鋁中毒小鼠的治療作用機(jī)理及其毒理學(xué)方面進(jìn)行研究，為尋求一種安全有效的治療鋁中毒的藥物提供理論依據(jù)。 [方法] 1.DHPO的合成 2-甲基-3-羥基-4-吡喃酮與甲胺水溶液于95～100℃加熱回流，得到白色結(jié)晶即D

2、HPO。 2.DHPO的毒理學(xué)實(shí)驗(yàn) 2.1LD50實(shí)驗(yàn)取健康昆明種小鼠50只，雌雄各半，按體重隨機(jī)分為5個(gè)劑量組。以灌胃方式給藥1次，觀察1w，記錄動(dòng)物死亡數(shù)。 2.2外周血和骨髓微核實(shí)驗(yàn)取健康昆明種小鼠120只，雌雄各半，按體重隨機(jī)分為5組：陰性對(duì)照組、環(huán)磷酰胺陽性對(duì)照組、1/8LD50組、1/4LD50組、1/2LD50組，分別于第二次與第七次給藥后24h進(jìn)行DHPO的微核實(shí)驗(yàn)。 2.3精子畸變實(shí)驗(yàn)健

3、康昆明種雄性小鼠150只，按體重隨機(jī)分為5組：陰性對(duì)照組、環(huán)磷酰胺陽性對(duì)照組、1/8LD50組、1/4LD50組、1/2LD50組，給藥5d，分別在給藥后第14、28、35、42和70d進(jìn)行DHPO的精子畸變實(shí)驗(yàn)。 3.DHPO對(duì)鋁中毒小鼠治療作用機(jī)理研究 取健康昆明種小鼠72只，雌雄各半，按體重隨機(jī)分為6組：陰性對(duì)照組、模型組、DHPO低、中、高劑量組、預(yù)防組，除陰性對(duì)照組外其余各組均給予AlCl3溶液進(jìn)行染毒，制備小

4、鼠鋁中毒模型，其中預(yù)防組在染毒同時(shí)給予DHPO。染毒結(jié)束后，陰性對(duì)照組、模型組給予生理鹽水，DHPO低、中、高劑量組、預(yù)防組給予DHPO，給藥結(jié)束后處死小鼠，取血清及肝、腎、腦組織。 3.1排鋁作用取各組小鼠血清及肝、腎、腦組織消化后用石墨爐原子吸收分光光度法測(cè)微量元素鋁含量。 3.2對(duì)微量元素鋅的影響取各組小鼠血清及肝、腎、腦組織消化后用火焰原子吸收分光光度法測(cè)元素鋅含量。 3.3對(duì)抗氧化系統(tǒng)的恢復(fù)作用取各組小

5、鼠測(cè)血清及肝、腎、腦組織勻漿中超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-PX)活力和丙二醛(MDA)含量。 3.4對(duì)中樞神經(jīng)遞質(zhì)的恢復(fù)作用取各組小鼠測(cè)血清及腦組織勻漿中乙酰膽堿酯酶(AchE)活力。 3.5對(duì)鋁致肝臟、海馬損傷恢復(fù)的形態(tài)學(xué)觀察小鼠肝臟、海馬HE染色，進(jìn)行病理形態(tài)學(xué)觀察。 [結(jié)果] 1.DHPO的合成 結(jié)果表明：熔點(diǎn)、紅外與核磁波譜符合目標(biāo)化合物的結(jié)構(gòu)特征。 2.

6、毒理學(xué)實(shí)驗(yàn) 2.1DHPO的LD50實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明：DHPO的LD50為562.34mg/kg，其95％的可信限為501.19～630.96mg/kg。 2.2外周血和骨髓微核實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明：外周血和骨髓PCE微核率1/8LD50、1/4LD50組微核率與陰性對(duì)照組相比均無顯著性差異(P＞0.05)；1/2LD50組微核率高于陰性對(duì)照組(P＜0.05)。 2.3精子畸變實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明：1/8LD50、1/4LD50組與

7、陰性對(duì)照組比較在第14、28、35、42、70d觀察均無顯著性差異(P＞0.05)；1/2LD50組與陰性對(duì)照組比較在第14、28、35d觀察均有顯著性差異(P＜0.05)，而在第42、70d觀察均無顯著性差異(P＞0.05)。 3.DHPO對(duì)鋁中毒小鼠治療作用機(jī)理研究 3.1排鋁作用給藥各組肝、腎、腦、血清中鋁含量均低于模型組(P＜0.05)。 3.2對(duì)微量元素鋅的影響肝、腎、腦、血清各組間鋅含量均無顯著性差異

8、(P＞0.05)。 3.3對(duì)抗氧化系統(tǒng)的恢復(fù)作用結(jié)果表明，肝臟、腦、血清SOD活力、GSH-PX活力、MDA含量陰性對(duì)照組與模型組比較均有顯著性差異(p＜0.05)；肝臟中劑量組、預(yù)防組SOD活力、GSH-PX活力、MDA含量及高劑量組MDA含量與模型組比較有顯著性差異(P＜0.05)；腎臟各組之間SOD活力、GSH-PX活力、MDA含量均無顯著性差異(P＞0.05)；腦中、高劑量組、預(yù)防組SOD活力、GSH-PX活力、中劑量組

9、、預(yù)防組MDA含量與模型組比較有顯著性差異(P＜0.05)；血清預(yù)防組SOD活力、GSH-PX活力、MDA含量及高劑量組GSH-PX活力與模型組比較有顯著性差異(P＜0.05)；用藥各組SOD活力、GSH-PX活力、MDA含量與陰性對(duì)照組比較肝、腎、腦、血清均無顯著性差異(P＞0.05)。 3.4對(duì)中樞神經(jīng)遞質(zhì)的恢復(fù)作用結(jié)果表明，AchE活力模型組高于陰性對(duì)照組(P＜0.05)，中、高劑量組和預(yù)防組與模型組比較有顯著性差異(P＜

10、0.05)，用藥各組與陰性對(duì)照組比較均無顯著性差異(P＞0.05)。 3.5對(duì)鋁致肝臟、海馬損傷恢復(fù)的形態(tài)學(xué)觀察對(duì)組織切片光鏡下觀察，模型組肝臟、海馬均有損傷，用藥各組對(duì)損傷的恢復(fù)均很明顯。 [結(jié)論]DHPO屬于一種低毒化合物；1/2LD50具有一定的致突變性；1/2LD50具有一定的生殖毒性，但可以在42d內(nèi)恢復(fù)。DHPO能有效的排鋁，且對(duì)微量元素鋅無促排作用。DHPO能拈抗鋁誘發(fā)的中樞神經(jīng)遞質(zhì)功能減退；可以提高抗氧化