VEGF、MVD、nm23在肺癌組織中的表達(dá)及其臨床意義與相關(guān)性研究.pdf

1、目的：肺癌在我國(guó)是最常見的惡性腫瘤之一，對(duì)人民健康危害極大，但其發(fā)病機(jī)制至今仍未闡明。大量的研究實(shí)驗(yàn)證明，肺癌的發(fā)生，發(fā)展和轉(zhuǎn)移的過(guò)程受各種基因的調(diào)控，腫瘤血管形成是腫瘤生長(zhǎng)和轉(zhuǎn)移的物質(zhì)和形態(tài)學(xué)基礎(chǔ)。20世紀(jì)70年代初美國(guó)學(xué)者Flokman首先提出“腫瘤生長(zhǎng)依賴于血管生成”，至90年代初Flokman進(jìn)一步完善了該學(xué)說(shuō)。腫瘤的生長(zhǎng)離不開營(yíng)養(yǎng)血管的再生，腫瘤血管生成是腫瘤生長(zhǎng)和轉(zhuǎn)移的形態(tài)學(xué)基礎(chǔ)，明顯影響其預(yù)后。血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(vascu

2、lar endothelial growth factor，VEGF)是肺癌微血管生成的主要正向調(diào)節(jié)因子之一，特異性很高，是刺激腫瘤生長(zhǎng)的主要因子，它與腫瘤的生長(zhǎng)、浸潤(rùn)及轉(zhuǎn)移密切相關(guān)。微血管密度(micro vascula density，MVD)，則被認(rèn)為是最理想的反應(yīng)腫瘤血管生成情況的指標(biāo)。CD34是存在于血管內(nèi)皮細(xì)胞上的一種抗原，其分子已被純化和克隆，是一種不同于Ⅷ因子相關(guān)抗原的蛋白質(zhì)。研究表明，用CD34進(jìn)行免疫組化染色來(lái)顯示血

3、管內(nèi)皮細(xì)胞比Ⅷ因子相關(guān)抗原更加敏感，特異性也更強(qiáng)。nm-23基因是Steeg等于1988年在鼠K-1735黑色素瘤中分離出來(lái)的一種cDNA基因。目前對(duì)于VEGF與肺癌相關(guān)性的研究很多，但有關(guān)肺癌組織中VEGF、MVD、nm-23的表達(dá)和相關(guān)性及其與肺癌臨床分期、病理分型的關(guān)系方面的研究目前尚處于相對(duì)空白階段。本研究運(yùn)用免疫組化方法檢測(cè)nm-23和VEGF在肺癌中的表達(dá)并以CD34單克隆抗體標(biāo)記測(cè)定微血管密度(MVD)，探討其表達(dá)與肺癌微

4、血管形成及相關(guān)臨床病理因素的關(guān)系及其在肺癌發(fā)生發(fā)展中的作用。揭示三者在肺癌的發(fā)生發(fā)展及預(yù)后中的相關(guān)性，nm-23的表達(dá)若與VEGF、MVD的表達(dá)存在相關(guān)性，則可為肺癌監(jiān)測(cè)及治療提供依據(jù)，結(jié)合三者與其他肺癌相關(guān)產(chǎn)物的表達(dá)則可為肺癌臨床分期、病理分型提供依據(jù)，并為肺癌的發(fā)生發(fā)展的研究及治療提供理論基礎(chǔ)和依據(jù)。方法：收集經(jīng)手術(shù)切除且病理證實(shí)的肺癌病例62例，所有患者術(shù)前均未經(jīng)放療或化療，記錄各患者性別，年齡，腫留大小，組織學(xué)類型，病理分期等臨

5、床資料，采用免疫組化S-P法檢測(cè)標(biāo)本中VEGF、nm-23和MVD的表達(dá)。選取無(wú)壞死的癌旁組織30例作為陰性對(duì)照，所取組織距病灶切端5cm以上。陽(yáng)性判斷標(biāo)準(zhǔn)：每張切片選擇具有代表性的5個(gè)高倍視野進(jìn)行觀察記數(shù)，每個(gè)視野記數(shù)100個(gè)腫瘤細(xì)胞。以出現(xiàn)棕色顆粒為陽(yáng)性細(xì)胞，采用半定量積分法，分別根據(jù)染色程度和染色細(xì)胞百分率進(jìn)行分級(jí)評(píng)分，然后根據(jù)兩項(xiàng)之積確定其陽(yáng)性程度。染色程度：基本不著色為0分，著色淡為1分，著色適中為2分，著色深為3分；著色細(xì)胞

6、占記數(shù)細(xì)胞的百分率：≤5％為0分，≤6％～25％為1分，≤26％～50％為2分，≥51％為3分。將每張切片平均著色程度得分與平均著色細(xì)胞百分率得分各自相乘為其最后得分：≤1分為陰性(-)，2～3分為陽(yáng)性(+)，≥4分為強(qiáng)陽(yáng)性(++)應(yīng)用統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件SPSS f0r windows 15.0，通過(guò)X2檢驗(yàn)及Spearman相關(guān)性分析法分析三者與NSCLC的關(guān)系及三者之間的關(guān)系。結(jié)果： 1.62例肺癌標(biāo)本中VEGF，nm.23和MVD

7、陽(yáng)性表達(dá)率分別為61.396(38/62)、51.6％(32/62)及61.3％(38/62)，30例癌旁組織，VEGF，nm-23和MVD陽(yáng)性表達(dá)率分別為16.7％(5/30)、23.3％(7/30)及20％(6/30)，兩組比較有顯著性差異(P＜0.05)。 2.VEGF，nm-23和MVD表達(dá)與患者的性別、年齡及腫瘤大小、病理類型無(wú)關(guān)(P＞0.05)。 3.VEGF，nm-23和MVD表達(dá)與肺癌分化程度、臨床分期和

8、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有顯著性差異(P＜0.05)。 4.VEGF陽(yáng)性表達(dá)組織中MVD高表達(dá)率為76.3％(29/38)，兩者陽(yáng)性表達(dá)呈正相關(guān)(r=0.388，P＜0.01)。 5.VEGF陽(yáng)性表達(dá)組織中nm-23陽(yáng)性表達(dá)率為36.8％(14/38)，兩者陽(yáng)性表達(dá)呈負(fù)相關(guān)(r=-0.372，P＜0.01)。 6.nm-23陽(yáng)性表達(dá)與MVD表達(dá)無(wú)相關(guān)性(P＞0.05)。 結(jié)論： 1.nm-23定位于細(xì)胞漿，VE